| 中文摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-24页 |
| 1 玉米根萤叶甲 | 第11-16页 |
| 1.1 玉米根萤叶甲的形态特征 | 第11页 |
| 1.2 玉米根萤叶甲的生活史 | 第11-12页 |
| 1.3 玉米根萤叶甲的危害 | 第12-13页 |
| 1.4 玉米根萤叶甲的防治 | 第13-14页 |
| 1.5 玉米根萤叶甲传入我国的风险预测 | 第14-16页 |
| 2 围食膜 | 第16-20页 |
| 2.1 围食膜的功能 | 第16-17页 |
| 2.2 围食膜的组成 | 第17-20页 |
| 3 RNAi | 第20-23页 |
| 3.1 昆虫RNAi效率的研究 | 第20-22页 |
| 3.2 RNAi在IPM上的应用 | 第22-23页 |
| 4 本论文的研究目的及意义 | 第23-24页 |
| 第二章 玉米根萤叶甲几丁质合成酶Ⅱ基因DvvCHS2的分子特性及表达量分析 | 第24-37页 |
| 1 材料与方法 | 第24-31页 |
| 1.1 供试虫源及饲养 | 第24页 |
| 1.2 试剂(详见附录Ⅰ) | 第24页 |
| 1.3 玉米根萤叶甲成虫人工饲料制作 | 第24-25页 |
| 1.4 主要仪器 | 第25页 |
| 1.5 引物设计 | 第25页 |
| 1.6 总RNA的提取与cDNA第一链合成 | 第25-26页 |
| 1.7 PCR扩增、产物回收纯化、连接及转化 | 第26-29页 |
| 1.8 克隆PCR和质粒提取 | 第29-30页 |
| 1.9 不同发育时期、不同组织DvvCHS2表达量测定(荧光定量PCR) | 第30-31页 |
| 2 结果与分析 | 第31-35页 |
| 2.1 玉米根萤叶甲成虫中肠形态 | 第31页 |
| 2.2 玉米根萤叶甲DvvCHS2的cDNA序列及推导的蛋白序列 | 第31-32页 |
| 2.3 几种昆虫CHS2的氨基酸序列对比 | 第32页 |
| 2.4 昆虫CHS2的系统进化树分析 | 第32-33页 |
| 2.5 不同组织DvvCHS2的表达量 | 第33-35页 |
| 2.6 不同发育时期DvvCHS2的表达量 | 第35页 |
| 3 讨论 | 第35-37页 |
| 第三章 玉米根萤叶甲几丁质合成酶Ⅱ基因DvvCHS2的功能分析 | 第37-46页 |
| 1 材料与方法 | 第37-41页 |
| 1.1 供试虫源及饲养 | 第37页 |
| 1.2 试剂(详见附录Ⅰ) | 第37页 |
| 1.3 玉米根萤叶甲成虫人工饲料制作 | 第37页 |
| 1.4 主要仪器 | 第37-38页 |
| 1.5 T7启动子引物设计 | 第38页 |
| 1.6 总RNA的提取与cDNA第一链合成 | 第38页 |
| 1.7 含有dsRNA模板DNA序列的质粒的合成 | 第38-39页 |
| 1.8 dsRNA的合成 | 第39-40页 |
| 1.9 dsRNA沉默效率实验设计 | 第40-41页 |
| 1.10 生物测定 | 第41页 |
| 1.11 DvvCHS2对药剂敏感度影响的实验 | 第41页 |
| 2 结果与分析 | 第41-44页 |
| 2.1 dsRNA的合成 | 第41页 |
| 2.2 dsCHS2的沉默效率 | 第41-42页 |
| 2.3 玉米根萤叶甲成虫对西维因和毒死蜱的敏感性 | 第42-43页 |
| 2.4 沉默DvvCHS2后玉米根萤叶甲成虫对毒死蜱和西维因的敏感度变化 | 第43-44页 |
| 3 讨论 | 第44-46页 |
| 第四章 玉米根萤叶甲中肠几丁质酶基因DvvMgCHT的分子特性及表达量分析 | 第46-58页 |
| 1 材料与方法 | 第46-53页 |
| 1.1 供试虫源及饲养 | 第46页 |
| 1.2 试剂(附录Ⅰ) | 第46页 |
| 1.3 玉米根萤叶甲成虫人工饲料制作 | 第46-47页 |
| 1.4 主要仪器 | 第47页 |
| 1.5 引物设计 | 第47页 |
| 1.6 总RNA的提取与cDNA第一链合成 | 第47-48页 |
| 1.7 PCR扩增、产物回收纯化、连接及转化 | 第48-51页 |
| 1.8 克隆PCR和质粒提取 | 第51-52页 |
| 1.9 不同发育时期、不同组织DvvMgCHT表达量测定(荧光定量PCR) | 第52-53页 |
| 2 结果与分析 | 第53-57页 |
