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小鼠脊髓损伤后microRNA-152对神经元突起再生作用和机制的研究

缩略语表第5-7页
中文摘要第7-9页
Abstract第9-11页
前言第12-13页
文献回顾第13-26页
    1.脊髓损伤的病理过程及研究现状第13-15页
    2.MicroRNA 的生物合成及其性状,并与神经系统相关的研究进展第15-18页
    3.MicroRNA-152 在多种系统及疾病中发挥着不同的调节作用,但在神经系统中的作用仍不清楚第18-20页
    4.HuD 是 miR-152 潜在的靶基因,它是一类重要的调节神经元分化和存活的 RNA结合蛋白第20-26页
第一部分 小鼠脊髓损伤后 MIR-152 表达上调并抑制神经元突起生长第26-55页
    1 材料第26-32页
        1.1 实验动物及细胞系第26-27页
        1.2 主要试剂和缓冲液第27-31页
        1.3 引物序列第31-32页
        1.4 主要仪器第32页
    2 方法第32-44页
        2.1 小鼠脊髓夹伤模型第32-33页
        2.2 小鼠皮层神经元的原代培养第33页
        2.3 提取不同时间点胚胎皮层、脊髓组织 RNA第33-34页
        2.4 细胞损伤模型及活力测定第34页
        2.5 实时定量 PCR第34-36页
        2.6 细胞传代、冻存及复苏第36页
        2.7 细胞转染第36-37页
        2.8 双荧光素酶报告检测系统第37-41页
        2.9 细胞免疫荧光染色第41-42页
        2.10 Western-blot 技术第42-43页
        2.11 统计处理第43-44页
    3 结果第44-51页
        3.1 miR-152 在脊髓损伤后表达情况第44页
        3.2 不同损伤刺激对神经元中 miR-152 表达情况的影响第44-45页
        3.3 通过 PC12 细胞、SH-SY5Y 细胞及原代培养神经元,观察 miR-152 对细胞突起生长的影响第45-47页
        3.4 利用数据库预测 miR-152 靶基因并加以验证第47-49页
        3.5 miR-152 在中枢神经系统发育中表达情况第49页
        3.6 验证 DNMT1 为 miR-152 的靶基因第49-51页
    4 讨论第51-55页
第二部分 过表达 MIR-152 促进 PC12 细胞增殖及机制的研究第55-64页
    1 材料第55-57页
        1.1 实验动物及细胞系第55页
        1.2 主要试剂和缓冲液第55-57页
        1.3 主要仪器第57页
    2 方法第57-58页
        2.1 MTT 法第57页
        2.2 细胞周期检测第57-58页
        2.3 统计处理第58页
    3 结果第58-62页
        3.1 过表达 miR-152 后促进 PC12 细胞增殖第58-59页
        3.2 过表达 miR-152 后促进 PC12 细胞由 G0/G1 期进入到 S 期第59-61页
        3.3 利用数据库预测 miR-152 靶基因并加以验证第61-62页
    4 讨论第62-64页
小结第64-65页
参考文献第65-76页
个人简历和研究成果第76-77页
致谢第77页

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