| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 1 绪论 | 第11-19页 |
| 1.1 漆酶的定义及其来源 | 第11-12页 |
| 1.1.1 漆酶的定义 | 第11页 |
| 1.1.2 漆酶的来源 | 第11页 |
| 1.1.3 疣孢漆斑菌 | 第11-12页 |
| 1.2 漆酶的性质 | 第12页 |
| 1.3 漆酶的结构 | 第12-14页 |
| 1.3.1 漆酶的活性中心 | 第12-13页 |
| 1.3.2 漆酶的高级结构 | 第13页 |
| 1.3.3 漆酶的催化机理 | 第13-14页 |
| 1.4 真菌漆酶的培养 | 第14-15页 |
| 1.4.1 培养方式 | 第14页 |
| 1.4.2 培养条件 | 第14页 |
| 1.4.3 全自动不锈钢发酵罐 | 第14-15页 |
| 1.5 漆酶的分离纯化 | 第15页 |
| 1.6 漆酶的应用 | 第15-18页 |
| 1.6.1 食品中漆酶的应用 | 第15-16页 |
| 1.6.2 染料脱色和降解 | 第16页 |
| 1.6.3 造纸工业中漆酶的应用 | 第16页 |
| 1.6.4 漆酶的电化学应用 | 第16-17页 |
| 1.6.5 其他应用 | 第17-18页 |
| 1.7 本研究的目的 | 第18-19页 |
| 2 疣孢漆斑菌GH-01的液体培养研究 | 第19-28页 |
| 2.1 实验材料 | 第19页 |
| 2.1.1 实验菌株 | 第19页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第19页 |
| 2.1.3 主要仪器 | 第19页 |
| 2.1.4 培养基 | 第19页 |
| 2.2 实验方法 | 第19-21页 |
| 2.2.1 疣孢漆斑菌GH-01的活化 | 第19-20页 |
| 2.2.2 漆酶活力的测定 | 第20页 |
| 2.2.3 漆酶蛋白含量的测定 | 第20页 |
| 2.2.4 疣孢漆斑菌液体发酵产酶的初步测定 | 第20页 |
| 2.2.5 种子液接种量对疣孢漆斑菌产漆酶活力的影响 | 第20页 |
| 2.2.6 发酵液接种量对产漆酶活力的影响 | 第20-21页 |
| 2.2.7 接种菌龄对产漆酶活力的影响 | 第21页 |
| 2.2.8 Cu浓度对产漆酶活力的影响 | 第21页 |
| 2.2.9 常规漆酶底物对产漆酶活力的影响 | 第21页 |
| 2.2.10 发酵罐放大培养产漆酶的研究 | 第21页 |
| 2.3 结果与分析 | 第21-26页 |
| 2.3.1 蛋白质标准曲线 | 第21-22页 |
| 2.3.2 疣孢漆斑菌GH-01液体发酵产酶的一般进程 | 第22页 |
| 2.3.3 种子液接种量对产漆酶活力的影响 | 第22-23页 |
| 2.3.4 接种菌龄对产漆酶活力的影响 | 第23页 |
| 2.3.5 发酵液接种量对产酶活力的影响 | 第23-24页 |
| 2.3.6 铜离子浓度对产酶活力的影响 | 第24页 |
| 2.3.7 酚类物质对产漆酶活力的影响 | 第24-25页 |
| 2.3.8 优化后的疣孢漆斑菌GH-01发酵罐产漆酶的一般进程 | 第25-26页 |
| 2.3.9 发酵罐培养疣孢漆斑菌GH-01补加营养物质的研究 | 第26页 |
| 2.4 讨论 | 第26-27页 |
| 2.5 本章小结 | 第27-28页 |
| 3 漆酶的纯化 | 第28-34页 |
| 3.1 实验材料 | 第28页 |
| 3.1.1 实验菌株 | 第28页 |
| 3.1.2 药品 | 第28页 |
| 3.1.3 主要仪器 | 第28页 |
| 3.1.4 培养基 | 第28页 |
| 3.2 实验方法 | 第28-30页 |
| 3.2.1 粗酶液的制备 | 第28页 |
| 3.2.2 缓冲体系的选择 | 第28-29页 |
