| 摘要 | 第2-4页 |
| abstract | 第4-5页 |
| 前言 | 第14-27页 |
| 1 斑马鱼的特性及发育过程 | 第14-16页 |
| 1.1 斑马鱼的生物特性 | 第14-15页 |
| 1.2 斑马鱼胚胎的发育 | 第15-16页 |
| 2 斑马鱼作为模式生物在发育毒理学上的应用 | 第16-22页 |
| 2.1 斑马鱼在心脏发育毒性研究中的应用 | 第17-19页 |
| 2.2 斑马鱼在肝脏发育毒性研究中的应用 | 第19-20页 |
| 2.3 斑马鱼在神经发育毒性研究中上的应用 | 第20-21页 |
| 2.4 斑马鱼在血管和血细胞发育毒性研究中的应用 | 第21-22页 |
| 3 斑马鱼在建立人类疾病模型上的应用 | 第22-23页 |
| 3.1 斑马鱼在建立血管疾病模型上的应用 | 第22-23页 |
| 3.2 斑马鱼在建立肝脏疾病模型上的应用 | 第23页 |
| 3.3 斑马鱼在建立神经系统疾病模型上的应用 | 第23页 |
| 4 对乙酰氨基酚的特性 | 第23-26页 |
| 4.1 对乙酰氨基酚的理化特性 | 第24页 |
| 4.2 对乙酰氨基酚的肝脏毒性作用 | 第24-25页 |
| 4.3 对乙酰氨基酚的肾脏毒性作用 | 第25-26页 |
| 4.4 对乙酰氨基酚的其他毒性作用 | 第26页 |
| 5 本研究的目的与意义 | 第26-27页 |
| 实验研究 | 第27-109页 |
| 研究一 对乙酰氨基酚持续作用于斑马鱼胚胎的毒性研究 | 第27-54页 |
| 1 材料 | 第27-28页 |
| 1.1 实验动物 | 第27页 |
| 1.2 试剂与药品 | 第27页 |
| 1.3 设备与仪器 | 第27页 |
| 1.4 实验引物 | 第27-28页 |
| 2 方法 | 第28-32页 |
| 2.1 鱼卵收集 | 第28页 |
| 2.2 给药方法 | 第28-29页 |
| 2.3 RNA提取 | 第29页 |
| 2.4 RNA反转录 | 第29页 |
| 2.5 荧光定量PCR | 第29-30页 |
| 2.6 石蜡切片的制备 | 第30-31页 |
| 2.7 FABP10A基因的检测 | 第31页 |
| 2.8 斑马鱼肝脏再生基因的检测 | 第31-32页 |
| 3 结果 | 第32-51页 |
| 3.1 孵化率和存活率统计 | 第32-33页 |
| 3.2 不同浓度药物组斑马鱼发育情况观察 | 第33-35页 |
| 3.3 不同浓度药物组斑马鱼心囊发育情况 | 第35-37页 |
| 3.4 不同浓度药物组斑马鱼尾部发育情况 | 第37-38页 |
| 3.5 不同浓度药物组斑马鱼色素变化情况 | 第38-41页 |
| 3.6 对乙酰氨基酚对甲状腺素关联基因表达的影响 | 第41-45页 |
| 3.7 对乙酰氨基酚对斑马鱼肝脏发育的影响 | 第45-49页 |
| 3.8 FABP10A基因扩增产物鉴定与测序结果 | 第49-51页 |
| 3.9 肝脏再生基因PCR扩增产物检测结果 | 第51页 |
| 4 讨论 | 第51-53页 |
| 4.1 斑马鱼形态、存活率以及孵化率的变化 | 第51页 |
| 4.2 斑马鱼心囊和色素沉着的变化 | 第51-52页 |
| 4.3 斑马鱼尾部的弯曲变化 | 第52-53页 |
| 4.4 肝脏关联基因的表达情况 | 第53页 |
| 5 小结 | 第53-54页 |
| 研究二 对乙酰氨基酚短期作用于斑马鱼胚胎的毒性研究 | 第54-69页 |
| 1 材料 | 第54页 |
| 2 方法 | 第54页 |
| 2.1 鱼卵收集 | 第54页 |
| 2.2 给药方法 | 第54页 |
| 2.3 RNA的提取、反转录及荧光定量PCR | 第54页 |
| 3 结果 | 第54-67页 |
| 3.1 不同浓度药物组斑马鱼孵化率和死亡率统计 | 第54-56页 |
