| 摘要 | 第8-9页 |
| Abstract | 第9页 |
| 1 前言 | 第10-32页 |
| 1.1 蛋白质的泛素化修饰 | 第10-19页 |
| 1.1.1 泛素及泛素化修饰 | 第10-12页 |
| 1.1.2 蛋白质泛素化类型及其生物学功能 | 第12-13页 |
| 1.1.3 泛素连接酶 | 第13-16页 |
| 1.1.4 NEDD4家族泛素连接酶 | 第16-19页 |
| 1.2 Ras超家族蛋白 | 第19-25页 |
| 1.2.1 Ras家族蛋白结构 | 第19-20页 |
| 1.2.2 Ras超家族蛋白功能 | 第20-21页 |
| 1.2.3 Ras超家族不同亚家族蛋白 | 第21-25页 |
| 1.3 Ras超家族蛋白的泛素化修饰 | 第25-30页 |
| 1.3.1 Ras家族和Rho家族的泛素化 | 第26-27页 |
| 1.3.2 Rab家族的泛素化 | 第27-30页 |
| 1.4 研究内容及意义 | 第30-32页 |
| 1.4.1 研究内容 | 第30页 |
| 1.4.2 研究意义 | 第30-32页 |
| 2 材料与方法 | 第32-56页 |
| 2.1 实验材料 | 第32-36页 |
| 2.1.1 质粒 | 第32页 |
| 2.1.2 菌株 | 第32页 |
| 2.1.3 细胞系 | 第32页 |
| 2.1.4 药品及试剂 | 第32-34页 |
| 2.1.5 酶 | 第34页 |
| 2.1.6 相关抗体 | 第34-35页 |
| 2.1.7 仪器及材料 | 第35-36页 |
| 2.2 实验方法 | 第36-56页 |
| 2.2.1 分子克隆 | 第36-42页 |
| 2.2.2 细胞实验 | 第42-45页 |
| 2.2.3 蛋白SDS-PAGE电泳与Western blot分析 | 第45-51页 |
| 2.2.4 蛋白质实验相关方法 | 第51-56页 |
| 3 结果和讨论 | 第56-71页 |
| 3.1 Ras超家族蛋白成员可能作为NEDD4家族泛素连接酶底物的初级筛选 | 第56-59页 |
| 3.1.1 NEDD4家族的泛素连接酶会影响Ras超家族蛋白的蛋白水平 | 第56-59页 |
| 3.2 泛素连接酶Smurf1调控Arl3的蛋白水平的深入研究 | 第59-67页 |
| 3.2.1 泛素连接酶Smurf1能够降低Arl3的蛋白水平 | 第59-60页 |
| 3.2.2 溶酶体抑制剂能抑制Smurf1介导的Arl3的蛋白水平下调 | 第60页 |
| 3.2.3 Arl3是一种与Smurf1存在相互作用的蛋白 | 第60-61页 |
| 3.2.4 Arl3和Smurf1的C2和HECT结构域存在相互作用 | 第61-62页 |
| 3.2.5 Smurf1能增强Arl3在细胞内的泛素化水平 | 第62-63页 |
| 3.2.6 Smurf1能直接催化Arl3蛋白的体外泛素化 | 第63-64页 |
| 3.2.7 Arl3的第32位赖氨酸是Smurf1介导Arl3泛素化的关键位点 | 第64-65页 |
| 3.2.8 Arl3第32位赖氨酸突变后不能定位到溶酶体上 | 第65-67页 |
| 3.3 实验讨论 | 第67-70页 |
| 3.3.1 NEDD4家族的泛素连接酶对Ras超家族蛋白的蛋白水平有影响 | 第67-68页 |
| 3.3.2 泛素连接酶Smurf1调控Arl3的蛋白水平的深入研究 | 第68-70页 |
| 3.4 展望 | 第70-71页 |
| 参考文献 | 第71-76页 |
| 致谢 | 第76页 |
