| 摘要 | 第13-15页 |
| Abstract | 第15-17页 |
| 第一章 文献综述 | 第18-34页 |
| 1.1 引言 | 第18页 |
| 1.2 叶色突变的类型 | 第18-19页 |
| 1.3 叶色突变的分子机制 | 第19-23页 |
| 1.3.1 叶绿素生物合成途径中的相关基因的突变 | 第20-21页 |
| 1.3.2 叶绿素生物降解途径中的相关基因的突变 | 第21-22页 |
| 1.3.3 细胞质-核信号传导相关基因的突变 | 第22-23页 |
| 1.3.4 叶绿体发育和分化相关基因的突变 | 第23页 |
| 1.4 叶色与衰老 | 第23-26页 |
| 1.4.1 叶绿素降解与衰老 | 第24页 |
| 1.4.2 ABA与衰老 | 第24-25页 |
| 1.4.3 活性氧(ROS)与衰老 | 第25-26页 |
| 1.5 水稻白化转绿突变体研究进展 | 第26-28页 |
| 1.6 PPR蛋白研究进展 | 第28-33页 |
| 1.6.1 PPR蛋白的结构和分类 | 第28-29页 |
| 1.6.2 PPR蛋白作用和功能 | 第29-33页 |
| 1.6.2.1 PPR蛋白与RNA编辑 | 第30-32页 |
| 1.6.2.2 PPR蛋白与RNA剪接 | 第32-33页 |
| 1.7 本研究的目的意义 | 第33-34页 |
| 第二章 水稻叶色基因ES3(t)的鉴定 | 第34-56页 |
| 2.1 实验材料 | 第34页 |
| 2.2 实验试剂和仪器 | 第34-35页 |
| 2.2.1 常用实验试剂 | 第34页 |
| 2.2.2 实验仪器 | 第34-35页 |
| 2.3 实验方法 | 第35-42页 |
| 2.3.1 EMS诱变 | 第35页 |
| 2.3.2 突变体es3(t)主要农艺性状考察分析 | 第35页 |
| 2.3.3 叶绿素含量测定 | 第35-36页 |
| 2.3.4 透射电镜观察(TEM) | 第36页 |
| 2.3.5 NBT和DAB染色 | 第36-37页 |
| 2.3.5.1 NBT染色 | 第36页 |
| 2.3.5.2 DAB染色 | 第36-37页 |
| 2.3.6 ABA测定 | 第37页 |
| 2.3.7 SOD和CAT活性检测 | 第37页 |
| 2.3.8 MDA含量测定 | 第37页 |
| 2.3.9 遗传分析与基因定位 | 第37-38页 |
| 2.3.10 DNA提取 | 第38页 |
| 2.3.11 PCR扩增反应体系 | 第38-39页 |
| 2.3.12 凝胶电泳检测 | 第39-40页 |
| 2.3.13 PCR片段回收 | 第40-41页 |
| 2.3.14 RNA提取 | 第41-42页 |
| 2.3.15 RealtimePCR分析 | 第42页 |
| 2.4 结果与分析 | 第42-53页 |
| 2.4.1 es3(t)表现为早衰表型 | 第42-43页 |
| 2.4.2 es3(t)的早衰表型由单一隐性基因控制 | 第43-44页 |
| 2.4.3 ES3(t)的图位克隆 | 第44-46页 |
| 2.4.4 ES3(t)突变加速水稻叶片衰老 | 第46-48页 |
| 2.4.5 叶绿素含量降低、光合作用相关基因表达水平下降和不规则的叶绿体结构是诱导突变体es3(t)千粒重减少和结实率降低原因 | 第48-50页 |
| 2.4.6 突变体es3(t)中衰老相关基因表达水平升高 | 第50-51页 |
| 2.4.7 ABA可能导致es3(t)的叶片衰老 | 第51-53页 |
| 2.5 讨论和结论 | 第53-56页 |
| 2.5.1 讨论 | 第53-55页 |
| 2.5.1.1 es3(t)是早衰突变体 | 第53-54页 |
| 2.5.1.2 ES3(t)通过影响ABA含量和ROS积累导致植株早衰 | 第54-55页 |
| 2.5.2 结论 | 第55-56页 |
| 第三章 水稻叶色基因AHS1的遗传分析与功能验证 | 第56-78页 |
| 3.1 实验材料 | 第56页 |
| 3.2 实验试剂和仪器 | 第56页 |
| 3.2.1 常用实验试剂 | 第56页 |
| 3.2.2 实验仪器 | 第56页 |
| 3.3 实验方法 | 第56-64页 |
| 3.3.1 EMS诱变 | 第56页 |
| 3.3.2 相关农艺性状调查 | 第56页 |
| 3.3.3 叶绿素含量测定 | 第56页 |
| 3.3.4 透射电镜分析 | 第56-57页 |
| 3.3.5 NBT和DAB染色 | 第57页 |
| 3.3.6 遗传分析及基因定位 | 第57页 |
| 3.3.7 DNA提取 | 第57页 |
| 3.3.8 PCR反应体系 | 第57页 |
| 3.3.9 电泳检测 | 第57页 |
| 3.3.10 PCR片段回收 | 第57页 |
| 3.3.11 RNA提取 | 第57页 |
| 3.3.12 大肠杆菌感受态DH5a的制备 | 第57-58页 |
| 3.3.13 大肠杆菌热激转化 | 第58-59页 |
| 3.3.14 大肠杆菌质粒提取 | 第59页 |
| 3.3.15 农杆菌感受态EHA105的制备 | 第59-60页 |
| 3.3.16 农杆菌电击转化 | 第60页 |
| 3.3.17 转基因互补验证 | 第60-62页 |
| 3.3.18 RealtimePCR分析 | 第62页 |
| 3.3.19 GUS染色分析 | 第62-63页 |
| 3.3.20 AHS1亚细胞定位 | 第63-64页 |
| 3.4 结果与分析 | 第64-74页 |
| 3.4.1 ahs1苗期表现为白化表型 | 第64-66页 |
| 3.4.2 ahs1突变体表现出颖壳白化 | 第66-67页 |
| 3.4.3 ahs1叶片中累积过量ROS | 第67-69页 |
| 3.4.4 ahs1表型是由单隐性核基因控制 | 第69-70页 |
| 3.4.5 AHS1的精细定位 | 第70-71页 |
| 3.4.6 候选基因预测及测序分析 | 第71页 |
| 3.4.7 AHS1基因的转基因互补验证 | 第71-72页 |
| 3.4.8 AHS1的表达模式分析 | 第72-73页 |
| 3.4.9 AHS1编码叶绿体定位的PPR蛋白 | 第73-74页 |
| 3.5 讨论与结论 | 第74-78页 |
| 3.5.1 讨论 | 第74-76页 |
| 3.5.1.1 AHS1可能是一个高温响应因子 | 第74-75页 |
| 3.5.1.2 AHS1调控叶片中活性氧的动态平衡 | 第75页 |
| 3.5.1.3 AHS1作为PPR蛋白可能参与了叶绿体基因转录本的修饰 | 第75-76页 |
| 3.5.2 结论 | 第76-78页 |
| 参考文献 | 第78-88页 |
| 附录 | 第88-99页 |
| 致谢 | 第99-101页 |
| 攻读学位论文期间发表文章 | 第101-102页 |
