摘要 | 第8-10页 |
英文摘要 | 第10-11页 |
1 引言 | 第12-16页 |
1.1 缺硒导致软骨损伤的研究进展 | 第12-14页 |
1.1.1 缺硒对软骨形态学与生化指标的影响 | 第12-13页 |
1.1.2 缺硒对软骨组织凋亡的影响 | 第13-14页 |
1.1.3 SelM与细胞凋亡 | 第14页 |
1.2 miR-138-5p研究进展 | 第14-15页 |
1.2.1 miR-138-5p的发现与调控 | 第14-15页 |
1.2.2 miR-138-5p功能的研究进展 | 第15页 |
1.3 本研究的目的与意义 | 第15-16页 |
2 材料与方法 | 第16-22页 |
2.1 主要仪器与试剂 | 第16页 |
2.1.1 主要仪器 | 第16页 |
2.1.2 主要试剂 | 第16页 |
2.2 试验方法 | 第16-21页 |
2.2.1 试验动物分组 | 第16-17页 |
2.2.2 样品的采集与处理 | 第17-18页 |
2.2.3 鸡软骨组织抗氧化指标的检测 | 第18页 |
2.2.4 鸡软骨组织超微结构的观察 | 第18页 |
2.2.5 鸡胚胫骨软骨细胞的分离培养与鉴定 | 第18页 |
2.2.6 鸡胚胫骨软骨细胞SelM基因敲低与过表达模型的建立 | 第18-20页 |
2.2.7 缺硒鸡软骨组织与体外软骨细胞中相关基因mRNA的检测 | 第20-21页 |
2.2.8 缺硒鸡软骨组织与体外软骨细胞中相关蛋白含量的Western blot法检测 | 第21页 |
2.2.9 体外培养鸡胫骨软骨细胞抗氧化指标的检测 | 第21页 |
2.2.10 体外培养鸡胫骨软骨细胞细胞凋亡率的检测 | 第21页 |
2.3 试验数据的分析与统计 | 第21-22页 |
3 结果与分析 | 第22-38页 |
3.1 体内实验部分 | 第22-29页 |
3.1.1 硒缺乏导致鸡胫骨软骨细胞超微结构的变化 | 第22-23页 |
3.1.2 硒缺乏导致鸡胫骨软骨中24种硒蛋白mRNA表达水平的变化 | 第23-24页 |
3.1.3 硒缺乏导致鸡胫骨软骨组织中SelM蛋白表达水平的变化 | 第24-25页 |
3.1.4 硒缺乏导致鸡胫骨软骨组织中miR-138-5p表达水平的变化 | 第25-26页 |
3.1.5 硒缺乏导致软骨组织中凋亡相关基因mRNA表达水平的变化 | 第26页 |
3.1.6 硒缺乏导致软骨组织中凋亡相关基因蛋白表达水平的变化 | 第26-27页 |
3.1.7 硒缺乏导致鸡胫骨软骨组织中氧化损伤指标的变化 | 第27-29页 |
3.2 体外实验部分 | 第29-38页 |
3.2.1 体外培养鸡胫骨软骨细胞阿尔新蓝染色鉴定 | 第29-30页 |
3.2.2 miR-138-5p干扰SelM的验证结果 | 第30-33页 |
3.2.3 miR-138-5p过表达和敲低后凋亡相关基因mRNA表达水平变化 | 第33-34页 |
3.2.4 miR-138-5p过表达和敲低后凋亡相关基因蛋白表达水平的变化 | 第34-35页 |
3.2.5 miR-138-5p过表达和敲低后抗氧化指标的变化 | 第35-36页 |
3.2.6 miR-138-5p过表达和敲低后细胞凋亡率的变化 | 第36-38页 |
4 讨论 | 第38-42页 |
4.1 缺硒对软骨组织硒蛋白表达的影响 | 第38页 |
4.2 硒缺乏对鸡胫骨软骨组织形态学的影响 | 第38-39页 |
4.3 缺硒对软骨组织中miR-138-5p表达的影响 | 第39页 |
4.4 miR-138-5p靶基因的验证 | 第39页 |
4.5 硒缺乏对软骨组织氧化应激的影响 | 第39-40页 |
4.6 缺硒诱导软骨细胞凋亡发生机制的探讨 | 第40-42页 |
4.6.1 缺硒对软骨细胞凋亡的影响 | 第40页 |
4.6.2 miR-138-5p调控硒蛋白M对软骨细胞凋亡的干扰 | 第40-42页 |
5 结论 | 第42-43页 |
致谢 | 第43-44页 |
参考文献 | 第44-50页 |
附录 | 第50-56页 |
攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第56页 |