课题资助 | 第4-5页 |
略词说明 | 第5-8页 |
中文摘要 | 第8-10页 |
Abstract | 第10页 |
1 前言 | 第11-30页 |
1.1 马立克氏病病原 | 第11-19页 |
1.1.1 马立克氏病病原结构 | 第11-12页 |
1.1.2 马立克氏病病毒的流行病学 | 第12-13页 |
1.1.3 马立克氏病的临诊症状 | 第13页 |
1.1.4 马立克氏病的发病机理和病理变化 | 第13-15页 |
1.1.5 马立克氏病的诊断 | 第15-16页 |
1.1.6 防制 | 第16-18页 |
1.1.7 免疫失败原因及防止方法 | 第18-19页 |
1.2 病毒气溶胶 | 第19-27页 |
1.2.1 气溶胶的概念 | 第19页 |
1.2.2 病毒气溶胶的特性 | 第19-20页 |
1.2.3 病毒气溶胶的产生和传播 | 第20-21页 |
1.2.4 病毒气溶胶的危害 | 第21-22页 |
1.2.5 气溶胶采样原理和仪器 | 第22-25页 |
1.2.6 病毒气溶胶的采集和检测 | 第25页 |
1.2.7 微生物气溶胶国内研究现状 | 第25-26页 |
1.2.8 微生物气溶胶国外研究现状 | 第26-27页 |
1.3 实时荧光定量 PCR | 第27-28页 |
1.4 本研究的意义 | 第28-30页 |
2 材料与方法 | 第30-43页 |
2.1 材料 | 第30-32页 |
2.1.1 SPF 鸡胚和 SPF 鸡 | 第30页 |
2.1.2 病毒的制备 | 第30页 |
2.1.3 引物和探针 | 第30页 |
2.1.4 主要试剂及配制 | 第30-32页 |
2.2 方法 | 第32-43页 |
2.2.1 引物探针的合成 | 第32页 |
2.2.2 标准品的制备 | 第32-38页 |
2.2.2.1 提取病毒 DNA | 第32-33页 |
2.2.2.2 PP38 基因片段的扩增 | 第33页 |
2.2.2.3 阳性 PCR 产物的纯化回收 | 第33-34页 |
2.2.2.4 PCR 产物与载体连接 | 第34-35页 |
2.2.2.5 转化感受态细胞 | 第35-36页 |
2.2.2.6 阳性质粒的提取 | 第36-37页 |
2.2.2.7 菌种保存 | 第37页 |
2.2.2.8 标准品的获取与定量 | 第37-38页 |
2.2.3 试验设计 | 第38-39页 |
2.2.4 鸡胚成纤维细胞的制备和培养 | 第39页 |
2.2.5 病毒的复苏、扩增和冻存 | 第39-40页 |
2.2.6 接种病毒 | 第40页 |
2.2.7 样品的采集程序 | 第40页 |
2.2.8 全玻璃冲击式采样 | 第40页 |
2.2.9 空气和羽毛囊样品中病毒 DNA 的提取 | 第40页 |
2.2.10 实时荧光定量 PCR 检测空气及羽毛囊病毒 DNA 含量 | 第40页 |
2.2.11 间接免疫荧光试验 | 第40-41页 |
2.2.12 临床观察和剖检 | 第41页 |
2.2.13 组织切片的制备 | 第41-43页 |
3 结果 | 第43-48页 |
3.1 标准品制备结果 | 第43-44页 |
3.2 MDV 气溶胶发生时间和含量 | 第44-45页 |
3.3 攻毒鸡和气溶胶被动感染组鸡病毒血症的检测 | 第45页 |
3.4 G1、G2 组羽毛囊样品病毒 DNA 含量 | 第45-46页 |
3.5 临床观察、剖检及切片 | 第46-48页 |
4 讨论 | 第48-50页 |
5 结论 | 第50-51页 |
参考文献 | 第51-60页 |
致谢 | 第60-61页 |
攻读学位期间发表论文 | 第61页 |