中文摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5-7页 |
符号说明 | 第12-13页 |
第一部分 文献综述 | 第13-31页 |
第一章 奶牛子宫内膜炎研究进展 | 第13-16页 |
1.1 奶牛子宫内膜炎 | 第13页 |
1.2 奶牛子宫的免疫机制 | 第13-14页 |
1.3 奶牛子宫损伤后的修复 | 第14-16页 |
1.3.1 奶牛子宫复旧的过程 | 第14-15页 |
1.3.2 影响奶牛子宫复旧的因素 | 第15-16页 |
第二章 孕酮与细胞增殖的相关研究进展 | 第16-19页 |
2.1 孕酮的主要生理作用 | 第16页 |
2.1.1 维持妊娠 | 第16页 |
2.1.2 调节发情行为 | 第16页 |
2.1.3 促进乳腺发育 | 第16页 |
2.2 孕酮及其受体的的研究进展 | 第16-17页 |
2.2.1 孕酮受体 | 第16页 |
2.2.2 孕酮诱导基因转录的途径 | 第16-17页 |
2.2.3 孕酮与雌激素的相互作用 | 第17页 |
2.3 孕酮对细胞增殖的作用 | 第17-19页 |
第三章 Wnt/β-catenin、PI3K/Akt通路的研究进展 | 第19-23页 |
3.1 Wnt/β-catenin通路的研究进展 | 第19-21页 |
3.1.1 Wnt通路的概述 | 第19-20页 |
3.1.2 Wnt通路的转导 | 第20页 |
3.1.3 Wnt/β-catenin通路对细胞增殖、分化的影响 | 第20-21页 |
3.2 PI3K/Akt通路的研究进展 | 第21-23页 |
3.2.1 PI3K/Akt通路的概述 | 第21页 |
3.2.2 Akt/PI3K通路的转导通路的转导 | 第21-22页 |
3.2.3 研究的目的意义 | 第22-23页 |
参考文献 | 第23-31页 |
第二部分 试验研究 | 第31-60页 |
试验一 孕酮对奶牛子宫内膜上皮细胞增殖的影响 | 第31-37页 |
1. 材料与仪器 | 第31页 |
1.1 试验材料 | 第31页 |
1.2 主要试剂 | 第31页 |
1.3 主要仪器 | 第31页 |
2. 试验方法 | 第31-33页 |
2.1 试验分组 | 第31-32页 |
2.1.1 孕酮对BEECs细胞活性和细胞周期的影响 | 第32页 |
2.1.2 孕酮对LPS处理的BEECs细胞活性和细胞周期的影响 | 第32页 |
2.2 CCK-8法 | 第32页 |
2.3 流式细胞术 | 第32页 |
2.4 数据分析 | 第32-33页 |
3. 结果 | 第33-36页 |
3.1 孕酮和LPS对BEECs的活性的影响 | 第33页 |
3.2 孕酮对BEECs细胞周期的影响 | 第33-36页 |
3.2.1 孕酮对BEECs细胞周期的影响 | 第33-34页 |
3.2.2 孕酮对LPS处理的BEECs细胞周期的影响 | 第34-36页 |
4. 讨论 | 第36-37页 |
4.1 孕酮对BEECs细胞活性的影响 | 第36页 |
4.2 孕酮对BEECs细胞周期的影响 | 第36-37页 |
试验二 孕酮对奶牛子宫内膜上皮细胞修复相关基因的影响 | 第37-46页 |
1. 材料与仪器 | 第37-38页 |
1.1 试验材料 | 第37页 |
1.2 主要试剂 | 第37页 |
1.3 主要仪器 | 第37-38页 |
2. 方法 | 第38-40页 |
2.1 试验分组 | 第38页 |
2.1.1 孕酮对BEECs细胞活性和细胞周期的影响 | 第38页 |
2.1.2 孕酮对LPS处理的BEECs细胞活性和细胞周期的影响 | 第38页 |
2.2 荧光定量PCR | 第38-40页 |
2.2.1 总RNA的提取 | 第38页 |
2.2.2 cDNA的合成 | 第38-39页 |
2.2.3 引物设计 | 第39-40页 |
2.2.4 荧光定量PCR反应 | 第40页 |
2.3 数据分析 | 第40页 |
3. 结果 | 第40-44页 |
3.1 孕酮对BEECs中修复相关因子和受体基因表达的影响 | 第40-42页 |
3.2 孕酮对LPS刺激的BEECs中相关修复因子和受体基因表达的影响 | 第42-44页 |
4. 讨论 | 第44-46页 |
试验三 孕酮对奶牛子宫内膜上皮细胞Wnt/β-catenin及PI3K/Akt通路的影响 | 第46-56页 |
1. 材料 | 第46-48页 |
1.1 试验材料 | 第46页 |
1.2 主要仪器 | 第46页 |
1.3 主要试剂 | 第46-47页 |
1.4 主要试剂的配制 | 第47-48页 |
1.4.1 SDS-PAGE电泳溶液相关试剂的配制 | 第47页 |
1.4.2 Western blot膜转印相关试剂的配制 | 第47页 |
1.4.3 10%分离胶的配制 | 第47-48页 |
1.4.4 5%浓缩胶的配制 | 第48页 |
1.4.5 TBST洗涤液的配置: | 第48页 |
2. 方法 | 第48-50页 |
2.1 Western Blot | 第48-49页 |
2.1.1 细胞处理 | 第48页 |
2.1.2 总蛋白的提取 | 第48-49页 |
2.1.3 聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第49页 |
2.2 免疫荧光 | 第49-50页 |
2.2.1 细胞处理 | 第49页 |
2.2.2 免疫荧光 | 第49-50页 |
3. 结果 | 第50-54页 |
3.1 孕酮对BEECs中Wnt/β-catenin及PI3K/AKT通路的影响 | 第50-51页 |
3.1.1 孕酮对BEECs中Wnt/β-catenin通路的影响 | 第50-51页 |
3.1.2 孕酮对BEECs中PI3K/AKT通路的影响 | 第51页 |
3.2 孕酮对LPS处理的BEECs中Wnt/β-catenin及PI3K/Akt通路的影响 | 第51-53页 |
3.2.1 孕酮对LPS处理的BEECs中Wnt/β-catenin通路的影响 | 第51-52页 |
3.2.2 孕酮对LPS处理的BEECs中PI3K/AKT通路表达的影响 | 第52-53页 |
3.3 免疫荧光检测β-catenin在BEECs中的分布情况 | 第53-54页 |
4. 讨论 | 第54-56页 |
参考文献 | 第56-60页 |
全文结论 | 第60-61页 |
致谢 | 第61-62页 |