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鹅AMH基因克隆、核心启动子鉴定及GATA-4和WT1对其转录的影响

摘要第5-7页
ABSTRACT第7-9页
常用词语英文缩写第10-14页
1 文献综述第14-23页
    1.1 AMH基因概况第14页
    1.2 AMH基因在性腺组织中的表达第14-15页
    1.3 AMH基因在卵泡中的功能第15-17页
        1.3.1 由颗粒细胞合成第15页
        1.3.2 调控卵泡发育第15-17页
    1.4 AMH基因参与的细胞信号通路第17-19页
        1.4.1 AMH基因受体第17页
        1.4.2 AMH与转化生子因子β超家族第17-18页
        1.4.3 参与Smads信号通路第18-19页
    1.5 AMH基因启动子及其转录调控第19-21页
        1.5.1 AMH基因核心启动子第19-20页
        1.5.2 GATA-4对AMH基因的转录调控第20-21页
        1.5.3 WT1对AMH基因的转录调控第21页
        1.5.4 其他转录因子对AMH基因的转录调控第21页
    1.6 研究内容及目的意义第21-23页
2 材料与方法第23-39页
    2.1 试验材料第23页
        2.1.1 试验动物与样品采集第23页
    2.2 试剂与配制第23-24页
        2.2.1 主要试剂和试剂盒第23页
        2.2.2 试剂配制第23-24页
        2.2.3 主要仪器设备第24页
    2.3 试验方法第24-39页
        2.3.1 鹅AMH基因CDS区克隆及序列分析第24-27页
        2.3.2 鹅AMH基因启动子区克隆和序列分析第27-30页
        2.3.3 鹅AMH基因核心启动子的鉴定第30-35页
        2.3.4 AMH及其转录因子在卵泡颗粒细胞中的表达检测第35-36页
        2.3.5 GATA-4在鹅AMH基因启动子上结合位点的确定第36-39页
3 结果与分析第39-53页
    3.1 鹅卵泡颗粒细胞总RNA提取效果第39页
    3.2 鹅AMH基因CDS区的克隆、序列分析第39-45页
        3.2.1 克隆与测序结果第39-41页
        3.2.2 生物信息学分析第41-45页
    3.3 鹅AMH启动子序列分析第45-47页
        3.3.1 克隆与测序结果第45-46页
        3.3.2 鹅AMH启动子序列关键元件及转录因子结合位点第46-47页
    3.4 鹅AMH基因核心启动子第47-50页
        3.4.1 pGL4.10-AMH重组载体检测结果第47-48页
        3.4.2 AMH在CHO细胞中表达情况的测定第48-49页
        3.4.3 双荧光素酶分析鹅AMH基因启动子活性第49-50页
    3.5 转录因子(GATA-4、WT1)和鹅AMH表达模式比较第50-51页
    3.6 GATA-4对鹅AMH转录活性的影响第51-53页
        3.6.1 GATA-4真核表达载体在CHO细胞中的转染效率测定第51页
        3.6.2 定点突变载体的构建第51-52页
        3.6.3 定点突变转染荧光素酶相对活性检测第52-53页
4 讨论第53-56页
    4.1 鹅AMH基因CDS区序列特征第53-54页
    4.2 鹅AMH基因在卵泡颗粒细胞的表达特性第54页
    4.3 AMH核心启动子定位与特点第54-55页
    4.4 WT1不参与AMH的转录调控第55页
    4.5 GATA-4可能通过多个结合位点参与AMH的转录调控第55-56页
5 结论第56-58页
参考文献第58-62页
致谢第62-63页
攻读学位期间发表的学术论文第63页

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