| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-12页 |
| 第一章 前言 | 第12-22页 |
| 1 植物抗寒基因研究现状 | 第12-15页 |
| ·CBF转录因子研究 | 第12-13页 |
| ·COR基因研究 | 第13-14页 |
| ·抗冻蛋AFP研究 | 第14页 |
| ·LEA蛋白基因 | 第14-15页 |
| ·渗透调节相关酶基因 | 第15页 |
| 2 基因克隆技术研究及RT-PCR技术研究 | 第15-19页 |
| ·基因克隆技术研究进展 | 第15-16页 |
| ·RT-PCR技术研究进展 | 第16-19页 |
| ·半定量RT-PCR技术 | 第16-17页 |
| ·定量RT-PCR技术 | 第17-19页 |
| 3 研究目的及意义 | 第19-21页 |
| 4 技术路线 | 第21-22页 |
| 第二章 Ptcor8全长基因克隆 | 第22-45页 |
| 1 材料与方法 | 第22-30页 |
| ·试验材料 | 第22页 |
| ·主要仪器 | 第22页 |
| ·主要试剂 | 第22-23页 |
| ·试验方法 | 第23-30页 |
| ·引物设计 | 第23-24页 |
| ·总DNA提取 | 第24-25页 |
| ·以枳DNA为模板PCR扩增筛选引物 | 第25页 |
| ·扩增片段回收纯化 | 第25-26页 |
| ·克隆转化 | 第26-27页 |
| ·PCR检测 | 第27页 |
| ·质粒提取 | 第27-28页 |
| ·测序 | 第28-30页 |
| 2 结果与分析 | 第30-43页 |
| ·总DNA提取与质量检测结果 | 第30页 |
| ·引物筛选PCR结果 | 第30-31页 |
| ·PCR产物回收结果 | 第31-32页 |
| ·转化平板培养结果 | 第32页 |
| ·克隆菌液PCR检测结果 | 第32-33页 |
| ·重组质粒提取检测结果 | 第33-34页 |
| ·测序结果与分析 | 第34-43页 |
| ·枳,金柑,柠檬Ptcor8全长基因测序结果 | 第34-37页 |
| ·枳,金柑,柠檬Ptcor8全长基因序列拼接结果 | 第37页 |
| ·枳,金柑,柠檬Ptcor8全长基因ORF比对结果 | 第37-39页 |
| ·枳,金柑,柠檬Ptcor8全长基因ORF编码氨基酸比对结果 | 第39-40页 |
| ·枳,金柑,柠檬Ptcor8全长基因比对结果 | 第40-43页 |
| 3 讨论 | 第43页 |
| 4 小结 | 第43-45页 |
| 第三章 Ptcor8基因在柑橘中的表达分析 | 第45-58页 |
| 1 材料与方法 | 第45-49页 |
| ·试材处理 | 第45页 |
| ·Ptcor8基因在不同柑橘种类中的表达分析 | 第45页 |
| ·Ptcor8基因表达与枳生理落叶的关系 | 第45页 |
| ·主要仪器和生化试剂 | 第45-46页 |
| ·总RNA提取 | 第46-47页 |
| ·总RNA纯化 | 第47页 |
| ·单链cDNA的合成 | 第47-48页 |
| ·半定量内参引物扩增 | 第48页 |
| ·半定量RT-PCR反应 | 第48-49页 |
| ·实时荧光定量PCR检测 | 第49页 |
| 2 结果与分析 | 第49-56页 |
| ·RNA提取质量检测结果 | 第49-50页 |
| ·Ptcor8基因在枳中周年表达结果 | 第50-52页 |
| ·Ptcor8基因在不同柑橘种类中的表达 | 第52-53页 |
| ·Ptcor8基因表达与枳生理落叶的关系 | 第53-56页 |
| ·材料处理期间温度变化及落叶情况观测结果 | 第53-54页 |
| ·半定量RT-PCR和定量RT-PCR检测结果 | 第54-56页 |
| 3 讨论 | 第56-57页 |
| ·Ptcor8基因表达与温度变化的关系 | 第56页 |
| ·Ptcor8基因表达与不同柑橘种类抗寒能力的关系 | 第56页 |
| ·Ptcor8基因表达与枳生理落叶的关系 | 第56-57页 |
| 4 小结 | 第57-58页 |
| 结论 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-66页 |
| 附录 | 第66-67页 |
| 缩略词及英汉对照 | 第67-68页 |
| 致谢 | 第68-69页 |
| 个人简历 | 第69页 |
