| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 1 文献综述 | 第9-14页 |
| 1.1 茶树类黄酮代谢途径 | 第9-10页 |
| 1.2 类黄酮合成途径下游相关基因研究进展 | 第10-12页 |
| 1.2.1 F3H研究进展 | 第10-11页 |
| 1.2.2 DFR研究进展 | 第11-12页 |
| 1.2.3 LAR研究进展 | 第12页 |
| 1.3 类黄酮物质的代谢工程研究进展 | 第12-14页 |
| 2 引言 | 第14-16页 |
| 2.1 研究目的及意义 | 第14页 |
| 2.2 研究路线 | 第14-15页 |
| 2.3 研究内容 | 第15-16页 |
| 3 材料方法 | 第16-24页 |
| 3.1 实验材料 | 第16页 |
| 3.2 仪器与试剂 | 第16-17页 |
| 3.2.1 主要药品和试剂 | 第16页 |
| 3.2.2 主要仪器 | 第16页 |
| 3.2.3 主要试剂的配方 | 第16-17页 |
| 3.3 实验方法 | 第17-24页 |
| 3.3.1 基因的克隆及功能分析 | 第17-21页 |
| 3.3.2 DFR重组蛋白的瞬时表达分析 | 第21-22页 |
| 3.3.3 儿茶素高产工程菌株的构建 | 第22-24页 |
| 4 结果与分析 | 第24-40页 |
| 4.1 茶树F3H的克隆及功能分析 | 第24-29页 |
| 4.1.1 CsF3HORF的克隆及生物信息学分析 | 第24-26页 |
| 4.1.2 CsF3H基因的表达特异性分析 | 第26页 |
| 4.1.3 CsF3H的原核表达 | 第26-28页 |
| 4.1.4 CsF3H融合蛋白酶活的检测 | 第28-29页 |
| 4.2 茶树DFR的相关研究 | 第29-36页 |
| 4.2.1 CsDFR基因的克隆 | 第29-30页 |
| 4.2.2 CsDFR基因的生物信息学分析 | 第30-32页 |
| 4.2.3 CsDFR基因的实时荧光定量分析 | 第32-33页 |
| 4.2.4 CsDFR融合蛋白的表达及酶活检测 | 第33-35页 |
| 4.2.5 CsDFR在本氏烟叶片中的亚细胞定位 | 第35-36页 |
| 4.3 高产儿茶素工程菌的构建及发酵分析 | 第36-40页 |
| 4.3.1 高产儿茶素工程菌的构建 | 第36-37页 |
| 4.3.2 重组大肠杆菌的产物检测 | 第37-40页 |
| 5 讨论 | 第40-42页 |
| 5.1 茶树DFR1、DFR2的组织特异性及酶活分析 | 第40页 |
| 5.2 利用茶树F3H、DFR及LAR基因构建儿茶素的高产菌株 | 第40-42页 |
| 6 结论 | 第42-43页 |
| 参考文献 | 第43-48页 |
| 附录 | 第48-50页 |
| 致谢 | 第50-51页 |
| 个人简介及成果 | 第51页 |
