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ALV-J致病机制的体外分子病理学研究

符号说明第4-8页
中文摘要第8-10页
Abstract第10-11页
1 前言第12-24页
    1.1 病毒的分类第12页
    1.2 J 亚群禽白血病的病原学与分子病毒学第12-16页
    1.3 ALV-J 的致病性和致瘤机理第16-17页
    1.4 肿瘤相关基因第17-21页
        1.4.1 癌基因第17-18页
        1.4.2 抑癌基因第18-20页
        1.4.3 凋亡基因 Bcl-2第20-21页
    1.5 热应激蛋白第21-22页
    1.6 本研究的目的意义第22-24页
2 材料和方法第24-35页
    2.1 材料第24-25页
        2.1.1 病毒第24页
        2.1.2 主要材料第24页
        2.1.3 主要仪器第24-25页
    2.2 方法第25-27页
        2.2.1 病毒的增殖第25页
        2.2.2 病毒的定量第25页
        2.2.3 前病毒基因组 DNA 提取第25-26页
        2.2.4 特异性 PCR 检测第26-27页
    2.3 不同来源的 ALV-J 体外细胞感染实验第27-35页
        2.3.1 实验设计第27页
        2.3.2 鸡胚成纤维细胞制作第27页
        2.3.3 肉鸡 CEF 外源性禽白血病病毒鉴定第27页
        2.3.4 细胞铺板及病毒接种第27页
        2.3.5 收集细胞及细胞上清第27-28页
        2.3.6 ALV 特异性抗体 p27 的检测第28页
        2.3.7 肿瘤相关基因检测第28-33页
        2.3.8 ELISA 法检测热应激蛋白 HSP60、HSP70 的含量第33-34页
        2.3.9 TUNEL 试剂盒检测细胞凋亡数量差异第34-35页
3 结果第35-54页
    3.1 病毒定量第35页
    3.2 特异性 PCR 检测第35-36页
    3.3 肉鸡 CEF 外源性禽白血病病毒鉴定结果第36页
    3.4 复制能力比较检测结果第36-39页
        3.4.1 ALV 群特异性抗体的检测第36-38页
        3.4.2 毒力检测第38-39页
    3.5 肿瘤相关基因检测结果第39-49页
        3.5.1 Real-time PCR 标准曲线的建立第39-40页
        3.5.2 利用 Real-time PCR 检测 ALV-J 感染靶细胞肿瘤相关基因表达第40-49页
    3.6 ELISA 法检测热应激蛋白 HSP70、HSP60 的含量第49-53页
        3.6.1 HSP70 ELISA 检测结果第49-51页
        3.6.2 HSP60 ELISA 检测结果第51-53页
    3.7 凋亡试剂盒检测结果第53-54页
4 讨论第54-58页
    4.1 复制能力比较第54-55页
    4.2 肿瘤相关基因检测第55-56页
    4.3 热应激蛋白检测第56-57页
    4.4 细胞凋亡数量检测第57-58页
5 结论第58-59页
6 参考文献第59-67页
致谢第67-68页
硕士期间发表论文情况第68页

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