| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 第一章 绪论 | 第10-24页 |
| 1.1 分泌型磷脂酶A2的特性和应用研究进展 | 第10-18页 |
| 1.1.1 分泌型磷脂酶A_2的分类 | 第10-13页 |
| 1.1.2 分泌型磷脂酶A_2的结构和功能 | 第13-16页 |
| 1.1.3 分泌型磷脂酶A_2 的应用和研究进展 | 第16-18页 |
| 1.2 黑曲霉表达系统和异源表达策略 | 第18-22页 |
| 1.2.1 黑曲霉表达系统 | 第18-19页 |
| 1.2.2 黑曲霉表达系统中异源表达研究 | 第19-22页 |
| 1.3 本课题来源、研究内容和意义 | 第22-24页 |
| 1.3.1 课题来源 | 第22页 |
| 1.3.2 研究内容 | 第22页 |
| 1.3.3 研究意义 | 第22-24页 |
| 第二章 PLA_2表达质粒的构建与表达 | 第24-63页 |
| 2.1 引言 | 第24页 |
| 2.2 实验材料和设备 | 第24-30页 |
| 2.2.1 主要仪器设备 | 第24-25页 |
| 2.2.2 主要试剂 | 第25-27页 |
| 2.2.3 培养基与溶液配制 | 第27-29页 |
| 2.2.4 实验菌株和质粒 | 第29页 |
| 2.2.5 引物序列 | 第29-30页 |
| 2.3 实验方法 | 第30-48页 |
| 2.3.1 PLA_2表达质粒的构建 | 第30-41页 |
| 2.3.2 PLA_2表达质粒转化无孢黑曲霉SH-2 | 第41-46页 |
| 2.3.3 PLA_2转化株pyrG标记去除 | 第46-48页 |
| 2.4 结果与讨论 | 第48-62页 |
| 2.4.1 PLA_2表达质粒的构建 | 第48-56页 |
| 2.4.2 PLA_2表达质粒转化无孢黑曲霉SH-2 | 第56-60页 |
| 2.4.3 PLA_2转化株pyrG标记去除 | 第60-62页 |
| 2.5 本章小结 | 第62-63页 |
| 第三章 PLA_2多拷贝表达质粒的构建与表达 | 第63-77页 |
| 3.1 引言 | 第63页 |
| 3.2 实验材料和设备 | 第63-66页 |
| 3.2.1 主要仪器与设备 | 第63-64页 |
| 3.2.2 主要试剂 | 第64页 |
| 3.2.3 培养基与溶液配置 | 第64-65页 |
| 3.2.4 实验菌株和质粒 | 第65页 |
| 3.2.5 引物序列 | 第65-66页 |
| 3.3 实验方法 | 第66-69页 |
| 3.3.1 多拷贝表达质粒的构建 | 第66-67页 |
| 3.3.2 多拷贝表达质粒转化无孢黑曲霉SH-2 | 第67页 |
| 3.3.3 实时荧光定量PCR（qRT-PCR）检测 | 第67-69页 |
| 3.4 结果与讨论 | 第69-75页 |
| 3.4.1 多拷贝表达质粒的构建 | 第69-71页 |
| 3.4.2 多拷贝表达质粒转化无孢黑曲霉SH-2 | 第71-74页 |
| 3.4.3 实时荧光定量PCR（qRT-PCR）检测 | 第74-75页 |
| 3.5 本章小结 | 第75-77页 |
| 第四章 PLA_2表达菌株 5L罐发酵 | 第77-84页 |
| 4.1 引言 | 第77页 |
| 4.2 实验材料和设备 | 第77-78页 |
| 4.2.1 主要仪器与设备 | 第77页 |
| 4.2.2 主要试剂 | 第77页 |
| 4.2.3 培养基与溶液配置 | 第77-78页 |
| 4.2.4 发酵菌株 | 第78页 |
| 4.3 实验方法 | 第78-79页 |
| 4.3.1 种子培养基培养 | 第78页 |
| 4.3.25L发酵罐发酵 | 第78-79页 |
| 4.3.3 发酵液检测 | 第79页 |
| 4.4 结果与讨论 | 第79-83页 |
| 4.4.1 发酵过程参数 | 第79-81页 |
| 4.4.2 发酵液检测 | 第81-83页 |
| 4.5 本章小结 | 第83-84页 |
| 结论与展望 | 第84-86页 |
| 本文创新之处 | 第86-87页 |
| 参考文献 | 第87-91页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第91-92页 |
| 致谢 | 第92-93页 |
| 附件 | 第93页 |
