| 目录 | 第5-7页 |
| 摘要 | 第7-10页 |
| ABSTRACT | 第10-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-23页 |
| 1.1 酶与前体酶 | 第13页 |
| 1.2 蛋白酶的分类 | 第13-14页 |
| 1.3 丝氨酸蛋白酶概述 | 第14-19页 |
| 1.3.1 丝氨酸蛋白酶的分类 | 第15页 |
| 1.3.2 胰蛋白酶概述 | 第15-16页 |
| 1.3.3 丝氨酸蛋白酶的催化机制 | 第16-17页 |
| 1.3.4 丝氨酸蛋白质的结构与功能进化 | 第17-18页 |
| 1.3.5 丝氨酸蛋白酶的重组表达系统 | 第18页 |
| 1.3.6 丝氨酸蛋白酶的应用 | 第18-19页 |
| 1.4 含CUB domain的丝氨酸蛋白酶 | 第19-20页 |
| 1.5 家蚕中的丝氨酸蛋白酶 | 第20-23页 |
| 第二章 引言 | 第23-25页 |
| 2.1 研究背景及目的意义 | 第23-24页 |
| 2.2 研究内容 | 第24页 |
| 2.3 技术路线 | 第24-25页 |
| 第三章 家蚕丝氨酸蛋白酶基因BmSP82的生物信息及表达特征分析 | 第25-35页 |
| 3.1 材料和方法 | 第25-28页 |
| 3.1.1 实验材料 | 第25页 |
| 3.1.2 实验仪器与试剂 | 第25-26页 |
| 3.1.3 实验方法 | 第26-28页 |
| 3.2 结果与分析 | 第28-34页 |
| 3.2.1 BmSP82基因的生物信息分析 | 第28-31页 |
| 3.2.2 丝氨酸蛋白酶BmSP82基因的进化关系分析 | 第31-32页 |
| 3.2.3 BmSP82基因的RT-PCR检测 | 第32-34页 |
| 3.3 讨论 | 第34-35页 |
| 第四章 家蚕丝氨酸蛋白酶BmSP82的原核表达及抗体制备 | 第35-51页 |
| 4.1 材料与方法 | 第35-46页 |
| 4.1.1 实验材料 | 第35页 |
| 4.1.2 实验仪器与试剂 | 第35-40页 |
| 4.1.3 实验方法 | 第40-46页 |
| 4.2 结果与分析 | 第46-50页 |
| 4.2.1 BmSP82成熟体片段的克隆 | 第46页 |
| 4.2.2 重组载体的构建 | 第46-47页 |
| 4.2.3 丝氨酸蛋白酶BmSP82的原核表达检测 | 第47页 |
| 4.2.4 BmSP82重组蛋白的纯化 | 第47-48页 |
| 4.2.5 BmSP82的MALDI-TOF/TOF质谱鉴定 | 第48-49页 |
| 4.2.6 BmSP82多克隆抗体的特异性检测 | 第49-50页 |
| 4.3 讨论 | 第50-51页 |
| 第五章 丝氨酸蛋白酶BmSP82的表达特征及组织定位 | 第51-61页 |
| 5.1 材料与方法 | 第51-56页 |
| 5.1.1 实验材料 | 第51页 |
| 5.1.2 实验仪器与试剂 | 第51-53页 |
| 5.1.3 实验方法 | 第53-56页 |
| 5.2 实验结果 | 第56-59页 |
| 5.2.1 丝氨酸蛋白酶BmSP82在家蚕各组织及丝腺中的Western Blot检测 | 第56-57页 |
| 5.2.2 丝氨酸蛋白酶BmSP82在家蚕中部丝腺前区的免疫荧光定位 | 第57-59页 |
| 5.3 讨论 | 第59-61页 |
| 第六章 家蚕丝氨酸蛋白酶BmSP82的表达及功能初探 | 第61-73页 |
| 6.1 材料和方法 | 第61-67页 |
| 6.1.1 实验材料 | 第61页 |
| 6.1.2 实验仪器与试剂 | 第61-64页 |
| 6.1.3 实验方法 | 第64-67页 |
| 6.2 结果与分析 | 第67-72页 |
| 6.2.1 含GST标签的BmSP82成熟体片段的原核表达 | 第67-69页 |
| 6.2.2 BmSP82成熟体片段的毕赤酵母真核表达 | 第69-71页 |
| 6.2.3 BmSP82成熟体真核表达重组蛋白的硫酸铵沉淀纯化 | 第71-72页 |
| 6.3 讨论 | 第72-73页 |
| 第七章 综合与结论 | 第73-75页 |
| 参考文献 | 第75-81页 |
| 在读期间发表论文及参与课题 | 第81-83页 |
| 致谢 | 第83页 |
