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转不同外源基因提高薯类作物抗逆能力的研究

摘要第5-8页
ABSTRACT第8-10页
第一章 文献综述第16-38页
    1.1 马铃薯的营养价值及生态功能第16-17页
    1.2 逆境条件下植物的适应机制第17-19页
        1.2.1 植物体内抗氧化系统对逆境胁迫的响应第17-18页
        1.2.2 植物抗氧化酶系统在非生物胁迫下的作用机制第18页
        1.2.3 植物的天然抗氧化剂在非生物胁迫下的作用机制第18-19页
        1.2.4 马铃薯中的抗氧化剂第19页
    1.3 逆境胁迫对马铃薯生长的影响第19-20页
        1.3.1 干旱对马铃薯生理代谢的影响第19-20页
        1.3.2 高温对马铃薯生理代谢的影响第20页
        1.3.3 盐渍对马铃薯生理代谢的影响第20页
    1.4 利用基因工程提高植物抗逆性研究进展第20-23页
        1.4.1 马铃薯遗传转化体系建立的研究进展第21页
        1.4.2 抗逆性转基因马铃薯研究进展第21-23页
    1.5 植物次生代谢研究进展第23-24页
    1.6 甜菜碱研究进展第24-26页
        1.6.1 甜菜碱的生理功能第24-25页
        1.6.2 甜菜碱的生物合成第25页
        1.6.3 甜菜碱的转基因研究进展第25-26页
    1.7 花青素研究进展第26-32页
        1.7.1 花青素的基本结构和功能第26-27页
        1.7.2 花青素的生物合成第27-29页
        1.7.3 花青素的营养及保健价值第29页
        1.7.4 花青素的转基因研究进展第29-30页
        1.7.5 花青素的 R2R3-MYB 转录因子家族和 IbMYB1 基因第30-32页
    1.8 植物基因工程中相关启动子研究进展第32-36页
        1.8.1 启动子的概念第32-33页
        1.8.2 启动子的分类和常用的启动子第33-36页
    1.9 目前研究存在的问题第36页
    1.10 研究的目的、意义及技术路线第36-38页
第二章 干旱胁迫下转基因甘薯块根膨大期水分利用效率和生理代谢特征第38-50页
    2.1 材料与方法第39-42页
        2.1.1 实验材料第39页
        2.1.2 盆栽试验第39-40页
        2.1.3 总蛋白的提取和抗氧化酶活性测定第40-41页
        2.1.4 可溶性糖含量的测定第41页
        2.1.5 光和参数测定第41-42页
        2.1.6 叶绿素含量测定第42页
        2.1.7 生物量和水分利用效率的测定第42页
    2.2 结果与分析第42-47页
        2.2.1 在不同水分条件下 Cu/Zn-SOD 和 APX 基因的导入对甘薯抗氧化酶系统及可溶性糖含量的影响第42-44页
        2.2.2 在不同水分条件下 Cu/Zn-SOD 和 APX 基因的导入对甘薯可溶性糖和叶绿素含量的影响第44-45页
        2.2.3 在不同水分条件下 Cu/Zn-SOD 和 APX 基因的导入对甘薯光和参数的影响第45页
        2.2.4 胁迫下 Cu/Zn-SOD 和 APX 基因的导入对甘薯产量的影响第45-46页
        2.2.5 胁迫下 Cu/Zn-SOD 和 APX 基因的导入对甘薯水分利用效率的影响第46-47页
    2.3 讨论第47-49页
    2.4 本章小结第49-50页
第三章 抗性马铃薯品种的筛选第50-65页
    3.1 材料和方法第51-55页
        3.1.1 五种马铃薯材料第51页
        3.1.2 马铃薯外植体培养第51-52页
        3.1.3 炼苗及移栽第52页
        3.1.4 PEG 处理第52页
        3.1.5 植物叶片总蛋白的提取及抗氧化酶活性的测定第52-53页
        3.1.6 MDA 含量的测定第53页
        3.1.7 根系干鲜重的测定第53页
        3.1.8 叶片相对含水量测定第53页
        3.1.9 荧光参数的测定第53-54页
        3.1.10 盐胁迫处理第54页
        3.1.11 高温胁迫处理第54页
        3.1.12 甲基紫精(MV)介导的氧化胁迫处理第54-55页
    3.2 结果与讨论第55-61页
        3.2.1 在 PEG 胁迫下不同马铃薯品种之间抗性的差异第55-57页
        3.2.2 在 NaCl 胁迫下不同马铃薯品种之间抗性的差异第57-59页
        3.2.3 在高温胁迫下不同马铃薯品种之间抗性的差异第59-60页
