摘要 | 第4-6页 |
ABSTRACT | 第6-7页 |
第一章 文献综述 | 第12-42页 |
1.1 影响小麦加工品质的物质基础 | 第12-13页 |
1.2 麦谷蛋白和醇溶蛋白与小麦品质关系的研究进展 | 第13-30页 |
1.2.1 麦谷蛋白和醇溶蛋白等位变异的分离和鉴定 | 第14-16页 |
1.2.2 不同等位变异的麦谷蛋白和醇溶蛋白与小麦品质的关系 | 第16-20页 |
1.2.3 麦谷蛋白和醇溶蛋白分子结构模式图的建立 | 第20-24页 |
1.2.4 麦谷蛋白和醇溶蛋白基因的 PCR 克隆及其分子标记开发 | 第24-25页 |
1.2.5 麦谷蛋白和醇溶蛋白基因的体外功能鉴定 | 第25-26页 |
1.2.6 麦谷蛋白和醇溶蛋白基因的二级结构预测 | 第26-27页 |
1.2.7 麦谷蛋白和醇溶蛋白基因的 qRT-PCR 分析 | 第27-28页 |
1.2.8 展望 | 第28-30页 |
1.3 面筋蛋白与乳糜泻的关系 | 第30-33页 |
1.3.1 乳糜泻的发病机制、症状及防治 | 第30-31页 |
1.3.2 诱发 CD 发生的主要免疫肽段及其在诱发 CD 中的作用 | 第31-32页 |
1.3.3 免疫肽段分布的基因组特异性与 CD 耐受的种质资源的培育 | 第32-33页 |
1.3.4 展望 | 第33页 |
1.4 中国节节麦在小麦遗传改良中的独特地位和作用 | 第33-36页 |
1.4.1 节节麦的分类和地理分布 | 第34-35页 |
1.4.2 节节麦的遗传结构及中国节节麦的独特遗传变异 | 第35页 |
1.4.3 中国节节麦的系统收集和遗传多样性分析 | 第35-36页 |
1.4.4 展望 | 第36页 |
1.5 本研究的立题目的与意义 | 第36-42页 |
1.5.1 本研究的切入点 | 第36-37页 |
1.5.2 本研究的主要内容 | 第37-38页 |
1.5.3 本研究的创新点 | 第38页 |
1.5.4 本研究的主要技术路线 | 第38-42页 |
第二章 普通小麦α-醇溶蛋白基因的克隆与序列分析 | 第42-78页 |
2.1 实验材料 | 第42-43页 |
2.1.1 实验菌株及耗材 | 第42-43页 |
2.1.2 植物材料 | 第43页 |
2.2 实验方法 | 第43-48页 |
2.2.1 CTAB 法提取基因组 DNA 实验菌株及耗材 | 第43页 |
2.2.2 CaCl2法制备大肠杆菌 DH5α和 BL21 感受态细胞 | 第43-44页 |
2.2.3 PCR 特异引物的设计、优化和合成 | 第44页 |
2.2.4 PCR 扩增及产物纯化 | 第44-45页 |
2.2.5 连接转化与阳性克隆的筛选和测序 | 第45页 |
2.2.6 克隆基因的序列分析 | 第45页 |
2.2.7 表达载体的构建 | 第45-46页 |
2.2.8 融合蛋白的诱导表达和免疫检测 | 第46页 |
2.2.9 克隆基因的 CD 毒性肽识别 | 第46页 |
2.2.10 克隆基因的二级结构预测 | 第46页 |
2.2.11 豫麦 34 中不同分子结构基因的 qRT-PCR 分析 | 第46-48页 |
2.3 结果与分析 | 第48-71页 |
2.3.1 PCR 扩增及基因克隆结果 | 第48页 |
2.3.2 克隆基因推断氨基酸序列的比对分析 | 第48-56页 |
2.3.3 T 细胞免疫肽的识别分析与克隆基因的染色体定位 | 第56-58页 |
2.3.4 克隆基因与已知α-醇溶蛋白基因的聚类分析 | 第58-62页 |
2.3.5 克隆基因的原核表达及 western blotting 验证 | 第62-63页 |
2.3.6 α-醇溶蛋白的二级结构分析 | 第63-68页 |
2.3.7 豫麦 34 中不同分子结构基因的 qRT-PCR 分析 | 第68-71页 |
2.4 讨论 | 第71-76页 |
2.4.1 α-醇溶蛋白的变异、基因组组织及其分子功能 | 第71-72页 |
2.4.2 α-醇溶蛋白基因的分子结构与功能关系 | 第72-74页 |
2.4.3 CD 毒性肽的分布、染色体定位与 CD 预防 | 第74-76页 |
2.5 结论 | 第76-78页 |
