| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 第1章 绪论 | 第14-28页 |
| 1.1 影响小孢子胚胎发生的因素 | 第14-16页 |
| 1.1.1 小孢子的胚胎发生能力受基因型的影响 | 第14-15页 |
| 1.1.2 小孢子的胚胎发生能力受发育阶段的影响 | 第15页 |
| 1.1.3 小孢子胚胎发生受培养条件的影响 | 第15-16页 |
| 1.1.4 小孢子胚胎发生能力受胁迫处理的影响 | 第16页 |
| 1.2 小孢子胚胎发生的分子机制 | 第16-18页 |
| 1.2.1 响应胁迫处理 | 第17-18页 |
| 1.2.2 抑制配子体过程 | 第18页 |
| 1.2.3 小孢子胚胎发生中的表观遗传学修饰 | 第18页 |
| 1.3 转录组学在小孢子胚胎发生中的应用 | 第18-19页 |
| 1.4 自噬在与高等植物胚胎发生的联系 | 第19-26页 |
| 1.4.1 植物细胞中的自噬分类 | 第19-21页 |
| 1.4.2 自噬与有性生殖之间的关系 | 第21-22页 |
| 1.4.3 自噬与细胞程序性死亡之间的关系 | 第22-23页 |
| 1.4.4 自噬与细胞代谢之间的关系 | 第23页 |
| 1.4.5 自噬对小孢子胚胎发生的影响 | 第23-24页 |
| 1.4.6 自噬的研究方法 | 第24-26页 |
| 1.5 自噬的研究过成中存在的问题 | 第26-27页 |
| 1.6 本研究的目的和意义 | 第27-28页 |
| 第2章 材料与方法 | 第28-35页 |
| 2.1 实验材料 | 第28-29页 |
| 2.1.1 引物 | 第28-29页 |
| 2.1.2 实验仪器 | 第29页 |
| 2.1.3 数据分析软件 | 第29页 |
| 2.2 实验方法 | 第29-35页 |
| 2.2.1 烟草小孢子的分离与培养 | 第29-30页 |
| 2.2.2 自噬抑制处理烟草小孢子 | 第30页 |
| 2.2.3 小孢子的收集 | 第30页 |
| 2.2.4 超薄切片样本的制备 | 第30-31页 |
| 2.2.5 小孢子的总RNA提取及RT-PCR反应 | 第31页 |
| 2.2.6 cDNA合成 | 第31-32页 |
| 2.2.7 RT-qPCR | 第32-33页 |
| 2.2.8 MDC检测自噬现象 | 第33页 |
| 2.2.9 自噬体的荧光观察 | 第33页 |
| 2.2.10 FDA活性染色 | 第33页 |
| 2.2.11 DAPI染色 | 第33-34页 |
| 2.2.12 RNA-seq样品的准备及数据处理 | 第34-35页 |
| 第3章 实验结果和分析 | 第35-49页 |
| 3.1 烟草小孢子的胚胎发生过程 | 第35-36页 |
| 3.2 烟草小孢子两种发育途径下自噬现象的比较 | 第36-41页 |
| 3.2.1 MDC染色比较两种发育途径下的自噬现象 | 第37-38页 |
| 3.2.2 超薄切片比较两种发育途径下的自噬现象 | 第38-41页 |
| 3.3 两种发育途径下自噬频率和强度的比较 | 第41-42页 |
| 3.4 自噬抑制剂3-MA对小孢子胚胎发生的影响 | 第42-45页 |
| 3.4.1 3-MA对细胞活性的影响 | 第43-44页 |
| 3.4.2 自噬对小孢子胚胎发生的影响 | 第44-45页 |
| 3.5 烟草小孢子胚胎发生过程中基因的差异表达 | 第45-49页 |
| 3.5.1 差异表达基因的聚类分析 | 第45-46页 |
| 3.5.2 两种发育途径前期的自噬相关基因的表达水平 | 第46-49页 |
| 第4章 讨论 | 第49-52页 |
| 4.1 自噬在胚胎发生的过程中被诱导 | 第49页 |
| 4.2 自噬的发生频率与强度受诱导时间的影响 | 第49-50页 |
| 4.3 自噬被抑制有助于细胞活性的维持 | 第50页 |
| 4.4 自噬体的形成是决定胚胎发生的重要因素 | 第50-51页 |
| 4.5 自噬相关基因在胚胎发生过程中呈多种表达模式 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-59页 |
| 附录 | 第59-60页 |
| 致谢 | 第60页 |