        3.2.4 在甲基紫精胁迫下不同马铃薯品种相对膜透性的差异第60-61页
    3.3 讨论第61-64页
    3.4 本章小结第64-65页
第四章 转 CodA 基因提高马铃薯对水分胁迫的耐受性第65-76页
    4.1 材料和方法第66-68页
        4.1.1 材料第66页
        4.1.2 马铃薯组织培养第66页
        4.1.3 炼苗及移栽第66页
        4.1.4 预处理实验第66页
        4.1.5 实验处理第66-67页
        4.1.6 PCR 分析预处理材料中外源导入基因的表达量第67页
        4.1.7 甜菜碱含量的测定第67页
        4.1.8 光合参数的测定和叶片水势的测定第67页
        4.1.9 叶绿素含量的测定第67页
        4.1.10 总蛋白的提取和抗氧化酶活性的检测第67页
        4.1.11 MDA 含量的测定第67-68页
    4.2 结果与分析第68-73页
        4.2.1 转基因马铃薯中 CodA 基因的鉴定第68页
        4.2.2 水分胁迫的预处理对转基因及野生型马铃薯甜菜碱的积累及水势的影响第68-69页
        4.2.3 外源导入的 CodA 基因对转基因及野生型马铃薯在水分胁迫-复水处理中抗氧化酶系统的影响第69-71页
        4.2.4 外源导入的 CodA 基因对转基因及野生型马铃薯在水分胁迫-复水处理中 MDA 和叶绿素含量的影响第71-72页
        4.2.5 外源导入的 CodA 基因对转基因及野生型马铃薯在水分胁迫-复水处理中光合参数的影响第72-73页
    4.3 讨论第73-75页
    4.4 本章小结第75-76页
第五章 转 IbMYB1 马铃薯的培育第76-86页
    5.1 实验材料第76-77页
        5.1.1 材料第76-77页
        5.1.2 主要抗生素,激素的配制及培养基的配制第77页
    5.2 方法第77-81页
        5.2.1 马铃薯扩繁第77页
        5.2.2 感受态细胞制备第77-78页
        5.2.3 农杆菌转化第78页
        5.2.4 农杆菌的保存第78页
        5.2.5 农杆菌侵染液的制备第78页
        5.2.6 农杆菌侵染步骤第78-79页
        5.2.7 转基因株系的鉴定第79-81页
    5.3 结果与分析第81-83页
        5.3.1 马铃薯再生体系的建立和愈伤组织的再分化第81-82页
        5.3.2 再生植株的 PCR 检测第82-83页
        5.3.3 转基因马铃薯在高温胁迫条件下的 RT-PCR 分析第83页
    5.4 讨论第83-85页
    5.5 本章小结第85-86页
第六章 转 IbMYB1 基因马铃薯对盐胁迫的响应第86-101页
    6.1 材料与方法第86-90页
        6.1.1 材料第86-87页
        6.1.2 方法第87-90页
    6.2 结果与分析第90-96页
        6.2.1 IbMYB1 基因对马铃薯根系生长的影响第90-91页
        6.2.2 IbMYB1 基因对马铃薯次生代谢产物的积累的影响第91-93页
        6.2.3 IbMYB1 基因对马铃薯抗氧化能力的影响第93页
        6.2.4 IbMYB1 基因对马铃薯光合色素和荧光参数的影响第93-95页
        6.2.5 IbMYB1 基因的异位表达对马铃薯次生代谢途径中相关重要基因表达的影响第95-96页
    6.3 讨论第96-99页
    6.4 本章小结第99-101页
第七章 本研究的主要结论及创新点第101-104页
    7.1 主要研究结果第101-103页
        7.1.1 比较了在薯块膨大期干旱胁迫对转 Cu/Zn SOD 和 APX 酶基因的转基因甘薯及对照株的产量及水分利用效率的影响第101页
        7.1.2 通过在不同胁迫下抗性的综合分析比较,在五种马铃薯品种中筛选出了抗性品种第101-102页
        7.1.3 比较了转 CodA 基因马铃薯及对照株在水分胁迫和复水条件下的生理特征第102页
        7.1.4 成功的将 IbMYB1 基因转入马铃薯品种陇薯三号中进行表达第102页
        7.1.5 IbMYB1 基因的超表达成功的提高了马铃薯对盐渍等非生物胁迫的耐受性第102-103页
    7.2 本论文的创新点第103页
    7.3 进一步的研究设想第103-104页
参考文献第104-119页
缩略词第119-122页
致谢第122-123页
作者简介第123页

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