| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 1 文献综述 | 第10-23页 |
| 1.1 引言 | 第10页 |
| 1.2 MSTN基因及其蛋白质的研究进展 | 第10-16页 |
| 1.2.1 MSTN基因的发现 | 第10-11页 |
| 1.2.2 鱼类MSTN基因特点 | 第11页 |
| 1.2.3 MSTN的蛋白质结构 | 第11-13页 |
| 1.2.4 MSTN的生物学功能 | 第13-14页 |
| 1.2.5 MSTN的信号转导途径与作用机理 | 第14-15页 |
| 1.2.6 鱼类MSTN基因的表达 | 第15-16页 |
| 1.3 MyoD基因的研究进展 | 第16-19页 |
| 1.3.1 MyoD基因及其家族的发现与克隆 | 第16-17页 |
| 1.3.2 MyoD的蛋白质结构 | 第17页 |
| 1.3.3 MyoD基因的功能 | 第17-18页 |
| 1.3.4 MyoD基因与动物生长 | 第18-19页 |
| 1.4 应激与鱼类生长 | 第19-21页 |
| 1.4.1 应激的概念 | 第19页 |
| 1.4.2 应激源与应激反应的类型 | 第19-20页 |
| 1.4.3 鱼类应激反应的过程 | 第20-21页 |
| 1.4.4 应激对鱼类生长的影响 | 第21页 |
| 1.5 应激动物模型的建立 | 第21页 |
| 1.6 本试验的目的与意义 | 第21-23页 |
| 2 材料与方法 | 第23-35页 |
| 2.1 实验材料 | 第23-24页 |
| 2.1.1 实验动物 | 第23页 |
| 2.1.2 实验主要试剂及相关试剂的配制 | 第23-24页 |
| 2.1.3 主要仪器设备 | 第24页 |
| 2.2 MSTN和MyoD基因的cDNA克隆及序列分析 | 第24-30页 |
| 2.2.1 实验材料的处理 | 第24-25页 |
| 2.2.2 总RNA的提取与质量检测 | 第25-26页 |
| 2.2.3 大鳞副泥鳅cDNA第一链的合成 | 第26-27页 |
| 2.2.4 引物设计 | 第27-28页 |
| 2.2.5 MSTN和MyoD基因中间片段的扩增 | 第28页 |
| 2.2.6 MSTN和MyoD基因的3'序列扩增 | 第28-29页 |
| 2.2.7 MSTN和MyoD基因的5'序列扩增 | 第29页 |
| 2.2.8 获得大鳞副泥鳅MSTN和MyoD基因cDNA序列 | 第29-30页 |
| 2.2.9 序列分析 | 第30页 |
| 2.3 大鳞副泥鳅MSTN和MyoD基因的组织分布 | 第30-33页 |
| 2.3.1 组织总RNA的提取及质量检测 | 第30页 |
| 2.3.2 大鳞副泥鳅cDNA第一链合成 | 第30页 |
| 2.3.3 荧光定量PCR的引物设计 | 第30-31页 |
| 2.3.4 确定最适退火温度 | 第31-32页 |
| 2.3.5 荧光定量PCR的标准曲线制备与反应体系筛选 | 第32页 |
| 2.3.6 检测MSTN和MyoD基因在各个组织中的表达情况 | 第32页 |
| 2.3.7 数据处理与分析 | 第32-33页 |
| 2.4 地塞米松对大鳞副泥鳅肌肉组织中MSTN和MyoD基因表达的影响 | 第33-35页 |
| 2.4.1 实验分组与管理 | 第33页 |
| 2.4.2 注射不同浓度地塞米松后肌肉组织总RNA的提取及质量检测 | 第33页 |
| 2.4.3 注射600μg/kg地塞米松后不同时间点肌肉组织总RNA的提取及质量检测 | 第33-34页 |
| 2.4.4 大鳞副泥鳅cDNA第一链合成 | 第34页 |
| 2.4.5 不同浓度地塞米松对肌肉组织MSTN和MyoD基因表达的影响 | 第34页 |
| 2.4.6 注射600μg/kg地塞米松后肌肉组织MSTN和MyoD基因表达的时间效应性 | 第34页 |
| 2.4.7 数据处理与分析 | 第34-35页 |
| 3 结果与分析 | 第35-49页 |
| 3.1 总RNA质量 | 第35页 |
| 3.2 大鳞副泥鳅MSTN和MyoD基因的cDNA序列 | 第35-38页 |
| 3.2.1 MSTN基因的cDNA序列 | 第35-37页 |
| 3.2.2 MyoD基因的cDNA序列 | 第37-38页 |
| 3.3 大鳞副泥鳅MSTN基因和MyoD基因的氨基酸序列 | 第38-39页 |
| 3.3.1 理化性质分析 | 第38-39页 |
| 3.3.2 蛋白质结构与功能位点预测分析 | 第39页 |
| 3.4 MSTN和MyoD基因序列及其氨基酸序列同源性分析 | 第39-43页 |
| 3.4.1 大鳞副泥鳅MSTN基因序列及其氨基酸序列同源性分析 | 第39-41页 |
| 3.4.2 大鳞副泥鳅MyoD基因序列及其氨基酸序列同源性分析 | 第41-43页 |
| 3.5 MSTN和MyoD基因的系统发育树的构建与分析 | 第43-45页 |
| 3.6 MSTN和MyoD基因在大鳞副泥鳅的组织分布 | 第45-47页 |
| 3.7 地塞米松对大鳞副泥鳅肌肉组织中MSTN和MyoD基因表达的影响 | 第47-49页 |
| 3.7.1 不同浓度地塞米松对肌肉组织MSTN和MyoD基因表达的影响 | 第47页 |
| 3.7.2 注射600μg/kg地塞米松后各MSTN和MyoD基因表达的时间效应 | 第47-49页 |
| 4 讨论 | 第49-53页 |
| 4.1 大鳞副泥鳅MSTN和MyoD基因的序列特征 | 第49页 |
| 4.2 大鳞副泥鳅MSTN和MyoD基因的氨基酸序列同源性分析 | 第49-50页 |
| 4.3 大鳞副泥鳅MSTN基因的组织特异性表达 | 第50-51页 |
| 4.4 地塞米松对肌肉组织中MSTN和MyoD基因表达的影响 | 第51-53页 |
| 5 结论 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-62页 |
| 致谢 | 第62页 |
