| 摘要 | 第8-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 1 前言 | 第11-19页 |
| 1.1 糖在植物生长发育中的作用 | 第11-12页 |
| 1.2 植物体内糖的长距离运输 | 第12-13页 |
| 1.3 SWEET糖转运蛋白研究进展 | 第13-14页 |
| 1.3.1 SWEET糖转运蛋白的结构特征 | 第13页 |
| 1.3.2 SWEET糖转运蛋白的鉴定及功能 | 第13-14页 |
| 1.4 SWEET基因家族CladeIII在植物中的重要生理功能 | 第14-16页 |
| 1.4.1 SWEET基因参与糖的转运 | 第14-15页 |
| 1.4.2 SWEET基因参与生殖发育 | 第15-16页 |
| 1.4.3 SWEET基因参与衰老过程 | 第16页 |
| 1.5 植物基因功能主要研究方法 | 第16-17页 |
| 1.5.1 RNA干扰技术 | 第16-17页 |
| 1.5.2 过表达技术 | 第17页 |
| 1.6 本研究的目的与意义 | 第17-19页 |
| 2 材料与方法 | 第19-26页 |
| 2.0 试验材料 | 第19-20页 |
| 2.0.1 植物材料 | 第19页 |
| 2.0.2 载体和菌株 | 第19页 |
| 2.0.3 主要试剂 | 第19页 |
| 2.0.4 抗生素种类 | 第19-20页 |
| 2.1 试验方法 | 第20-26页 |
| 2.1.1 RNA的提取 | 第20-21页 |
| 2.1.2 cDNA的合成 | 第21页 |
| 2.1.3 PCR扩增和琼脂糖电泳及目的片段的回收 | 第21页 |
| 2.1.4 质粒DNA的提取、酶切与连接 | 第21-22页 |
| 2.1.5 大肠杆菌和农杆菌的转化 | 第22-23页 |
| 2.1.6 实时定量PCR | 第23页 |
| 2.1.7 过表达载体构建 | 第23页 |
| 2.1.8 基因沉默载体构建 | 第23页 |
| 2.1.9 基因的瞬时表达 | 第23-24页 |
| 2.1.10 番茄遗传转化 | 第24页 |
| 2.1.11 转基因植株的检测 | 第24-25页 |
| 2.1.12 糖含量的测定 | 第25-26页 |
| 3 结果与分析 | 第26-38页 |
| 3.1 SlSWEET12c和SlSWEET14在番茄果实成熟过程中的表达特征 | 第26-27页 |
| 3.2 SlSWEET12c和SlSWEET14过表达载体的构建与检测 | 第27-29页 |
| 3.2.1 SlSWEET12c和SlSWEET14cDNA全长的获得 | 第27-28页 |
| 3.2.2 过表达载体的构建及检测 | 第28-29页 |
| 3.3 SlSWEET12c和SlSWEET14基因沉默载体的构建与检测 | 第29-30页 |
| 3.3.1 SlSWEET12c和SlSWEET14基因沉默片段的扩增 | 第29页 |
| 3.3.2 沉默载体的构建及检测 | 第29-30页 |
| 3.4 过表达载体及沉默载体的瞬时表达分析 | 第30-32页 |
| 3.4.1 过表达和沉默SlSWEET12c载体的表达量分析 | 第30-31页 |
| 3.4.2 过表达和沉默SlSWEET14载体的表达量分析 | 第31-32页 |
| 3.5 转基因番茄株系的获得与分子鉴定 | 第32-36页 |
| 3.5.1 番茄的遗传转化 | 第32页 |
| 3.5.2 转基因番茄阳性植株的鉴定 | 第32-33页 |
| 3.5.3 沉默转基因番茄果实的表达量分析 | 第33-35页 |
| 3.5.4 过表达转基因番茄叶片的表达量分析 | 第35-36页 |
| 3.6 转基因番茄叶片与果实糖含量的变化 | 第36-38页 |
| 3.6.1 SlSWEET12c转基因番茄叶片与果实糖含量的分析 | 第36页 |
| 3.6.2 SlSWEET14转基因番茄叶片与果实糖含量的分析 | 第36-38页 |
| 4 讨论 | 第38-41页 |
| 5 结论与展望 | 第41-42页 |
| 5.1 结论 | 第41页 |
| 5.2 展望 | 第41-42页 |
| 参考文献 | 第42-48页 |
| 附录 | 第48-53页 |
| 致谢 | 第53-54页 |
| 攻读学位论文期间发表文章 | 第54-55页 |
