摘要 | 第5-7页 |
ABSTRACT | 第7-9页 |
常用词语英文缩写 | 第10-14页 |
1 文献综述 | 第14-23页 |
1.1 AMH基因概况 | 第14页 |
1.2 AMH基因在性腺组织中的表达 | 第14-15页 |
1.3 AMH基因在卵泡中的功能 | 第15-17页 |
1.3.1 由颗粒细胞合成 | 第15页 |
1.3.2 调控卵泡发育 | 第15-17页 |
1.4 AMH基因参与的细胞信号通路 | 第17-19页 |
1.4.1 AMH基因受体 | 第17页 |
1.4.2 AMH与转化生子因子β超家族 | 第17-18页 |
1.4.3 参与Smads信号通路 | 第18-19页 |
1.5 AMH基因启动子及其转录调控 | 第19-21页 |
1.5.1 AMH基因核心启动子 | 第19-20页 |
1.5.2 GATA-4对AMH基因的转录调控 | 第20-21页 |
1.5.3 WT1对AMH基因的转录调控 | 第21页 |
1.5.4 其他转录因子对AMH基因的转录调控 | 第21页 |
1.6 研究内容及目的意义 | 第21-23页 |
2 材料与方法 | 第23-39页 |
2.1 试验材料 | 第23页 |
2.1.1 试验动物与样品采集 | 第23页 |
2.2 试剂与配制 | 第23-24页 |
2.2.1 主要试剂和试剂盒 | 第23页 |
2.2.2 试剂配制 | 第23-24页 |
2.2.3 主要仪器设备 | 第24页 |
2.3 试验方法 | 第24-39页 |
2.3.1 鹅AMH基因CDS区克隆及序列分析 | 第24-27页 |
2.3.2 鹅AMH基因启动子区克隆和序列分析 | 第27-30页 |
2.3.3 鹅AMH基因核心启动子的鉴定 | 第30-35页 |
2.3.4 AMH及其转录因子在卵泡颗粒细胞中的表达检测 | 第35-36页 |
2.3.5 GATA-4在鹅AMH基因启动子上结合位点的确定 | 第36-39页 |
3 结果与分析 | 第39-53页 |
3.1 鹅卵泡颗粒细胞总RNA提取效果 | 第39页 |
3.2 鹅AMH基因CDS区的克隆、序列分析 | 第39-45页 |
3.2.1 克隆与测序结果 | 第39-41页 |
3.2.2 生物信息学分析 | 第41-45页 |
3.3 鹅AMH启动子序列分析 | 第45-47页 |
3.3.1 克隆与测序结果 | 第45-46页 |
3.3.2 鹅AMH启动子序列关键元件及转录因子结合位点 | 第46-47页 |
3.4 鹅AMH基因核心启动子 | 第47-50页 |
3.4.1 pGL4.10-AMH重组载体检测结果 | 第47-48页 |
3.4.2 AMH在CHO细胞中表达情况的测定 | 第48-49页 |
3.4.3 双荧光素酶分析鹅AMH基因启动子活性 | 第49-50页 |
3.5 转录因子(GATA-4、WT1)和鹅AMH表达模式比较 | 第50-51页 |
3.6 GATA-4对鹅AMH转录活性的影响 | 第51-53页 |
3.6.1 GATA-4真核表达载体在CHO细胞中的转染效率测定 | 第51页 |
3.6.2 定点突变载体的构建 | 第51-52页 |
3.6.3 定点突变转染荧光素酶相对活性检测 | 第52-53页 |
4 讨论 | 第53-56页 |
4.1 鹅AMH基因CDS区序列特征 | 第53-54页 |
4.2 鹅AMH基因在卵泡颗粒细胞的表达特性 | 第54页 |
4.3 AMH核心启动子定位与特点 | 第54-55页 |
4.4 WT1不参与AMH的转录调控 | 第55页 |
4.5 GATA-4可能通过多个结合位点参与AMH的转录调控 | 第55-56页 |
5 结论 | 第56-58页 |
参考文献 | 第58-62页 |
致谢 | 第62-63页 |
攻读学位期间发表的学术论文 | 第63页 |