缩略语表 | 第5-7页 |
中文摘要 | 第7-9页 |
Abstract | 第9-11页 |
前言 | 第12-13页 |
文献回顾 | 第13-26页 |
1.脊髓损伤的病理过程及研究现状 | 第13-15页 |
2.MicroRNA 的生物合成及其性状,并与神经系统相关的研究进展 | 第15-18页 |
3.MicroRNA-152 在多种系统及疾病中发挥着不同的调节作用,但在神经系统中的作用仍不清楚 | 第18-20页 |
4.HuD 是 miR-152 潜在的靶基因,它是一类重要的调节神经元分化和存活的 RNA结合蛋白 | 第20-26页 |
第一部分 小鼠脊髓损伤后 MIR-152 表达上调并抑制神经元突起生长 | 第26-55页 |
1 材料 | 第26-32页 |
1.1 实验动物及细胞系 | 第26-27页 |
1.2 主要试剂和缓冲液 | 第27-31页 |
1.3 引物序列 | 第31-32页 |
1.4 主要仪器 | 第32页 |
2 方法 | 第32-44页 |
2.1 小鼠脊髓夹伤模型 | 第32-33页 |
2.2 小鼠皮层神经元的原代培养 | 第33页 |
2.3 提取不同时间点胚胎皮层、脊髓组织 RNA | 第33-34页 |
2.4 细胞损伤模型及活力测定 | 第34页 |
2.5 实时定量 PCR | 第34-36页 |
2.6 细胞传代、冻存及复苏 | 第36页 |
2.7 细胞转染 | 第36-37页 |
2.8 双荧光素酶报告检测系统 | 第37-41页 |
2.9 细胞免疫荧光染色 | 第41-42页 |
2.10 Western-blot 技术 | 第42-43页 |
2.11 统计处理 | 第43-44页 |
3 结果 | 第44-51页 |
3.1 miR-152 在脊髓损伤后表达情况 | 第44页 |
3.2 不同损伤刺激对神经元中 miR-152 表达情况的影响 | 第44-45页 |
3.3 通过 PC12 细胞、SH-SY5Y 细胞及原代培养神经元,观察 miR-152 对细胞突起生长的影响 | 第45-47页 |
3.4 利用数据库预测 miR-152 靶基因并加以验证 | 第47-49页 |
3.5 miR-152 在中枢神经系统发育中表达情况 | 第49页 |
3.6 验证 DNMT1 为 miR-152 的靶基因 | 第49-51页 |
4 讨论 | 第51-55页 |
第二部分 过表达 MIR-152 促进 PC12 细胞增殖及机制的研究 | 第55-64页 |
1 材料 | 第55-57页 |
1.1 实验动物及细胞系 | 第55页 |
1.2 主要试剂和缓冲液 | 第55-57页 |
1.3 主要仪器 | 第57页 |
2 方法 | 第57-58页 |
2.1 MTT 法 | 第57页 |
2.2 细胞周期检测 | 第57-58页 |
2.3 统计处理 | 第58页 |
3 结果 | 第58-62页 |
3.1 过表达 miR-152 后促进 PC12 细胞增殖 | 第58-59页 |
3.2 过表达 miR-152 后促进 PC12 细胞由 G0/G1 期进入到 S 期 | 第59-61页 |
3.3 利用数据库预测 miR-152 靶基因并加以验证 | 第61-62页 |
4 讨论 | 第62-64页 |
小结 | 第64-65页 |
参考文献 | 第65-76页 |
个人简历和研究成果 | 第76-77页 |
致谢 | 第77页 |