| 2.1 玉米根萤叶甲DvvMgCHT的cDNA序列及推导的蛋白序列 | 第53页 |
| 2.2 几种昆虫CHT的氨基酸序列对比 | 第53-54页 |
| 2.3 昆虫CHT的系统进化树分析 | 第54-55页 |
| 2.4 不同组织DvvMgCHT的表达量 | 第55-56页 |
| 2.5 不同发育时期DvvMgCHT的表达量 | 第56-57页 |
| 3 讨论 | 第57-58页 |
| 第五章 玉米根萤叶甲中肠几丁质酶基因DvvMgCHT的功能分析 | 第58-65页 |
| 1 材料与方法 | 第58-62页 |
| 1.1 供试虫源及饲养 | 第58页 |
| 1.2 试剂(附录Ⅰ) | 第58页 |
| 1.3 玉米根萤叶甲成虫人工饲料制作 | 第58页 |
| 1.4 主要仪器 | 第58-59页 |
| 1.5 T7启动子引物设计 | 第59页 |
| 1.6 总RNA的提取与cDNA第一链合成 | 第59页 |
| 1.7 含有dsRNA模板DNA序列的质粒的合成 | 第59-60页 |
| 1.8 dsRNA的合成 | 第60-61页 |
| 1.9 dsRNA沉默效率实验设计 | 第61-62页 |
| 1.10 DvvMgCHT对药剂敏感度影响的实验 | 第62页 |
| 2 结果与分析 | 第62-63页 |
| 2.1 dsMgCHT的沉默效率 | 第62-63页 |
| 2.2 沉默DvvMgCHT后玉米根萤叶甲成虫对毒死蜱和西维因的敏感度变化 | 第63页 |
| 3 讨论 | 第63-65页 |
| 第六章 玉米根萤叶甲围食膜因子基因DvvPMPs的分子特性及表达量分析 | 第65-78页 |
| 1 材料与方法 | 第65-72页 |
| 1.1 供试虫源及饲养 | 第65页 |
| 1.2 试剂(附录Ⅰ) | 第65页 |
| 1.3 玉米根萤叶甲成虫人工饲料制作 | 第65-66页 |
| 1.4 主要仪器 | 第66页 |
| 1.5 引物设计 | 第66页 |
| 1.6 总RNA的提取与cDNA第一链合成 | 第66-67页 |
| 1.7 PCR扩增、产物回收纯化、连接及转化 | 第67-70页 |
| 1.8 克隆PCR和质粒提取 | 第70-71页 |
| 1.9 不同发育时期、不同组织DvvPMPs表达量测定(荧光定量PCR) | 第71-72页 |
| 2 结果与分析 | 第72-76页 |
| 2.1 玉米根萤叶甲DvvPMs的cDNA序列及推导的蛋白序列 | 第72页 |
| 2.2 玉米根萤叶甲PMPs的氨基酸序列对比 | 第72-73页 |
| 2.3 昆虫PMP的系统进化树分析 | 第73-74页 |
| 2.4 不同组织DvvPMPs的表达量 | 第74-75页 |
| 2.5 不同发育时期DvvPMPs的表达量 | 第75-76页 |
| 3 讨论 | 第76-78页 |
| 第七章 玉米根萤叶甲围食膜因子基因DvvPMPs的功能分析 | 第78-86页 |
| 1 材料与方法 | 第78-82页 |
| 1.1 供试虫源及饲养 | 第78页 |
| 1.2 试剂(附录Ⅰ) | 第78页 |
| 1.3 玉米根萤叶甲成虫人工饲料制作 | 第78页 |
| 1.4 主要仪器 | 第78页 |
| 1.5 T7启动子引物设计 | 第78-79页 |
| 1.6 总RNA的提取与cDNA第一链合成 | 第79页 |
| 1.7 含有dsRNA模板DNA序列的质粒的合成 | 第79-80页 |
| 1.8 dsRNA的合成 | 第80-81页 |
| 1.9 dsRNA沉默效率实验设计 | 第81-82页 |
| 1.10 DvvPMPs对药剂敏感度影响的实验 | 第82页 |
| 2 结果与分析 | 第82-84页 |
| 2.1 dsPMPs的沉默效率 | 第82-83页 |
| 2.2 沉默DvvPMPs后玉米根萤叶甲成虫对毒死蜱和西维因的敏感度变化 | 第83-84页 |
| 3 讨论 | 第84-86页 |
| 全文总结与展望 | 第86-88页 |
| 1 总结 | 第86-87页 |
| 2 本研究创新之处 | 第87页 |
| 3 问题与展望 | 第87-88页 |
| 参考文献 | 第88-104页 |
| 致谢 | 第104-105页 |
| 附录Ⅰ 本论文所用试剂、试剂盒列表 | 第105-106页 |
| 附录Ⅱ 本论文荧光定量和dsRNA合成所用的引物 | 第106-107页 |
| 附录Ⅲ 本论文克隆的所有基因序列 | 第107-119页 |
| 作者简介 | 第119页 |
