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酵母微囊负载靶向巨噬细胞PD-L1 shRNA抗肿瘤活性研究

摘要第4-6页
Abstract第6-7页
英文缩略词表第16-17页
第一章 前言第17-22页
    1.1 PD-1/PD-L第17-18页
    1.2 巨噬细胞第18-19页
    1.3 酵母微囊第19-20页
    1.4 结肠癌第20-22页
第二章 巨噬细胞极化中PD-L1的表达第22-40页
    2.1 引言第22页
    2.2 实验材料与仪器第22-25页
        2.2.1 实验材料第22-23页
        2.2.2 实验仪器第23-24页
        2.2.3 实验试剂第24页
        2.2.4 实验溶剂第24-25页
    2.3 实验方法第25-28页
        2.3.1 细胞培养第25页
        2.3.2 PEMs分离培养第25页
        2.3.3 巨噬细胞极化第25页
        2.3.4 ELISA第25-26页
        2.3.5 q PCR第26页
        2.3.6 Western Blot第26页
        2.3.7 转染第26-27页
        2.3.8 AOM/DSS法构建小鼠结肠癌模型第27页
        2.3.9 疾病活动指数(Disease activity index,DAI)第27页
        2.3.10 结肠长度检测第27-28页
        2.3.11 HE染色第28页
    2.4 实验结果第28-38页
        2.4.1 巨噬细胞极化第28-29页
        2.4.2 不同极型巨噬细胞PD-L1 表达量差异第29-31页
        2.4.3 sh PD-L1 对巨噬细胞极化的影响第31-34页
        2.4.4 DAI第34页
        2.4.5 结肠长度检测第34-35页
        2.4.6 结肠组织病理切片第35-36页
        2.4.7 结肠癌模型诱导过程中PEMs PD-L1 表达量的变化第36-38页
        2.4.8 结肠癌模型诱导过程小鼠血清IL-10、IL-12 的变化第38页
    2.5 结论第38-40页
第三章 基于酵母微囊口服基因递送系统的构建及性能表征第40-63页
    3.1 引言第40页
    3.2 实验材料与仪器第40-42页
        3.2.1 实验材料第40-41页
        3.2.2 实验仪器第41页
        3.2.3 实验试剂第41-42页
        3.2.4 实验溶剂第42页
    3.3 实验方法第42-48页
        3.3.1 YGM制备第42-43页
        3.3.2 透射电子显微镜(TEM)第43页
        3.3.3 纳米激光粒度仪检测粒径和电位第43页
        3.3.4 不同N/P PEI-shRNA纳米粒的制备第43页
        3.3.5 琼脂糖凝胶电泳实验第43页
        3.3.6 YGM/PEI-shRNA给药系统的制备第43-44页
        3.3.7 FITC标记PEI第44页
        3.3.8 YGM对不同N/P PEI-shRNA纳米粒包封率考察第44页
        3.3.9 反应时间对包封率的影响第44页
        3.3.10 不同p H值对YGM/PEI-shRNA复合物稳定性的影响第44页
        3.3.11 YGM/PEI-shRNA给药系统胃肠道稳定性考察第44-45页
        3.3.12 细胞增殖率第45页
        3.3.13 细胞周期第45页
        3.3.14 细胞凋亡第45-46页
        3.3.15 RBITC标记YGM第46页
        3.3.16 细胞吞噬第46页
        3.3.17 胞内分布第46页
        3.3.18 细胞转染第46-47页
        3.3.19 巨噬细胞吞噬YGM机制考察第47页
        3.3.20 YGM体内转运吸收途径考察第47页
        3.3.21 YGM肠道吸收时间考察第47页
        3.3.22 体内分布第47-48页
    3.4 实验结果第48-62页
        3.4.1 透射电子显微镜(TEM)第48页
        3.4.2 纳米激光粒度仪检测粒径、电位第48-49页
        3.4.3 琼脂糖凝胶电泳实验第49-50页
        3.4.4 YGM对不同N/P比 PEI-shRNA复合物负载情况考察第50-51页
        3.4.5 反应时间对包封率的影响第51-52页
        3.4.6 不同p H值对YGM/PEI-shRNA复合物稳定性的影响第52-53页
        3.4.7 体外模拟胃肠道稳定性考察第53页
        3.4.8 细胞增殖率第53-54页
        3.4.9 细胞周期第54页
        3.4.10 细胞凋亡第54-55页
        3.4.11 细胞吞噬第55-57页
        3.4.12 胞内分布第57页
        3.4.13 细胞转染第57-58页
        3.4.14 巨噬细胞吞噬YGM机制考察第58-59页
        3.4.15 YGM体内吸收途径考察第59-60页
        3.4.16 YGM肠道吸收时间考察第60-61页
        3.4.17 体内分布第61-62页
    3.5 总结第62-63页
第四章 YGM/PEI-shPD-L1 抗肿瘤作用考察第63-83页
    4.1 引言第63页
    4.2 实验材料与仪器第63-65页
        4.2.1 实验材料第63-64页
        4.2.2 实验仪器第64页
        4.2.3 实验试剂第64-65页
        4.2.4 实验溶剂第65页
    4.3 实验方法第65-68页
        4.3.1 模拟肿瘤微环境对巨噬细胞极化的影响第65页
        4.3.2 划痕修复实验第65页
        4.3.3 Transwell迁移实验第65-66页
        4.3.4 YGM/PEI-shPD-L1 抗结肠癌作用考察第66-68页
    4.4 实验结果第68-82页
        4.4.1 PD-L1 在模拟肿瘤微环境中对巨噬细胞M2 型极化的影响第68-70页
        4.4.2 划痕修复实验第70页
        4.4.3 Transwell实验第70-71页
        4.4.4 YGM/PEI-shPD-L1 体内抗结肠癌作用考察第71-82页
    4.5 总结第82-83页
第五章 全文总结第83-84页
参考文献第84-89页
个人简历第89-90页
致谢第90页

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