| 摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10-11页 |
| 1 前言 | 第12-21页 |
| 1.1 miRNA在植物非生物胁迫中的作用 | 第12-15页 |
| 1.1.1 miRNA的发现及其结构 | 第13页 |
| 1.1.2 植物miRNA的功能 | 第13-15页 |
| 1.1.3 miRNA在植物营养胁迫中的作用 | 第15页 |
| 1.2 miRNA的靶基因在植物中探究 | 第15-16页 |
| 1.2.1 miRNA靶基因的探究方法 | 第15-16页 |
| 1.2.2 miRNA靶基因的验证方法 | 第16页 |
| 1.3 钾在高等植物中的功能 | 第16-19页 |
| 1.3.1 钾在植物体内的作用及运输机制 | 第17-18页 |
| 1.3.2 低钾胁迫对植物生长发育影响的作用机制 | 第18-19页 |
| 1.4 研究的目的及意义 | 第19-21页 |
| 2 材料与方法 | 第21-31页 |
| 2.1 试验材料及其处理 | 第21-22页 |
| 2.1.1 试验材料 | 第21页 |
| 2.1.2 主要试剂和酶 | 第21页 |
| 2.1.3 主要仪器 | 第21页 |
| 2.1.4 载体、菌株和抗生素 | 第21-22页 |
| 2.1.5 植物材料的处理 | 第22页 |
| 2.2 试验方法 | 第22-31页 |
| 2.2.1 植物钾含量的测定 | 第22-23页 |
| 2.2.2 植物组织钾耗竭试验 | 第23页 |
| 2.2.3 总RNA的提取 | 第23页 |
| 2.2.4 1%琼脂糖凝胶电泳 | 第23-24页 |
| 2.2.5 RNA纯度检测 | 第24页 |
| 2.2.6 RNA反转录 | 第24页 |
| 2.2.7 miRNA茎环法反转录 | 第24-25页 |
| 2.2.8 miRNA实时定量PCR | 第25页 |
| 2.2.9 启动子分析 | 第25-26页 |
| 2.2.10 目的片段扩增 | 第26页 |
| 2.2.11 琼脂糖凝胶电泳回收 | 第26页 |
| 2.2.12 酶切及其连接 | 第26-27页 |
| 2.2.13 大肠杆菌转化 | 第27页 |
| 2.2.14 菌液质粒的提取 | 第27-28页 |
| 2.2.15 农杆菌转化 | 第28-29页 |
| 2.2.16 植物组织DNA的提取 | 第29页 |
| 2.2.17 番茄的遗传转化 | 第29-31页 |
| 3 结果与分析 | 第31-44页 |
| 3.1 低钾胁迫对番茄幼苗生长及钾离子吸收的影响 | 第31-36页 |
| 3.1.1 低钾胁迫处理下JZ18号番茄植物体内钾离子含量的变化 | 第31-32页 |
| 3.1.2 低钾胁迫处理下JZ34号番茄植物体内钾离子含量的变化 | 第32-33页 |
| 3.1.3 两品系番茄钾吸收动力学比较 | 第33页 |
| 3.1.4 低钾胁迫处理下JZ18号和JZ34号番茄幼苗生长发育的影响 | 第33-35页 |
| 3.1.5 低钾胁迫处理下JZ34号番茄和JZ18号番茄根系构型的变化 | 第35-36页 |
| 3.2 低钾胁迫下miR168a在番茄幼苗发育过程中的表达变化 | 第36-37页 |
| 3.2.1 JZ18号番茄在低钾处理胁迫下miR168a及靶基因AGO1表达变化 | 第36-37页 |
| 3.2.2 JZ34号番茄在低钾胁迫处理下miR168a及靶基因AGO1的表达变化 | 第37页 |
| 3.3 miR168a及靶基因AGO1启动子顺式作用元件分析 | 第37-39页 |
| 3.4 番茄各组织器官中miR168a及靶基因AGO1的表达模式分析 | 第39-40页 |
| 3.5 超表达miR168a载体构建 | 第40-41页 |
| 3.6 超表达miR168a的番茄遗传转化及鉴定分析 | 第41-43页 |
| 3.7 miR168a转基因番茄低钾胁迫耐受性分析 | 第43-44页 |
| 4 讨论 | 第44-46页 |
| 5 结论与展望 | 第46-47页 |
| 5.1 结论 | 第46页 |
| 5.2 展望 | 第46-47页 |
| 参考文献 | 第47-54页 |
| 附录 | 第54-57页 |
| 致谢 | 第57-58页 |
| 攻读学位论文期间发表文章 | 第58-59页 |
