| 摘要 | 第10-13页 |
| Abstract | 第13-16页 |
| 前言 | 第17-22页 |
| 参考文献 | 第19-22页 |
| 第一部 应用PCRArray技术筛选肿瘤微环境中关键变化组分以及其对肿瘤细胞的作用 | 第22-44页 |
| 引言 | 第22-23页 |
| 材料和方法 | 第23-33页 |
| 1.材料 | 第23-25页 |
| 1.1 细胞 | 第23页 |
| 1.2 实验仪器 | 第23-24页 |
| 1.3 试剂 | 第24-25页 |
| 2.方法 | 第25-33页 |
| 2.1 肿瘤细胞培养 | 第25-26页 |
| 2.2 PCRArray | 第26-27页 |
| 2.3 包埋和切片 | 第27页 |
| 2.4 HE染色 | 第27-28页 |
| 2.5 免疫组织化学 | 第28-29页 |
| 2.6 原代肾癌患者外周血T淋巴细胞分离及纯化 | 第29页 |
| 2.7 细胞共培养及ELISA | 第29-30页 |
| 2.8 细胞总蛋白提取及定量 | 第30页 |
| 2.9 免疫印迹技术Westernblotting | 第30-31页 |
| 2.10 划痕实验 | 第31-32页 |
| 2.11 Transwell迁移侵袭实验 | 第32页 |
| 2.12 免疫荧光 | 第32-33页 |
| 结果 | 第33-41页 |
| 1.肾透明细胞癌与正常肾组织中微环境的成分差异 | 第33-35页 |
| 2.肾透明细胞癌间质中α-SMA(+)细胞数目增多促进肿瘤进展且与不良预后相关 | 第35-38页 |
| 3.CD4(+)T细胞分泌IL-6诱导肾癌细胞上皮间质化并且促进肿瘤细胞迁移和侵袭 | 第38-41页 |
| 讨论 | 第41-43页 |
| 小结 | 第43-44页 |
| 第二部 借助力学模型运用基因表达谱技术筛选生物化学及生物力学联合作用下微环境中促进肾透明细胞癌进展的关键蛋白 | 第44-65页 |
| 前言 | 第44-45页 |
| 材料与方法 | 第45-53页 |
| 1.材料 | 第45-47页 |
| 1.1 细胞 | 第45页 |
| 1.2 实验仪器 | 第45页 |
| 1.3 试剂 | 第45-47页 |
| 2.方法 | 第47-53页 |
| 2.1 肿瘤细胞培养 | 第47页 |
| 2.2 全基因表达谱芯片 | 第47-48页 |
| 2.3 包埋和切片 | 第48页 |
| 2.4 HE染色 | 第48-49页 |
| 2.5 免疫组织化学 | 第49-50页 |
| 2.6 细胞胞质及核蛋白提取 | 第50页 |
| 2.7 CCK-8细胞增殖检测 | 第50页 |
| 2.8 细胞总蛋白提取及定量 | 第50-51页 |
| 2.9 免疫印迹技术Westernblotting | 第51-52页 |
| 2.10 免疫荧光 | 第52页 |
| 2.11 力学装置 | 第52-53页 |
| 结果 | 第53-61页 |
| 1.验证肾癌中存在肿瘤生长介导的固体压力以及力学模型建立 | 第53-54页 |
| 2.不同压力对肿瘤细胞迁移及细胞骨架的影响 | 第54-56页 |
| 3.通过基因表达谱分析生物化学及力学因素对肿瘤细胞的作用 | 第56-57页 |
| 4.生物化学及力学联合作用促进肿瘤细胞中β-catenin活性并与肿瘤进展相关 | 第57-61页 |
| 讨论 | 第61-63页 |
| 小结 | 第63-65页 |
| 第三部 肿瘤微环境中促进肾透明细胞癌进展的关键蛋白及通路研究 | 第65-78页 |
| 前言 | 第65-66页 |
| 材料与方法 | 第66-73页 |
| 1.材料 | 第66-68页 |
| 1.1 细胞 | 第66页 |
| 1.2 实验仪器 | 第66-67页 |
| 1.3 试剂 | 第67-68页 |
| 2.方法 | 第68-73页 |
| 2.1 肿瘤细胞培养 | 第68页 |
| 2.2 包埋和切片 | 第68-69页 |
| 2.3 HE染色 | 第69页 |
| 2.4 免疫组织化学 | 第69-70页 |
| 2.5 细胞总蛋白提取及定量 | 第70-71页 |
| 2.6 免疫印迹技术Westernblotting | 第71-72页 |
| 2.7 力学装置 | 第72页 |
| 2.8 流式细胞仪双标染色分析 | 第72-73页 |
| 结果 | 第73-76页 |
| 1.肿瘤生长介导的压力联合IL-6共同作用刺激肾癌细胞获得干性 | 第73-74页 |
| 2.肿瘤生长介导的压力通过Akt/GSK-3β/β-catenin信号通路加强IL-6诱导的上皮间质化和干性 | 第74-76页 |
| 讨论 | 第76-77页 |
| 小结 | 第77-78页 |
| 参考文献 | 第78-82页 |
| 综述 | 第82-101页 |
| 参考文献 | 第91-101页 |
| 攻读学位期间发表论文情况 | 第101-102页 |
| 致谢 | 第102-103页 |
