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鱼腥藻PCC7120染色体Ⅱ型毒素—抗毒素基因对asr0757/alr0758的研究与鉴定

摘要第7-9页
ABSTRACT第9-10页
第1章 综述第11-26页
    1.1 蓝藻概述第11-14页
        1.1.1 蓝藻简介第11-13页
        1.1.2 蓝藻的分子遗传研究概况第13-14页
    1.2 鱼腥藻概述第14-17页
        1.2.1 鱼腥藻PCC7120简介第14-15页
        1.2.2 鱼腥藻PCC7120的遗传转化第15-17页
    1.3 毒素-抗毒素系统第17-24页
        1.3.1 毒素-抗毒素系统概述第17-18页
        1.3.2 毒素-抗毒素系统的分类与作用机制第18-19页
        1.3.3 Ⅱ型毒素-抗毒素系统第19-22页
        1.3.4 毒素-抗毒素系统功能第22-23页
        1.3.5 毒素-抗毒素系统应用价值第23-24页
    1.4 实验内容,方案及研究意义第24-26页
        1.4.1 实验内容第24页
        1.4.2 实验方案第24-25页
        1.4.3 研究意义第25-26页
第2章 asr0757/alr0758的克隆载体与表达载体构建第26-39页
    2.1 引言第26页
    2.2 实验材料与方法第26-34页
        2.2.1 实验材料第26页
        2.2.2 实验试剂第26-28页
        2.2.3 实验仪器第28-29页
        2.2.4 实验方法与步骤第29-34页
    2.3 实验结果第34-38页
        2.3.1 鱼腥藻PCC7120总DNA的提取第34页
        2.3.2 克隆载体pMD18-T-asr0757和pMD18-T-alr0758构建第34-35页
        2.3.3 重组表达载体pET-30a-asr0757,pET-30a-alr0758的构建第35-36页
        2.3.4 克隆载体与表达载体测序结果第36-38页
    2.4 讨论第38-39页
第3章 asr0757/alr0758重组表达载体蛋白诱导表达,优化与鉴定第39-49页
    3.1 引言第39-41页
    3.2 实验材料第41-42页
    3.3 实验方法与步骤第42-44页
        3.3.1 目的基因asr0757,alr0758的诱导表达第42-43页
        3.3.2 毒素基因alr0758诱导表达条件的优化第43页
        3.3.3 目的蛋白纯化与western blot检测第43-44页
    3.4 实验结果第44-47页
        3.4.1 目的基因asr0757,alr0758的诱导表达第44-45页
        3.4.2 毒素基因alr0758诱导表达条件的优化第45-47页
        3.4.3 目的蛋白纯化与western blot检测第47页
    3.5 讨论第47-49页
第4章 双启动子表达载体构建及毒素-抗毒素基因的选择性诱导表达第49-59页
    4.1 引言第49页
    4.2 实验材料与方法第49页
        4.2.1 实验材料第49页
        4.2.2 实验仪器第49页
    4.3 实验方法与步骤第49-52页
        4.3.1 目的基因PCR扩增第49-50页
        4.3.2 重组克隆载体的构建第50页
        4.3.3 重组选择性表达载体的构建第50-52页
        4.3.4 目的基因asr0757和alr0758的诱导表达第52页
        4.3.5 毒素基因alr0758对菌体细胞的毒性作用和抗毒性基因asr0757的抗毒性作用第52页
    4.4 实验结果第52-57页
        4.4.1 目的基因PCR扩增第52-53页
        4.4.2 重组克隆载体pMD18-T-PBAD,pMD18-T-asr0757和pMD18-T-alr0758的构建第53-54页
        4.4.3 重组选择性表达载体的构建第54-55页
        4.4.4 目的基因asr0757和alr0758的诱导表达第55-56页
        4.4.5 alr0758/asr0757表达蛋白的毒性作用和抗毒性作用第56-57页
    4.5 讨论第57-59页
结论及展望第59-61页
参考文献第61-67页
致谢第67-68页
附录A 攻读硕士学位期间发表的学术论文第68页

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