| 摘要 | 第6-7页 |
| abstract | 第7页 |
| 英文缩略表 | 第11-12页 |
| 第一章 引言 | 第12-21页 |
| 1.1 水稻白叶枯病研究进展 | 第12-14页 |
| 1.1.1 水稻白叶枯病的危害 | 第12页 |
| 1.1.2 水稻白叶枯病抗病基因相关研究 | 第12-13页 |
| 1.1.3 水稻白叶枯病感病基因相关研究 | 第13-14页 |
| 1.2 基因编辑技术概述 | 第14-18页 |
| 1.2.1 ZFNS技术与TALENS技术 | 第14-16页 |
| 1.2.2 CRISPR技术简介 | 第16-17页 |
| 1.2.3 CRISPR技术的优势 | 第17页 |
| 1.2.4 CRISPR技术在生物科学研究中的应用 | 第17-18页 |
| 1.3 本研究的立题依据和技术路线 | 第18-21页 |
| 1.3.1 本研究的立题依据和意义 | 第18-19页 |
| 1.3.2 本研究的技术路线 | 第19-21页 |
| 第二章 材料与方法 | 第21-32页 |
| 2.1 实验材料 | 第21-22页 |
| 2.1.1 水稻材料 | 第21页 |
| 2.1.2 酶和主要试剂、耗材 | 第21-22页 |
| 2.1.3 引物信息 | 第22页 |
| 2.2 实验方法 | 第22-32页 |
| 2.2.1 水稻基因组DNA的提取 | 第22-23页 |
| 2.2.2 PCR反应体系及程序 | 第23-24页 |
| 2.2.3 GenomeWalking | 第24-25页 |
| 2.2.4 PCR产物纯化 | 第25-26页 |
| 2.2.5 载体连接与连接产物转化 | 第26页 |
| 2.2.5.1 PCR产物连接pEASY载体 | 第26页 |
| 2.2.5.2 转化大肠杆菌Top10感受态 | 第26页 |
| 2.2.6 质粒提取 | 第26-27页 |
| 2.2.7 质粒载体转化农杆菌 | 第27页 |
| 2.2.8 CRISPR/Cas9表达载体构建 | 第27页 |
| 2.2.8.1 CRISPR靶点选择 | 第27页 |
| 2.2.8.2 CRISPR载体构建 | 第27页 |
| 2.2.9 植物表达载体转化水稻愈伤组织 | 第27-28页 |
| 2.2.10 水稻白叶枯病菌的接种 | 第28-29页 |
| 2.2.10.1 白叶枯病菌的培养 | 第28页 |
| 2.2.10.2 水稻叶片注射接种 | 第28-29页 |
| 2.2.11 RNA样品的处理与qRT-PCR | 第29-31页 |
| 2.2.11.1 磨样 | 第29页 |
| 2.2.11.2 RNA提取 | 第29-30页 |
| 2.2.11.3 RNA反转成CDNA | 第30-31页 |
| 2.2.11.4 qRT-PCR | 第31页 |
| 2.2.12 Xig1基因在烟草叶片的瞬时表达 | 第31-32页 |
| 第三章 结果与分析 | 第32-42页 |
| 3.1 Xig1基因表达分析 | 第32-33页 |
| 3.2 Xig1基因的克隆 | 第33-34页 |
| 3.3 XIG1的亚细胞定位 | 第34-36页 |
| 3.3.1 瞬时表达载体的构建 | 第34-35页 |
| 3.3.2 XIG1的在烟草中的瞬时表达与显微观察 | 第35-36页 |
| 3.4 Xig1基因编辑水稻突变体的创制与分析 | 第36-37页 |
| 3.4.1 CRISPR表达载体的构建 | 第36-37页 |
| 3.4.2 水稻遗传转化 | 第37页 |
| 3.5 基因编辑植株靶点编辑情况分析 | 第37-39页 |
| 3.6 T-DNAfree植株的筛选 | 第39页 |
| 3.7 基因编辑植株水稻白叶枯病抗性分析 | 第39-41页 |
| 3.8 突变材料主要农艺性状考察 | 第41-42页 |
| 第四章 讨论 | 第42-44页 |
| 第五章 全文结论 | 第44-45页 |
| 5.1 主要结论 | 第44页 |
| 5.2 后续研究计划 | 第44-45页 |
| 参考文献 | 第45-53页 |
| 致谢 | 第53-54页 |
| 作者简历 | 第54页 |