| 摘要 | 第7-9页 |
| ABSTRACT | 第9-10页 |
| 本文主要英文缩略词 | 第11-12页 |
| 绪论 | 第12-14页 |
| 第一部分 文献综述 | 第14-28页 |
| 第一章 棉花黄萎病及其致病菌 | 第14-18页 |
| 1 棉花黄萎病的发病特征及分布 | 第14页 |
| 2 黄萎病菌的特性及侵染循环过程 | 第14-16页 |
| 2.1 棉花黄萎病菌特性 | 第14-15页 |
| 2.2 棉花黄萎病菌的侵染循环 | 第15-16页 |
| 3 黄萎病菌致病机理和抗病研究进展 | 第16-18页 |
| 3.1 黄萎病菌的致病机理 | 第16页 |
| 3.2 黄萎病菌抗病研究进展 | 第16-18页 |
| 第二章 农杆菌介导的基因敲除技术在真菌基因功能研究中的应用 | 第18-24页 |
| 1 基因功能研究的常用方法 | 第18-19页 |
| 1.1 基因敲除 | 第18页 |
| 1.2 人工染色体技术 | 第18页 |
| 1.3 RNAi | 第18-19页 |
| 1.4 基因陷阱 | 第19页 |
| 2 丝状真菌基因敲除技术的研究进展 | 第19-20页 |
| 3 基因敲除原理和技术路线 | 第20-21页 |
| 3.1 基因敲除原理 | 第20页 |
| 3.2 基因敲除技术路线 | 第20-21页 |
| 3.2.1 敲除载体的构建 | 第20页 |
| 3.2.2 敲除载体的转化 | 第20-21页 |
| 3.2.3 转化子的筛选 | 第21页 |
| 3.2.4 转化子的鉴定 | 第21页 |
| 4 基因敲除技术在真菌研究中的展望 | 第21-24页 |
| 第三章 MAPK信号通路及SHO1基因 | 第24-28页 |
| 1 MAPK信号通路相关介绍 | 第24-26页 |
| 1.1 MAPK信号通路的组成 | 第24-25页 |
| 1.2 MAPK信号通路在真菌中的的作用 | 第25页 |
| 1.3 MAPK信号通路的研究现状及展望 | 第25-26页 |
| 2 SHO1基因的相关介绍 | 第26-28页 |
| 2.1 Sho1蛋白结构特征 | 第26页 |
| 2.2 Sho1蛋白功能介绍 | 第26-27页 |
| 2.3 Sho1在真菌中的研究进展 | 第27-28页 |
| 第二部分 研究报告 | 第28-66页 |
| 第四章 大丽轮枝菌中VDSHO1基因敲除、回补载体的构建和转化子的获得 | 第28-52页 |
| 1 实验材料和方法 | 第28-44页 |
| 1.1 实验材料 | 第28-34页 |
| 1.1.1 菌株及载体 | 第28页 |
| 1.1.2 培养基 | 第28-33页 |
| 1.1.3 试剂 | 第33页 |
| 1.1.4 引物 | 第33-34页 |
| 1.2 实验方法 | 第34-44页 |
| 1.2.1 序列的获得分析及引物的设计 | 第34页 |
| 1.2.2 敲除载体和回补载体的构建 | 第34-35页 |
| 1.2.3 CTAB裂解法少量提取真菌基因组DNA | 第35-36页 |
| 1.2.4 PCR扩增相关序列 | 第36-44页 |
| 2 结果与分析 | 第44-50页 |
| 2.1 VdSho1基因的克隆及序列分析 | 第44-46页 |
| 2.2 基因缺失载体与回补载体的构建与验证 | 第46-50页 |
| 2.2.1 基因缺失载体与回补载体的构建 | 第46-47页 |
| 2.2.2 基因敲除载体与回补载体的酶切验证 | 第47-50页 |
| 3 讨论 | 第50-52页 |
| 第五章 大丽轮枝菌中VDSHO1基因的功能分析 | 第52-66页 |
| 1 实验材料和方法 | 第52-55页 |
| 1.1 实验材料 | 第52-53页 |
| 1.1.1 菌株及植株 | 第52页 |
| 1.1.2 实验试剂 | 第52页 |
| 1.1.3 引物 | 第52-53页 |
| 1.2 实验方法 | 第53-55页 |
| 1.2.1 菌丝生长及表型观察 | 第53页 |
| 1.2.2 孢子萌发时间及萌发极性观察 | 第53页 |
| 1.2.3 菌株产孢量测定 | 第53页 |
| 1.2.4 高氧高渗压力测定 | 第53-54页 |
| 1.2.5 菌株根部附着力和穿透力测定 | 第54页 |
| 1.2.6 菌株的致病力分析 | 第54页 |
| 1.2.7 菌株侵袭性生长和菌株积累量测定 | 第54-55页 |
| 2 结果与分析 | 第55-63页 |
| 2.1 VdSho1基因对黄萎病菌菌落形态及菌丝生长的影响 | 第55-56页 |
| 2.2 VdSho1基因对黄萎病菌孢子萌发的影响 | 第56-59页 |
| 2.2.1 孢子萌发时间延迟 | 第56-57页 |
| 2.2.2 孢子萌发极性的改变 | 第57-58页 |
| 2.2.3 孢子产量的减少 | 第58-59页 |
| 2.3 VdSho1基因对真菌耐高氧高渗能力的影响 | 第59-60页 |
| 2.4 VdSho1基因对真菌附着力的影响 | 第60页 |
| 2.5 VdSho1基因对菌株侵袭性生长和致病能力的影响 | 第60-63页 |
| 2.5.1 VdSho1基因的缺失降低了病菌致病力 | 第60-61页 |
| 2.5.2 菌株侵入茎秆能力分析 | 第61-62页 |
| 2.5.3 菌株积累量测定 | 第62-63页 |
| 3 讨论 | 第63-66页 |
| 结论 | 第66-68页 |
| 参考文献 | 第68-74页 |
| 攻读硕士期间发表的论文 | 第74-76页 |
| 致谢 | 第76页 |
