摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
引言 | 第11-14页 |
1 研究背景 | 第11页 |
2 本论文工作开展的整体思路 | 第11-14页 |
1 文献综述 | 第14-18页 |
1.1 植物分枝发育的研究进展 | 第14-17页 |
1.1.1 侧枝的发生 | 第14页 |
1.1.2 植物分枝的类型 | 第14-15页 |
1.1.3 调控茎分枝的因素 | 第15-16页 |
1.1.4 植物分枝发育的相关基因的研究 | 第16-17页 |
1.2 分枝发育基因在中医药中的应用前景 | 第17-18页 |
2 青天葵分枝发育相关基因NfLs的克隆 | 第18-38页 |
2.1 材料与试药 | 第18-19页 |
2.1.1 植物材料 | 第18页 |
2.1.2 试剂 | 第18页 |
2.1.3 菌种及载体 | 第18页 |
2.1.4 培养基与抗生素 | 第18-19页 |
2.1.5 仪器 | 第19页 |
2.1.6 引物与测序 | 第19页 |
2.2 实验方法 | 第19-28页 |
2.2.1 青天葵叶片总RNA提取方法的优化 | 第19-21页 |
2.2.2 青天葵转录组Unigenes的筛选 | 第21页 |
2.2.3 青天葵NfLs RACE扩增 | 第21-26页 |
2.2.4 青天葵NfLs cDNA全长拼接 | 第26-27页 |
2.2.5 青天葵NfLs编码区的扩增 | 第27页 |
2.2.6 基因编码蛋白的分析 | 第27-28页 |
2.3 结果与分析 | 第28-36页 |
2.3.1 青天葵叶片总RNA提取方法的优化 | 第28页 |
2.3.2 青天葵转录组分枝发育相关Unigenes的筛选 | 第28-29页 |
2.3.3 青天葵NfLs cDNA全长序列的获得 | 第29-32页 |
2.3.4 基因编码蛋白的分析 | 第32-36页 |
2.4 讨论 | 第36-38页 |
3 NfLs时空表达分析 | 第38-45页 |
3.1 材料与试药 | 第38页 |
3.1.1 植物材料 | 第38页 |
3.1.2 试剂 | 第38页 |
3.1.3 仪器 | 第38页 |
3.1.4 引物与测序 | 第38页 |
3.2 实验方法 | 第38-40页 |
3.2.1 NfLs在青天葵不同组织部位中的qRT-PCR表达分析 | 第38-40页 |
3.2.2 NfLs在昼夜节律钟调控下的qRT-PCR的表达分析 | 第40页 |
3.3 结果与分析 | 第40-43页 |
3.3.1 NfLs实时荧光定量PCR方法的建立 | 第40-41页 |
3.3.2 NfLs在青天葵不同组织部位中的表达 | 第41-42页 |
3.3.3 昼夜节律钟调控下NfLs的表达变化 | 第42-43页 |
3.4 讨论 | 第43-45页 |
4 农杆菌介导NfLs转化拟南芥的初步探索 | 第45-55页 |
4.1 材料与试药 | 第45-46页 |
4.1.1 植物材料 | 第45页 |
4.1.2 试剂 | 第45页 |
4.1.3 菌种及载体 | 第45页 |
4.1.4 培养基与抗生素 | 第45页 |
4.1.5 仪器 | 第45页 |
4.1.6 引物与测序 | 第45-46页 |
4.2 实验方法 | 第46-51页 |
4.2.1 带酶切位点NfLs的克隆 | 第46-47页 |
4.2.2 植物表达载体pRI 101 AN-DNA-NfLs的构建 | 第47-49页 |
4.2.3 电击转化农杆菌 | 第49-50页 |
4.2.4 农杆菌浸染拟南芥 | 第50-51页 |
4.3 结果与分析 | 第51-54页 |
4.3.1 带酶切位点NfLs的克隆 | 第51-52页 |
4.3.2 NfLs植物表达载体的构建 | 第52-53页 |
4.3.3 过表达NfLs拟南芥植株的筛选 | 第53-54页 |
4.4 讨论 | 第54-55页 |
5 结语 | 第55-57页 |
5.1 结论 | 第55-56页 |
5.2 展望 | 第56-57页 |
参考文献 | 第57-62页 |
附录 | 第62-69页 |
附录1:植物表达载体pRI 101 AN-DNA图谱信息 | 第62-63页 |
附录2:pGEM-T Easy载体图谱信息 | 第63-64页 |
附录3:BioTeke多功能DNA纯化回收试剂盒说明书 | 第64-65页 |
附录4: Magen质粒提取试剂盒HiPure Plasmid Micro Kit | 第65-66页 |
附录5:英文缩略语 | 第66-67页 |
附录6:图表目录 | 第67-68页 |
附录7:表格目录 | 第68-69页 |
硕士期间发表的论文 | 第69-70页 |
致谢 | 第70页 |