| 致谢 | 第6-8页 |
| 摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10-11页 |
| 符号清单 | 第15-20页 |
| 1 绪论 | 第20-39页 |
| 1.1 柑橘黄龙病概况 | 第20-25页 |
| 1.1.1 柑橘黄龙病的发生情况及分布 | 第20-21页 |
| 1.1.2 柑橘黄龙病症状和危害 | 第21-23页 |
| 1.1.2.1 柑橘黄龙病症状 | 第21-22页 |
| 1.1.2.2 柑橘黄龙病危害 | 第22-23页 |
| 1.1.3 柑橘黄龙病检测技术 | 第23-25页 |
| 1.1.3.1 传统生物学诊断 | 第23-24页 |
| 1.1.3.2 电镜观察 | 第24页 |
| 1.1.3.3 血清学检测 | 第24页 |
| 1.1.3.4 分子生物学检测 | 第24-25页 |
| 1.2 基于核酸扩增技术的检测方法基本流程及其存在的问题 | 第25-28页 |
| 1.2.1 核酸提取 | 第25-27页 |
| 1.2.2 核酸扩增 | 第27页 |
| 1.2.3 扩增产物检测 | 第27-28页 |
| 1.2.4 本节小结 | 第28页 |
| 1.3 核酸扩增技术原理及在柑橘黄龙病检测中的应用 | 第28-35页 |
| 1.3.1 聚合酶链式反应(PCR)原理及其在柑橘黄龙病检测中的应用 | 第29-30页 |
| 1.3.1.1 PCR原理 | 第29-30页 |
| 1.3.1.2 PCR在柑橘黄龙病检测中的应用现状 | 第30页 |
| 1.3.2 环介导恒温扩增(LAMP)原理及其在柑橘黄龙病检测中的应用 | 第30-34页 |
| 1.3.2.1 LAMP原理 | 第30-33页 |
| 1.3.2.3 LAMP在柑橘黄龙病检测中的应用现状 | 第33-34页 |
| 1.3.3 重组酶聚合酶扩增(RPA)原理及其在柑橘黄龙病检测中的应用 | 第34-35页 |
| 1.3.3.1 RPA原理 | 第34-35页 |
| 1.3.3.2 RPA在柑橘黄龙病检测中的应用现状 | 第35页 |
| 1.3.4 本节小结 | 第35页 |
| 1.4 研究目的、内容和技术路线 | 第35-38页 |
| 1.4.1 研究目的和内容 | 第35-36页 |
| 1.4.2 技术路线 | 第36-38页 |
| 1.5 本章小结 | 第38-39页 |
| 2 Las实时荧光PCR检测方法的建立 | 第39-48页 |
| 2.1 引言 | 第39页 |
| 2.2 实验部分 | 第39-42页 |
| 2.2.1 材料和试剂 | 第39-40页 |
| 2.2.1.1 植物材料 | 第39页 |
| 2.2.1.2 常用试剂 | 第39-40页 |
| 2.2.2 仪器设备 | 第40-41页 |
| 2.2.3 实验方法 | 第41-42页 |
| 2.2.3.1 柑橘叶片核酸提取 | 第41页 |
| 2.2.3.2 实时荧光PCR引物设计与体系建立 | 第41-42页 |
| 2.2.3.3 OI1/OI2c PCR扩增 | 第42页 |
| 2.2.3.4 灵敏度评估 | 第42页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第42-47页 |
| 2.3.1 实时荧光PCR引物设计与体系建立 | 第42-46页 |
| 2.3.2 灵敏度评估 | 第46-47页 |
| 2.4 本章小结 | 第47-48页 |
| 3 基于LAMP的Las现场可视化检测方法的建立 | 第48-69页 |
| 3.1 引言 | 第48-49页 |
| 3.2 实验部分 | 第49-54页 |
| 3.2.1 材料和试剂 | 第49-50页 |
| 3.2.1.1 植物材料 | 第49-50页 |
| 3.2.1.2 常用试剂 | 第50页 |
| 3.2.2 仪器设备 | 第50-51页 |
| 3.2.3 实验方法 | 第51-54页 |
| 3.2.3.1 柑橘叶片核酸快速提取 | 第51页 |
| 3.2.3.2 LAMP引物设计和反应体系建立 | 第51-52页 |
| 3.2.3.3 TaqMan PCR | 第52-53页 |
| 3.2.3.4 LAMP扩增产物可视化检测 | 第53页 |
| 3.2.3.5 灵敏度评估 | 第53页 |
| 3.2.3.6 实际样本检测 | 第53-54页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第54-67页 |
| 3.3.1 LAMP引物设计和体系建立 | 第54-56页 |
| 3.3.2 柑橘叶片核酸快速提取 | 第56-57页 |
| 3.3.3 LAMP产物可视化检测 | 第57-60页 |
| 3.3.4 基于LAMP的Las现场可视化检测方法灵敏度评估 | 第60-62页 |
| 3.3.5 实际样本检测 | 第62-67页 |
| 3.4 本章小结 | 第67-69页 |
| 4 基于RPA的Las现场快速可视化检测方法的建立 | 第69-84页 |
| 4.1 引言 | 第69-70页 |
| 4.2 实验部分 | 第70-74页 |
| 4.2.1 材料和试剂 | 第70-71页 |
| 4.2.1.1 植物材料 | 第70-71页 |
| 4.2.1.2 常用试剂 | 第71页 |
| 4.2.2 仪器设备 | 第71-72页 |
| 4.2.3 实验方法 | 第72-74页 |
| 4.2.3.1 NaOH法快速提取柑橘叶片DNA | 第72页 |
| 4.2.3.2 RPA引物设计及反应体系建立 | 第72-73页 |
| 4.2.3.3 实时荧光PCR | 第73页 |
| 4.2.3.4 RPA扩增产物可视化检测 | 第73页 |
| 4.2.3.5 基于RPA的Las现场快速可视化检测法灵敏度评估 | 第73页 |
| 4.2.3.6 实际样本检测 | 第73-74页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第74-81页 |
| 4.3.1 RPA引物设计和反应体系建立 | 第74-75页 |
| 4.3.2 NaOH法快速提取柑橘叶片DNA | 第75-76页 |
| 4.3.3 RPA扩增产物可视化检测 | 第76-79页 |
| 4.3.4 基于RPA的Las现场快速可视化检测方法灵敏度评估 | 第79-80页 |
| 4.3.5 实际样本检测 | 第80-81页 |
| 4.4 本章小结 | 第81-84页 |
| 第五章 总结与展望 | 第84-88页 |
| 5.1 主要研究结论 | 第84-85页 |
| 5.2 主要特色及创新点 | 第85-86页 |
| 5.3 进一步研究展望 | 第86-88页 |
| 参考文献 | 第88-94页 |
| 个人简介 | 第94页 |
