摘要 | 第4-8页 |
Abstract | 第8-12页 |
英文缩略语 | 第13-18页 |
第一部分 ABCE1蛋白在肺腺癌组织中乙酰化水平及其与患者病例特征的相关性分析 | 第18-31页 |
1 前言 | 第18-20页 |
2 材料与方法 | 第20-25页 |
2.1 材料和仪器 | 第20-22页 |
2.1.1 主要材料 | 第20页 |
2.1.2 主要试剂 | 第20-21页 |
2.1.3 主要仪器 | 第21页 |
2.1.4 常用试剂配制方法 | 第21-22页 |
2.2 方法 | 第22-25页 |
2.2.1 免疫共沉淀和Westernblot检测肺腺癌和癌旁组织ABCE1蛋白乙酰化水平 | 第22-24页 |
2.2.2 统计肺腺癌组织ABCE1蛋白乙酰化率和临床病例特点,分析其相关性 | 第24页 |
2.2.3 实验结果判定 | 第24-25页 |
3 实验结果 | 第25-27页 |
3.1 肺腺癌和癌旁组织中ABCE1蛋白乙酰化水平检测 | 第25页 |
3.2 肺腺癌组织ABCE1蛋白乙酰化率和临床病例特点的相关性分析 | 第25-27页 |
4 讨论 | 第27-30页 |
5 结论 | 第30-31页 |
第二部分 ABCE1蛋白乙酰基转移酶的预测及其在肺腺癌组织中表达与ABCE1蛋白乙酰化水平的相关性分析 | 第31-52页 |
1 前言 | 第31-33页 |
2 材料与方法 | 第33-44页 |
2.1 材料和仪器 | 第33-36页 |
2.1.1 主要材料 | 第33页 |
2.1.2 主要试剂 | 第33-34页 |
2.1.3 主要仪器 | 第34-35页 |
2.1.4 常用试剂配制方法 | 第35-36页 |
2.2 方法 | 第36-44页 |
2.2.1 催化ABCE1蛋白发生乙酰化的乙酰基转移酶的预测 | 第36页 |
2.2.2 免疫组织化学法(SP法)检测癌组织和癌旁组织中Tip60蛋白表达水平 | 第36-37页 |
2.2.3 Real Time PCR检测癌组织和癌旁组织中Tip60 mRNA表达水平 | 第37-38页 |
2.2.4 Western blot检测癌组织和癌旁组织中Tip60蛋白表达量 | 第38-40页 |
2.2.5 免疫共沉淀检测癌组织和癌旁组织中 BCE1蛋白乙酰化水平 | 第40-42页 |
2.2.6 统计分析癌组织和癌旁组织中Tip60表达量与ABCE1蛋白乙酰化率的相关性 | 第42-43页 |
2.2.7 实验结果判定 | 第43-44页 |
3 实验结果 | 第44-48页 |
3.1 催化ABCE1蛋白发生乙酰化的乙酰基转移酶的预测 | 第44页 |
3.2 免疫组织化学检测肺腺癌和癌旁组织中Tip60的蛋白表达水平 | 第44-45页 |
3.3 RT-PCR检测肺腺癌和癌旁组织中Tip60的mRNA表达水平 | 第45页 |
3.4 Western-blot检测肺腺癌和癌旁组织中Tip60的蛋白表达水平 | 第45-48页 |
4 讨论 | 第48-51页 |
5 结论 | 第51-52页 |
第三部分 RNA干扰下调Tip60对ABCE1蛋白乙酰化水平及A549细胞生物学行为的影响 | 第52-79页 |
1 前言 | 第52-53页 |
2 材料与方法 | 第53-66页 |
2.1 材料和仪器 | 第53-56页 |
2.1.1 主要材料 | 第53页 |
2.1.2 主要试剂 | 第53-54页 |
2.1.3 主要仪器 | 第54-55页 |
2.1.4 常用试剂配制方法 | 第55-56页 |
2.2 方法 | 第56-66页 |
2.2.1 siRNA-Tip60的转染 | 第56-57页 |
2.2.2 RealTimePCR检测siRNA-Tip60mRNA下调效果以及ABCE1mRNA水平 | 第57-58页 |
2.2.3 Westernblot检测siRNA-Tip60下调效果以及ABCE1蛋白表达水平 | 第58-60页 |
2.2.4 免疫共沉淀检测转染siRNA-Tip60后A549细胞内ABCE1蛋白乙酰化水平 | 第60-62页 |
2.2.5 MTT法测定细胞生长曲线 | 第62-63页 |
2.2.6 流式细胞仪检测细胞周期 | 第63页 |
2.2.7 流式细胞仪检测细胞调亡 | 第63-64页 |
2.2.8 划痕修复实验检测细胞迁移能力 | 第64页 |
2.2.9 Transwell小室实验检测细胞迁移能力 | 第64-65页 |
2.2.10 Transwell小室实验检测细胞侵袭能力 | 第65页 |
2.2.11 实验结果判定 | 第65-66页 |
3 实验结果 | 第66-75页 |
3.1 siRNA-Tip60的转染效果 | 第66页 |
3.2 RealTimePCR检测siRNA-Tip60mRNA下调效果以及ABCE1mRNA表达水平 | 第66-67页 |
3.3 Westernblot检测siRNA-Tip60下调效果以及ABCE1蛋白表达水平 | 第67-68页 |
3.4 siRNA干扰下调Tip60对ABCE1蛋白乙酰化水平的影响 | 第68-69页 |
3.5 ABCE1蛋白去乙酰化对肺腺癌A549细胞增殖的影响 | 第69页 |
3.6 ABCE1蛋白去乙酰化对肺腺癌A549细胞周期的影响 | 第69-70页 |
3.7 ABCE1蛋白去乙酰化对肺腺癌A549细胞调亡的影响 | 第70-71页 |
3.8 ABCE1蛋白去乙酰化对肺腺癌A549细胞迁移能力的影响 | 第71-73页 |
3.9 ABCE1蛋白去乙酰化对肺腺癌A549细胞迁移能力的影响 | 第73页 |
3.10 ABCE1蛋白去乙酰化对肺腺癌A549细胞侵袭能力的影响 | 第73-75页 |
4 讨论 | 第75-78页 |
5 结论 | 第78-79页 |
本研究创新性的自我评价 | 第79-80页 |
参考文献 | 第80-84页 |
综述 | 第84-101页 |
参考文献 | 第97-101页 |
攻读学位期间取得的研究成果 | 第101-102页 |
致谢 | 第102-103页 |
个人简历 | 第103页 |