| 3.2 不同浓度药物组斑马鱼心囊发育情况 | 第56-58页 |
| 3.3 不同浓度药物组斑马鱼色素变化情况 | 第58-61页 |
| 3.4 对乙酰氨基酚对斑马鱼甲状腺素相关基因表达的影响 | 第61-64页 |
| 3.5 对乙酰氨基酚对斑马鱼肝脏的影响 | 第64-67页 |
| 4 讨论 | 第67-68页 |
| 5 小结 | 第68-69页 |
| 研究三 对乙酰氨基酚对斑马鱼幼鱼色素及甲状腺素的影响 | 第69-77页 |
| 1 材料 | 第69页 |
| 2 方法 | 第69-70页 |
| 2.1 鱼卵的收集 | 第69页 |
| 2.2 鱼卵的孵化 | 第69页 |
| 2.3 给药方法 | 第69页 |
| 2.4 RNA的提取、反转录及荧光定量PCR | 第69-70页 |
| 3 结果 | 第70-75页 |
| 3.1 不同浓度给药组斑马鱼存活率统计 | 第70页 |
| 3.2 不同浓度药物组斑马鱼心囊发育情况观察 | 第70-72页 |
| 3.3 不同浓度药物组斑马鱼色素的变化 | 第72-73页 |
| 3.4 对乙酰氨基酚给药72h对甲状腺素关联基因表达的影响 | 第73-75页 |
| 4 讨论 | 第75-76页 |
| 4.1 不同浓度药物组斑马鱼存活率的统计 | 第75-76页 |
| 4.2 色素的变化及甲状腺素基因的表达 | 第76页 |
| 5 小结 | 第76-77页 |
| 研究四 对乙酰氨基酚对斑马鱼幼鱼肝脏关联基因转录的影响 | 第77-109页 |
| 1 材料 | 第77-79页 |
| 1.1 实验动物 | 第77页 |
| 1.2 试剂及其试剂盒 | 第77页 |
| 1.3 实验仪器 | 第77页 |
| 1.4 PCR引物 | 第77-79页 |
| 2 方法 | 第79-82页 |
| 2.1 总RNA提取及检测 | 第79页 |
| 2.2 RNA样品的处理与测序 | 第79-80页 |
| 2.3 测序数据质量评估 | 第80页 |
| 2.4 短序列比对 | 第80页 |
| 2.5 斑马鱼转录组的可变剪切分析 | 第80-81页 |
| 2.6 斑马鱼新转录本的预测 | 第81页 |
| 2.7 转录组数据的SNP和INDEL检测 | 第81页 |
| 2.8 基因表达量的分析 | 第81页 |
| 2.9 差异表达基因的分析 | 第81-82页 |
| 2.10 差异表达基因的GO功能分析 | 第82页 |
| 2.11 差异表达基因的Pathway功能分析 | 第82页 |
| 2.12 荧光定量PCR验证 | 第82页 |
| 3 结果 | 第82-106页 |
| 3.1 RNA提取检测结果 | 第82-84页 |
| 3.2 测序及数据过滤结果 | 第84-86页 |
| 3.3 短序列比对结果 | 第86-87页 |
| 3.4 斑马鱼可变剪切分析结果 | 第87页 |
| 3.5 斑马鱼新转录本的预测结果 | 第87-88页 |
| 3.6 转录组数据的SNP和INDEL检测结果 | 第88页 |
| 3.7 基因表达量的分析结果 | 第88-90页 |
| 3.8 差异表达基因的检测结果 | 第90-96页 |
| 3.9 差异表达基因GO功能分析结果 | 第96-104页 |
| 3.10 差异表达基因Pathway功能分析结果 | 第104-105页 |
| 3.11 RT-PCR验证结果 | 第105-106页 |
| 4 讨论 | 第106-108页 |
| 4.1 对乙酰氨基酚诱导肝损伤关联基因及其通路 | 第106-108页 |
| 4.2 对乙酰氨基酚诱导肝中毒特征性表达模式 | 第108页 |
| 5 小结 | 第108-109页 |
| 结论 | 第109-110页 |
| 本课题研究的创新点 | 第110-111页 |
| 致谢 | 第111-112页 |
| 参考文献 | 第112-125页 |
| 附录 | 第125-136页 |
| 作者简介 | 第136页 |
