| 摘要 | 第3-5页 |
| ABSTRACT | 第5-7页 |
| 1 绪论 | 第11-15页 |
| 1.1 研究背景 | 第11-13页 |
| 1.1.1 癌症的危害 | 第11页 |
| 1.1.2 肿瘤干细胞学说 | 第11页 |
| 1.1.3 MSCs 生物学特性 | 第11-12页 |
| 1.1.4 MSCs 与肿瘤细胞的作用 | 第12-13页 |
| 1.2 本文关心的内容 | 第13-14页 |
| 1.3 本文研究的内容和主要目的 | 第14-15页 |
| 1.3.1 本文研究的主要目的 | 第14页 |
| 1.3.2 本文研究的主要内容 | 第14-15页 |
| 2 细胞分离与培养 | 第15-20页 |
| 2.1 引言 | 第15页 |
| 2.2 实验材料 | 第15-16页 |
| 2.2.1 实验动物 | 第15页 |
| 2.2.2 主要仪器、耗材 | 第15页 |
| 2.2.3 主要药品、试剂 | 第15-16页 |
| 2.2.4 主要实验试剂的配制 | 第16页 |
| 2.3 实验方法 | 第16-17页 |
| 2.3.1 骨髓间充质干细胞原代培养 | 第16-17页 |
| 2.3.2 骨髓间充质干细胞传代培养 | 第17页 |
| 2.3.3 大鼠肝癌细胞 CBRH-7919 的培养 | 第17页 |
| 2.3.4 细胞表面抗原检测 | 第17页 |
| 2.4 实验结果 | 第17-19页 |
| 2.4.1 MSCs 形态学观察 | 第17-18页 |
| 2.4.2 MSCs 表面抗原表达 | 第18-19页 |
| 2.4.3 CBRH-7919 形态学观察 | 第19页 |
| 2.5 讨论 | 第19页 |
| 2.6 本章小结 | 第19-20页 |
| 3.MSC-CM 诱导 CBRH-7919 细胞迁移 | 第20-40页 |
| 3.1 引言 | 第20-21页 |
| 3.2 实验材料 | 第21-24页 |
| 3.2.1 主要仪器、耗材 | 第21页 |
| 3.2.2 主要药品、试剂 | 第21-22页 |
| 3.2.3 主要实验试剂的配制 | 第22-24页 |
| 3.2.4 条件培养基的制备 | 第24页 |
| 3.3 实验方法 | 第24-31页 |
| 3.3.1 Transwell 法体外检测细胞迁移 | 第24-25页 |
| 3.3.2 MTT 法检测细胞活性 | 第25-26页 |
| 3.3.3 RT-PCR 检测细胞基因表达变化 | 第26-27页 |
| 3.3.4 Western 蛋白印迹实验检测蛋白表达变化 | 第27-30页 |
| 3.3.5 原子力显微镜检测细胞硬度变化 | 第30-31页 |
| 3.4 实验结果 | 第31-37页 |
| 3.4.1 MSC-CM 诱导 CBRH-7919 细胞迁移 | 第31-32页 |
| 3.4.2 MSC-CM 提高 CBRH-7919 细胞中 CXCR4 表达 | 第32-34页 |
| 3.4.3 阻断 CXCR4 可抑制 CBRH-7919 细胞迁移 | 第34-36页 |
| 3.4.4 MSC-CM 降低 CBRH-7919 细胞的硬度 | 第36页 |
| 3.4.5 MSC-CM 影响 CBRH-7919 细胞骨架 | 第36-37页 |
| 3.5 讨论 | 第37-39页 |
| 3.6 本章小结 | 第39-40页 |
| 4. MSCS 促进 CBRH-7919 细胞增殖 | 第40-47页 |
| 4.1 引言 | 第40-41页 |
| 4.2 实验材料 | 第41页 |
| 4.2.1 主要仪器、耗材 | 第41页 |
| 4.2.2 主要药品、试剂 | 第41页 |
| 4.3 实验方法 | 第41-43页 |
| 4.3.1 共培养模型的建立 | 第41页 |
| 4.3.2 MTT 法检测细胞增殖 | 第41-42页 |
| 4.3.3 RT-PCR 检测细胞基因表达变化 | 第42页 |
| 4.3.4 Western blot 检测细胞蛋白表达变化 | 第42-43页 |
| 4.4 实验结果 | 第43-45页 |
| 4.4.1 MSCs 促进 CBRH-7919 的增殖 | 第43-44页 |
| 4.4.2 MSCs 提高 CBRH-7919 细胞中 Wnt5a、β-catenin 基因表达 | 第44页 |
| 4.4.3 MSCs 提高 CBRH-7919 细胞中β-catenin 蛋白表达 | 第44-45页 |
| 4.5 讨论 | 第45-46页 |
| 4.6 本章小结 | 第46-47页 |
| 5 结论与展望 | 第47-49页 |
| 5.1 主要结论 | 第47页 |
| 5.2 后续研究工作的展望 | 第47-49页 |
| 致谢 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-56页 |
| 附录 | 第56页 |
| A. 作者在攻读学位期间发表的论文目录 | 第56页 |
