摘要 | 第8-10页 |
Abstract | 第10-11页 |
縮略语表 | 第12-13页 |
1 前言 | 第13-30页 |
1.1 抵抗素与人类疾病 | 第13-15页 |
1.1.1 抵抗素与二型糖尿病 | 第13-14页 |
1.1.2 抵抗素与肝脏疾病 | 第14-15页 |
1.1.3 抵抗素与心血管疾病 | 第15页 |
1.1.4 抵抗素与重症病人死亡率 | 第15页 |
1.2 抵抗素的生理功能 | 第15-16页 |
1.3 抵抗素的主要信号途径 | 第16-19页 |
1.3.1 抵抗素与AMPK信号通路 | 第17-18页 |
1.3.2 抵抗素与Akt信号通路 | 第18页 |
1.3.3 抵抗素与NF-κB信号通路 | 第18-19页 |
1.4 抵抗素的表达调控 | 第19页 |
1.5 SIRT1与健康长寿 | 第19-24页 |
1.5.1 SIRT1的生理生化特点 | 第21-23页 |
1.5.2 SIRT1在防止肝细胞脂肪变性中的作用 | 第23-24页 |
1.6 细胞衰老 | 第24-27页 |
1.6.1 细胞衰老概念的修正 | 第25-27页 |
1.6.2 SIRT1与细胞衰老 | 第27页 |
1.7 SIRT1功能受损的分子表型 | 第27-28页 |
1.8 研究的目的意义 | 第28-30页 |
2 材料与方法 | 第30-43页 |
2.1 实验材料 | 第30页 |
2.1.1 实验细胞 | 第30页 |
2.1.2 菌株和质粒 | 第30页 |
2.2 主要仪器与试剂 | 第30-33页 |
2.2.1 主要仪器 | 第30-31页 |
2.2.2 主要试剂 | 第31页 |
2.2.3 工作液 | 第31-32页 |
2.2.4 相关生物学软件 | 第32-33页 |
2.3 实验方法 | 第33-43页 |
2.3.1 细胞培养 | 第33页 |
2.3.2 重组抵抗素处理HepG2细胞与原代肝细胞 | 第33页 |
2.3.3 质粒浓度和纯度检测 | 第33页 |
2.3.4 细胞转染 | 第33页 |
2.3.5 细胞总RNA提取 | 第33-34页 |
2.3.6 RNA浓度检测和反转录 | 第34页 |
2.3.7 实时定量PCR | 第34-36页 |
2.3.8 双荧光素酶实验 | 第36页 |
2.3.9 Western blot | 第36-37页 |
2.3.10 免疫组化 | 第37页 |
2.3.11 染色质免疫共沉淀 | 第37-39页 |
2.3.12 小鼠血清Resistin ELISA检测 | 第39页 |
2.3.13 小鼠PGE2浓度ELISA检测 | 第39-40页 |
2.3.14 免疫共沉淀 | 第40-41页 |
2.3.15 领位连接实验 | 第41-42页 |
2.3.16 实验数据分析 | 第42-43页 |
3 结果与分析 | 第43-65页 |
3.1 抵抗素在人肝癌细胞系HepG2中损伤SIRT1的功能 | 第43-49页 |
3.2 抵抗素在小鼠原代肝细胞中损伤SIRT1的功能 | 第49-56页 |
3.3 抵抗素增加小鼠原代肝细胞衰老程度 | 第56-61页 |
3.4 巨噬细胞分泌因子对肝细胞SIRT1的表达调控 | 第61-65页 |
4 讨论 | 第65-67页 |
创新点与不足 | 第67-68页 |
1 创新点 | 第67页 |
2 不足 | 第67-68页 |
参考文献 | 第68-75页 |
研究生期间发表文章 | 第75-76页 |
致谢 | 第76页 |