第三章 普通小麦γ-醇溶蛋白基因的克隆与序列分析 | 第78-102页 |
3.1 实验材料 | 第78页 |
3.2 实验方法 | 第78-80页 |
3.2.1 PCR 引物 | 第78-79页 |
3.2.2 基因克隆、序列分析、二级结构预测及原核表达方法 | 第79页 |
3.2.3 豫麦 34 中不同分子结构基因的 qRT-PCR 分析 | 第79-80页 |
3.3 结果与分析 | 第80-96页 |
3.3.1 PCR 扩增及克隆测序结果 | 第80页 |
3.3.2 克隆基因推断氨基酸序列的比对分析 | 第80-86页 |
3.3.3 克隆基因与已知γ-醇溶蛋白基因的聚类分析 | 第86-90页 |
3.3.4 γ-醇溶蛋白的二级结构预测 | 第90-95页 |
3.3.5 豫麦 34 中不同分子结构基因的 qRT-PCR 分析 | 第95-96页 |
3.4 讨论 | 第96-101页 |
3.4.1 γ-醇溶蛋白的分子变异及其与功能的关系 | 第96-98页 |
3.4.2 氨基酸序列的比对分析所揭示的γ-醇溶蛋白结构与功能关系 | 第98-99页 |
3.4.3 二级结构和 qRT-PCR 分析所揭示的γ-醇溶蛋白结构与功能关系 | 第99-100页 |
3.4.4 T 细胞免疫肽的分布与 CD 预防 | 第100-101页 |
3.5 结论 | 第101-102页 |
第四章 普通小麦 LMW-GS 基因的克隆与序列分析 | 第102-126页 |
4.1 实验材料 | 第102页 |
4.2 实验方法 | 第102-104页 |
4.2.1 基因克隆、序列分析、系统树构建、二级结构预测及原核表达 | 第102-103页 |
4.2.2 融合蛋白的亲和柱纯化 | 第103页 |
4.2.3 不同分子结构基因的 qRT-PCR 分析 | 第103-104页 |
4.3 结果与分析 | 第104-120页 |
4.3.1 PCR 扩增及基因克隆结果 | 第104-105页 |
4.3.2 克隆基因推断氨基酸序列的比对分析 | 第105-110页 |
4.3.3 克隆基因与已知 LMW-GS 基因的聚类分析 | 第110-113页 |
4.3.4 原核表达及 western blotting 验证 | 第113-114页 |
4.3.5 LMW-GS 的二级结构预测 | 第114-118页 |
4.3.6 不同分子结构的 LMW-GS 基因的 qRT-PCR 分析 | 第118-120页 |
4.4 讨论 | 第120-124页 |
4.4.1 LMW-GS 的等位变异及其与分子功能的关系 | 第120-121页 |
4.4.2 LMW-GS 氨基酸序列差异与小麦加工品质的关系 | 第121-122页 |
4.4.3 二级结构及 qRT-PCR 分析所揭示的基因结构与功能的关系 | 第122-124页 |
4.5 结论 | 第124-126页 |
第五章 中国节节麦在小麦品种改良和 CD 预防中的作用分析 | 第126-148页 |
5.1 实验材料 | 第127-128页 |
5.2 实验方法 | 第128-129页 |
5.2.1 ISSR 遗传多样性分析方法 | 第128-129页 |
5.2.2 LMW-GS 和α-,γ-醇溶蛋白基因克隆与序列分析方法 | 第129页 |
5.3 结果与分析 | 第129-144页 |
5.3.1 ISSR 遗传多样性分析结果 | 第129-132页 |
5.3.2 中国节节麦α-醇溶蛋白基因的克隆与序列分析 | 第132-136页 |
5.3.3 中国节节麦γ-醇溶蛋白基因克隆与序列分析 | 第136-141页 |
5.3.4 LMW-GS 基因克隆序列分析 | 第141-144页 |
5.4 讨论 | 第144-146页 |
5.4.1 中国节节麦的遗传多样性及其在小麦遗传改良中的独特地位 | 第144-145页 |
5.4.2 中国节节麦在小麦品质改良和 CD 预防中的作用 | 第145-146页 |
5.5 结论 | 第146-148页 |
第六章 结论 | 第148-150页 |
参考文献 | 第150-170页 |
致谢 | 第170-172页 |
攻读博士学位期间发表学术论文 | 第172-173页 |