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氧化应激损伤骨骼肌成肌分化中线粒体生物节律的机制研究

摘要第6-8页
Abstract第8-10页
1 前言第11-12页
综述第12-18页
    参考文献第17-18页
2 实验材料及研究方法第18-33页
    2.1 实验材料第18-22页
    2.2 技术路线第22-23页
    2.3 外源性叔丁基过氧化氢影响成肌细胞的实验方法第23-30页
        2.3.1 C2C12成肌细胞培养第23-24页
        2.3.2 C2C12成肌细胞存活率MTT法第24页
        2.3.3 C2C12成肌细胞MDA检测第24-25页
        2.3.4 SDS-PAGE凝胶电泳第25-26页
        2.3.5 湿转电转印法第26-27页
        2.3.6 Western杂交第27页
        2.3.7 C2C12成肌细胞RT-PCR第27-30页
    2.4 线粒体稳态影响成肌细胞分化中生物钟变化的实验方法第30-33页
        2.4.1 C2C12成肌细胞培养同2.3.1第30页
        2.4.2 C2C12成肌细胞siRNA OPA1条件第30-32页
        2.4.3 C2C12成肌细胞western blotting检测同2.3.4,2.3.5,2.3.6的方法,检测OPA1,Drp1,Bmal1第32页
        2.4.4 C2C12成肌细胞RT-PCR检测同2.3.7第32页
        2.4.5 C2C12成肌细胞膜电位检测第32页
        2.4.6 C2C12成肌细胞ROS检测第32-33页
    2.5 统计学原理第33页
3 实验结果与分析第33-65页
    3.1 不同浓度叔丁基过氧化氢对C2C12细胞的存活率影响第33-34页
    3.2 不同浓度叔丁基过氧化氢作用C2C12细胞的MDA(丙二醛)检测第34-35页
    3.3 叔丁基过氧化氢作用成肌分化中分化标志因子MyoD的变化表达第35-36页
    3.4 叔丁基过氧化氢作用成肌分化中抗氧化性的表达第36-38页
    3.5 叔丁基过氧化氢作用成肌分化中线粒体能量代谢变化第38-39页
    3.6 叔丁基过氧化氢作用成肌分化中线粒体融合分裂蛋白表达第39-45页
    3.7 叔丁基过氧化氢作用成肌分化中生物合成的表达第45-47页
    3.8 叔丁基过氧化氢作用成肌分化中生物钟的表达第47-48页
    3.9 叔丁基过氧化氢作用成肌分化中OPA1剪切酶OMA1的表达第48-49页
    3.10 OPA1 siRNA的干扰片段的筛选第49-50页
    3.11 OPA1 siRNA,Drp1抑制剂作用后成肌分化中氧化应激的变化第50-52页
    3.12 OPA1 siRNA,Drp1抑制剂作用后成肌分化中线粒体能量代谢的表达第52-54页
    3.13 OPA1 siRNA后成肌分化中线粒体融合分裂的表达第54-56页
    3.14 OPA1 siRNA,Drp1抑制剂作用后成肌分化中线粒体生物合成基因表达水平第56-57页
    3.15 OPA1 siRNA,Drp1抑制剂作用后成肌分化中生物钟的表达变化第57-58页
    3.16 OPA1 siRNA,Drp1抑制剂作用后成肌分化的基因水平表达第58-59页
    3.17 讨论第59-65页
4 结论与建议第65-66页
参考文献第66-70页
附件第70-72页
致谢第72页
研究生个人简历第72页

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