| 摘要 | 第7-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 縮略词 | 第12-14页 |
| 第1章 文献综述 | 第14-22页 |
| 1.1 花椒概述 | 第14页 |
| 1.2 花椒麻素概述 | 第14页 |
| 1.3 花椒麻素的生理功能 | 第14-17页 |
| 1.3.1 镇痛作用 | 第15页 |
| 1.3.2 麻醉作用 | 第15页 |
| 1.3.3 抗氧化作用 | 第15-16页 |
| 1.3.4 抗肿瘤作用 | 第16页 |
| 1.3.5 保护心血管作用 | 第16-17页 |
| 1.4 氧化与肿瘤、高脂血症的相关性 | 第17-20页 |
| 1.4.1 ROS自由基与肿瘤关系 | 第17-18页 |
| 1.4.2 抗氧化剂与肿瘤细胞凋亡 | 第18-19页 |
| 1.4.3 自由基与高脂血症 | 第19-20页 |
| 1.5 肝脏中胆固醇代谢 | 第20-22页 |
| 第2章 引言 | 第22-24页 |
| 2.1 研究目的和意义 | 第22页 |
| 2.2 本论文研究任务及主要内容 | 第22-23页 |
| 2.3 技术路线 | 第23-24页 |
| 第3章 花椒麻素抗氧化效果研究 | 第24-38页 |
| 3.1 试验材料、试剂与仪器 | 第24-26页 |
| 3.1.1 试验材料 | 第24页 |
| 3.1.2 试验试剂 | 第24-25页 |
| 3.1.3 试验仪器 | 第25-26页 |
| 3.2 试验方法 | 第26-31页 |
| 3.2.1 花椒麻素溶液配制 | 第26页 |
| 3.2.2 还原力的测定 | 第26页 |
| 3.2.3 FRAP法测定抗氧化力 | 第26-27页 |
| 3.2.4 清除DPPH自由基能力的测定 | 第27页 |
| 3.2.5 对羟自由基的清除测定 | 第27页 |
| 3.2.6 肝癌HepG2细胞培养 | 第27-29页 |
| 3.2.7 蛋白质测定方法 | 第29页 |
| 3.2.8 细胞内SOD的测定 | 第29-30页 |
| 3.2.9 细胞内MDA含量的测定 | 第30页 |
| 3.2.10 数据处理 | 第30-31页 |
| 3.3 结果与分析 | 第31-36页 |
| 3.3.1 花椒麻素的还原力 | 第31页 |
| 3.3.2 花椒麻素的总抗氧化能力 | 第31-32页 |
| 3.3.3 花椒麻素清除DPPH自由基的能力 | 第32-33页 |
| 3.3.4 花椒麻素清除羟基自由基的能力 | 第33页 |
| 3.3.5 四种抗氧化测定方法之间的关系 | 第33-34页 |
| 3.3.6 肝癌HepG2细胞形态学观察 | 第34页 |
| 3.3.7 细胞内SOD含量 | 第34-35页 |
| 3.3.8 细胞内MDA含量 | 第35-36页 |
| 3.4 讨论与小结 | 第36-38页 |
| 第4章 花椒麻素诱导肝癌HepG2细胞凋亡 | 第38-58页 |
| 4.1 试验材料、试剂与仪器 | 第38-39页 |
| 4.1.1 试验材料 | 第38页 |
| 4.1.2 试验试剂 | 第38-39页 |
| 4.1.3 试验仪器 | 第39页 |
| 4.2 试验方法 | 第39-45页 |
| 4.2.1 花椒麻素溶液配制 | 第39页 |
| 4.2.2 肝癌HepG2细胞培养 | 第39页 |
| 4.2.3 MTT检测细胞存活能力 | 第39-40页 |
| 4.2.4 扫描电镜观察细胞形态变化 | 第40页 |
| 4.2.5 划痕擦伤细胞迁移实验 | 第40页 |
| 4.2.6 细胞流式仪分析细胞周期及凋亡率 | 第40页 |
| 4.2.7 DAPI染色观察细胞核形态变化 | 第40-41页 |
| 4.2.8 单细胞凝胶电泳实验(彗星实验) | 第41页 |
| 4.2.9 Rh123染色测定线粒体膜电位 | 第41页 |
| 4.2.10 总RNA提取及RT-PCR/qPCR | 第41-43页 |
| 4.2.11 蛋白免疫印迹(Western blot) | 第43-45页 |
| 4.2.12 数据处理 | 第45页 |
| 4.3 结果与分析 | 第45-55页 |
| 4.3.1 花椒麻素对HepG2细胞存活作用 | 第45-46页 |
| 4.3.2 花椒麻素对HepG2细胞形态观察 | 第46-48页 |
| 4.3.3 细胞周期测定及分析 | 第48-50页 |
| 4.3.4 单细胞凝胶电泳测定DNA损伤 | 第50-51页 |
| 4.3.5 DAPI核染HepG2细胞 | 第51-52页 |
| 4.3.7 Rh123染色测定线粒体膜电位 | 第52-53页 |
| 4.3.8 花椒麻素对基因表达量的影响 | 第53-54页 |
| 4.3.9 蛋白免疫印迹 | 第54-55页 |
| 4.4 讨论与小结 | 第55-58页 |
| 第5章 花椒麻素对肝细胞降胆固醇作用及机理 | 第58-72页 |
| 5.1 试验材料、试剂与仪器 | 第58-59页 |
| 5.1.1 试验材料 | 第58页 |
| 5.1.2 试验试剂 | 第58-59页 |
| 5.1.3 试验仪器 | 第59页 |
| 5.2 试验方法 | 第59-61页 |
| 5.2.1 花椒麻素溶液配制 | 第59页 |
| 5.2.2 细胞存活力测定 | 第59页 |
| 5.2.3 细胞内总蛋白含量测定 | 第59页 |
| 5.2.4 细胞分组培养及处理 | 第59-60页 |
| 5.2.5 细胞内总胆固醇和游离胆固醇的测定 | 第60页 |
| 5.2.6 培养基中总胆固醇、甘油三酯和总胆汁酸的测定 | 第60页 |
| 5.2.7 细胞内[Ca~(2+)]i测定 | 第60-61页 |
| 5.2.8 总RNA提取及RT-PCR | 第61页 |
| 5.2.9 蛋白免疫印迹 | 第61页 |
| 5.2.10 数据处理 | 第61页 |
| 5.3 结果与分析 | 第61-69页 |
| 5.3.1 花椒麻素对HepG2细胞存活力的影响 | 第61-62页 |
| 5.3.2 花椒麻素对HepG2细胞内总胆固醇和游离胆固醇含量的影响 | 第62-63页 |
| 5.3.3 花椒麻素对培养基中总胆固醇、甘油三酯和总胆汁酸含量的影响 | 第63-64页 |
| 5.3.4 花椒麻素对细胞内[Ca~(2+)]i的影响 | 第64页 |
| 5.3.5 花椒麻素对HepG2细胞中与胆固醇代谢相关基因的影响 | 第64-67页 |
| 5.3.6 TRPV1拮抗剂和TRPA1拮抗剂对胆固醇代谢相关影响 | 第67-69页 |
| 5.4 讨论与小结 | 第69-72页 |
| 第6章 结论与展望 | 第72-74页 |
| 6.1 全文总结 | 第72-73页 |
| 6.2 展望 | 第73-74页 |
| 参考文献 | 第74-84页 |
| 致谢 | 第84-86页 |
| 攻读硕士研究生期间发表论文 | 第86页 |
