| 摘要 | 第7-9页 |
| ABSTRACT | 第9-10页 |
| 缩略词表 | 第11-13页 |
| 第一部分 文献综述 | 第13-45页 |
| 第一章 棉纤维发育过程的研究 | 第13-17页 |
| 1 起始分化期 | 第14页 |
| 2 伸长期/初生壁形成期 | 第14-15页 |
| 3 次生壁合成期 | 第15-16页 |
| 4 成熟期 | 第16-17页 |
| 第二章 cDNA末端快速扩增技术 | 第17-23页 |
| 1 3'RACE的技术原理 | 第17-18页 |
| 2 5'RACE的技术原理 | 第18页 |
| 3 RACE技术的优点和缺点 | 第18-19页 |
| 4 RACE技术的注意事项 | 第19-21页 |
| 4.1 3'RACE技术应注意事项 | 第19-20页 |
| 4.2 5'RACE技术应注意事项 | 第20-21页 |
| 5 新型RACE技术 | 第21-23页 |
| 5.1 Marathon PCR技术SMART-RACE技术 | 第21页 |
| 5.2 "电子"cDNA文库筛选 | 第21-23页 |
| 第三章 植物功能基因组学中基因表达的研究 | 第23-31页 |
| 1 基因表达模式的研究 | 第23页 |
| 2 植物功能基因组学中基因表达的研究 | 第23-29页 |
| 3 蛋白质水平上的基因表达研究 | 第29-31页 |
| 第四章 囊泡膜相关蛋白和水通道蛋白的研究 | 第31-43页 |
| 1 SNAREs蛋白家族的研究 | 第31-33页 |
| 2 植物SNAREs的生物学功能 | 第33-36页 |
| 2.1 促进植物的胞质分裂 | 第33页 |
| 2.2 与植物的抗病性有关 | 第33-34页 |
| 2.3 SNAREs参与ABA信号传导及生长素的极性运输 | 第34页 |
| 2.4 SNAREs参与植物对非生物胁迫的响应 | 第34-35页 |
| 2.5 SNAREs与脂质筏的重要联系 | 第35页 |
| 2.6 SNAREs在植物向重力性中的作用 | 第35-36页 |
| 3 水通道蛋白基因(Aquaporins)的研究 | 第36-43页 |
| 本研究的目的和意义 | 第43-45页 |
| 第二部分 研究报告 | 第45-109页 |
| 第五章 囊泡膜相关蛋白基因(GhVAMP)的克隆及表达分析 | 第45-65页 |
| 1 材料与方法 | 第45-46页 |
| 1.1 植物材料 | 第45页 |
| 1.2 菌株和试剂 | 第45-46页 |
| 1.3 培养基 | 第46页 |
| 1.4 实验引物 | 第46页 |
| 2 实验方法 | 第46-54页 |
| 2.1 棉花总RNA的提取及DNaseI消化 | 第46-49页 |
| 2.2 大肠杆菌感受态细胞的制备及转化 | 第49-51页 |
| 2.3 GhVAMP cDNA全长序列的获得及表达分析 | 第51-54页 |
| 3 结果与分析 | 第54-62页 |
| 3.1 总RNA完整性分析 | 第54-55页 |
| 3.2 RACE方法获得GhVAMP基因全长 | 第55页 |
| 3.3 GhVAMP全长序列的获得与分析 | 第55-59页 |
| 3.4 GhVAMP的基因组序列分析 | 第59-61页 |
| 3.5 GhVAMP基因的表达分析 | 第61-62页 |
| 4 讨论 | 第62-65页 |
| 第六章 水通道蛋白基因(GhAQP)的表达分析与亚细胞定位 | 第65-77页 |
| 1 材料与方法 | 第65-66页 |
| 1.1 植物材料 | 第65-66页 |
| 1.2 菌株和试剂 | 第66页 |
| 1.3 培养基 | 第66页 |
| 1.4 实验引物 | 第66页 |
| 2 实验方法 | 第66-68页 |
| 2.1 GhAQP基因的亚细胞定位 | 第66-67页 |
| 2.2 基因枪介导的瞬时表达载体转化植物细胞 | 第67-68页 |
| 3 结果与分析 | 第68-75页 |
| 3.1 GhAQP的基因组序列分析 | 第68-70页 |
| 3.2 GhAQP基因的表达分析 | 第70-72页 |
| 3.3 GhAQP基因的亚细胞定位 | 第72-75页 |
| 4 讨论 | 第75-77页 |
| 4.1 GhAQP基因在棉花中的表达 | 第75-76页 |
| 4.2 GhAQP基因在洋葱表皮细胞亚细胞定位分析 | 第76-77页 |
| 第七章 农杆菌介导GhAQP和GhVAMP基因的遗传转化与功能的初步鉴定 | 第77-109页 |
| 1 材料与方法 | 第77-93页 |
| 1.1 植物材料 | 第77页 |
| 1.2 质粒和菌株 | 第77-79页 |
| 1.3 培养基 | 第79-81页 |
| 1.4 试剂 | 第81页 |
| 1.5 植物表达载体的农杆菌转化 | 第81-83页 |
| 1.6 农杆菌介导的植物遗传转化 | 第83-84页 |
| 1.7 转基因再生植株的PCR检测 | 第84-87页 |
| 1.8 愈伤组织的GUS检测 | 第87-88页 |
| 1.9 再生植株叶片的卡那霉素抗性检测 | 第88页 |
| 1.10 Southern杂交 | 第88-91页 |
| 1.11 水通道蛋白基因在转基因棉花中的功能验证 | 第91-93页 |
| 2 结果与分析 | 第93-105页 |
| 2.1 植物表达载体的农杆菌转化 | 第93-94页 |
| 2.2 GhAQP与GhVAMP基因的棉花遗传转化及转基因植株的获得 | 第94-96页 |
| 2.3 愈伤组织的GUS检测 | 第96-97页 |
| 2.4 转基因棉花的分子检测及卡那抗性检测 | 第97-99页 |
| 2.5 Southern杂交 | 第99-101页 |
| 2.6 T_0转基因植株的变化 | 第101-102页 |
| 2.7 转GhAQP基因棉花的低渗实验 | 第102-105页 |
| 3 讨论 | 第105-109页 |
| 3.1 农杆菌介导的棉花遗传转化及再生植株的检测 | 第105-106页 |
| 3.2 转GhAQP基因的低渗实验 | 第106-109页 |
| 全文结论 | 第109-111页 |
| 参考文献 | 第111-123页 |
| 致谢 | 第123页 |
