| 摘要 | 第7-9页 |
| ABSTRACT | 第9-10页 |
| 符号说明 | 第11-13页 |
| 第一章 前言 | 第13-26页 |
| 一、牛流行热综述 | 第13-20页 |
| 1 牛流行热简介 | 第13页 |
| 2 BEFV的基因组结构和功能 | 第13-17页 |
| 2.1 N蛋白 | 第14页 |
| 2.2 P蛋白 | 第14页 |
| 2.3 L蛋白 | 第14-15页 |
| 2.4 M蛋白 | 第15页 |
| 2.5 G蛋白 | 第15页 |
| 2.6 G_NS蛋白 | 第15-16页 |
| 2.7 α,β和γ蛋白 | 第16-17页 |
| 3 理化性质 | 第17页 |
| 4 致病机制 | 第17-18页 |
| 5 流行病学 | 第18-19页 |
| 6 诊断与防治 | 第19-20页 |
| 二、miRNA综述 | 第20-25页 |
| 1 miRNA概述 | 第20-21页 |
| 2 miRNA的合成机制 | 第21-22页 |
| 2.1 miRNA合成的主要途径 | 第21-22页 |
| 2.2 不依赖于Drosha酶的pre-miRNA的合成途径 | 第22页 |
| 2.3 不依赖于Dicer酶的成熟miRNA的合成途径 | 第22页 |
| 3 miRNA的生物功能 | 第22-23页 |
| 4 宿主miRNA对病毒感染的调控 | 第23页 |
| 4.1 宿主miRNA抑制病毒复制 | 第23页 |
| 4.2 宿主miRNA促进病毒复制 | 第23页 |
| 5 病毒miRNA(viral miRNA,vmiRNA)对病毒感染的调控 | 第23-25页 |
| 5.1 vmiRNA抑制自身复制 | 第24页 |
| 5.2 vmiRNA抑制宿主基因表达 | 第24-25页 |
| 三、本论文的研究内容及研究意义 | 第25-26页 |
| 第二章 miR-101与BEFV的相互作用验证 | 第26-45页 |
| 一、材料与方法 | 第26-35页 |
| 1 实验材料 | 第26页 |
| 1.1 细胞系 | 第26页 |
| 1.2 病毒 | 第26页 |
| 2 实验试剂 | 第26-27页 |
| 2.1 主要试剂 | 第26页 |
| 2.2 试剂配方 | 第26-27页 |
| 3 实验仪器 | 第27页 |
| 4 实验方法 | 第27-35页 |
| 4.1 细胞培养 | 第27-28页 |
| 4.2 BEFV的增殖及TCID_(50)测定病毒滴度 | 第28-29页 |
| 4.3 样品制备 | 第29页 |
| 4.4 高通量筛选差异表达的miRNA | 第29-30页 |
| 4.5 miRNA的荧光定量PCR反应 | 第30-31页 |
| 4.6 荧光定量PCR检测BEFV复制 | 第31-34页 |
| 4.7 数据统计学分析 | 第34-35页 |
| 二、结果 | 第35-43页 |
| 1 BEFV的TCID_(50)测定 | 第35-36页 |
| 2 高通量筛选差异表达的miRNA | 第36-40页 |
| 3 部分差异表达的miRNA的验证 | 第40-41页 |
| 4 miR-101在BEFV复制过程中的作用 | 第41-43页 |
| 三、讨论 | 第43-44页 |
| 四、结论 | 第44-45页 |
| 第三章 miR-101的靶基因鉴定 | 第45-63页 |
| 一、材料与方法 | 第45-54页 |
| 1 实验材料 | 第45页 |
| 2 实验试剂 | 第45-46页 |
| 2.1 主要试剂 | 第45-46页 |
| 2.2 试剂配方 | 第46页 |
| 3 实验仪器 | 第46-47页 |
| 4 实验方法 | 第47-54页 |
| 4.1 生物信息学预测miRNA的靶基因 | 第47页 |
| 4.2 载体构建 | 第47-53页 |
| 4.3 Luciferase检测 | 第53页 |
| 4.4 数据统计学分析 | 第53-54页 |
| 二、结果 | 第54-61页 |
| 1 miR-101的靶基因分析 | 第54-56页 |
| 2 miR-101的候选靶序列的扩增及分析 | 第56-57页 |
| 3 载体的构建和鉴定 | 第57-59页 |
| 4 miR-101与靶基因相互作用 | 第59-61页 |
| 三、讨论 | 第61-62页 |
| 四、结论 | 第62-63页 |
| 总结与创新点 | 第63-64页 |
| 参考文献 | 第64-72页 |
| 致谢 | 第72-73页 |
| 学位论文评阅及答辩情况表 | 第73页 |