| 3.2.3 硫酸铵盐析 | 第29页 |
| 3.2.4 透析 | 第29页 |
| 3.2.5 DEAE-Sepharose Fast Flow阴离子交换柱层析 | 第29-30页 |
| 3.2.6 Sephadex G-75分子筛层析 | 第30页 |
| 3.2.7 凝胶电泳检测纯化后的漆酶 | 第30页 |
| 3.3 结果与分析 | 第30-33页 |
| 3.3.1 缓冲体系的确定 | 第30-31页 |
| 3.3.2 缓冲液pH值的确定 | 第31页 |
| 3.3.3 离子交换层析离子强度的选择 | 第31页 |
| 3.3.4 硫酸铵饱和度的确定 | 第31-32页 |
| 3.3.5 目的蛋白的分离纯化 | 第32页 |
| 3.3.6 纯化结果 | 第32-33页 |
| 3.4 讨论 | 第33页 |
| 3.5 本章小结 | 第33-34页 |
| 4 漆酶部分酶学性质及对染料的脱色研究 | 第34-41页 |
| 4.1 实验材料 | 第34-35页 |
| 4.1.1 主要试剂 | 第34页 |
| 4.1.2 主要仪器 | 第34-35页 |
| 4.2 实验方法 | 第35页 |
| 4.2.1 漆酶的纯化 | 第35页 |
| 4.2.2 温度对漆酶活性的影响及热稳定性的研究 | 第35页 |
| 4.2.3 pH值对漆酶活性的影响及热稳定性的研究 | 第35页 |
| 4.2.4 漆酶染料脱色的研究 | 第35页 |
| 4.3 结果分析 | 第35-39页 |
| 4.3.1 温度对漆酶活性的影响及热稳定性的研究 | 第35-36页 |
| 4.3.2 pH值对漆酶活性的影响及pH稳定性的研究 | 第36-37页 |
| 4.3.3 漆酶对不同染料的脱色 | 第37页 |
| 4.3.4 不同染料含量对降解率的影响 | 第37-38页 |
| 4.3.5 漆酶含量的影响 | 第38页 |
| 4.3.6 全扫描结果与分析 | 第38-39页 |
| 4.4 讨论 | 第39-40页 |
| 4.5 本章小结 | 第40-41页 |
| 5 漆酶的电化学研究 | 第41-47页 |
| 5.1 材料与设备 | 第41页 |
| 5.1.1 实验材料 | 第41页 |
| 5.1.2 主要试剂 | 第41页 |
| 5.1.3 主要仪器及电极 | 第41页 |
| 5.2 方法 | 第41-42页 |
| 5.2.1 电化学测量方法 | 第41页 |
| 5.2.2 制备Lac-Nafion/GP电极 | 第41页 |
| 5.2.3 Lac-Nafion/GP电极的直接电化学 | 第41页 |
| 5.2.4 Lac-Nafion/GP电极的对O_2电催化作用 | 第41-42页 |
| 5.2.5 Lac-Nafion/GP电极的对H_2O_2电催化作用 | 第42页 |
| 5.3 结果与分析 | 第42-45页 |
| 5.3.1 Lac-Nafion/GP电极直接电化学现象 | 第42页 |
| 5.3.2 Lac-Nafion/GP电极对O_2电催化作用 | 第42-43页 |
| 5.3.3 Lac-Nafion/GP电极的对H_2O_2电催化作用 | 第43页 |
| 5.3.4 不同pH值下,Lac-Nafion/GP电极对H_2O_2电催化作用 | 第43-44页 |
| 5.3.5 不同H_2O_2浓度下,Lac-Nafion/GP电极对H_2O_2电催化作用 | 第44页 |
| 5.3.6 对不同H_2O_2浓度下的Lac-Nafion/GP电极的I-T(电流时间)曲线 | 第44-45页 |
| 5.4 讨论 | 第45-46页 |
| 5.5 本章小结 | 第46-47页 |
| 结论 | 第47-48页 |
| 参考文献 | 第48-51页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第51-52页 |
| 致谢 | 第52-53页 |
