| 摘要 | 第3-5页 |
| ABSTRACT | 第5-6页 |
| 英文缩写表 | 第7-11页 |
| 1 前言 | 第11-23页 |
| 1.1 锌指蛋白 | 第11页 |
| 1.2 锌指蛋白分类 | 第11-14页 |
| 1.2.1 C2H2锌指蛋白 | 第12页 |
| 1.2.2 CCHC型锌指蛋白 | 第12-14页 |
| 1.3 p53基因的研究进展 | 第14-19页 |
| 1.3.1 p53基因的结构与抑癌功能 | 第14-15页 |
| 1.3.2 p53的下游调控网络 | 第15-16页 |
| 1.3.3 p53突变与癌症的关系 | 第16-17页 |
| 1.3.4 p53与基因治疗 | 第17-19页 |
| 1.4 选择性剪接 | 第19-21页 |
| 1.4.1 选择性剪接的机制 | 第19-20页 |
| 1.4.2 选择性剪接的检测方法 | 第20-21页 |
| 1.5 本课题研究的目的和意义 | 第21-23页 |
| 2 材料与方法 | 第23-36页 |
| 2.1 材料 | 第23-27页 |
| 2.1.1 菌种和细胞株 | 第23页 |
| 2.1.2 抗体 | 第23页 |
| 2.1.3 载体和工具酶 | 第23-24页 |
| 2.1.4 试剂盒 | 第24页 |
| 2.1.5 其它试剂 | 第24页 |
| 2.1.6 所需溶液 | 第24-26页 |
| 2.1.7 主要仪器设备 | 第26-27页 |
| 2.2 RNA的提取和反转录 | 第27-28页 |
| 2.3 表达载体的构建 | 第28-29页 |
| 2.3.1 引物设计与合成 | 第28页 |
| 2.3.2 PCR扩增ZCCHC10-1,ZCCHC10-2编码区序列 | 第28-29页 |
| 2.3.3 PCR产物克隆到pMD18-T载体 | 第29页 |
| 2.3.4 质粒DNA的提取、酶切鉴定及测序 | 第29页 |
| 2.3.5 重组载体的构建 | 第29页 |
| 2.4 ZCCHC10-1和ZCCHC10-2的抗体制备 | 第29-30页 |
| 2.5 细胞培养 | 第30-31页 |
| 2.6 细胞转染 | 第31页 |
| 2.7 荧光素酶分析 | 第31-32页 |
| 2.8 蛋白质印迹(Western blotting) | 第32-33页 |
| 2.9 免疫共沉淀(Co-immunoprecipitation) | 第33-34页 |
| 2.10 免疫荧光 | 第34-36页 |
| 3 结果与分析 | 第36-46页 |
| 3.1 ZCCHC10的2个转录本的鉴定 | 第36-37页 |
| 3.2 ZCCHC10的2个蛋白异构体结构分析 | 第37-38页 |
| 3.3 ZCCHC10-1和ZCCHC10-2的表达载体的构建 | 第38-40页 |
| 3.4 ZCCHC10-1和ZCCHC10-2在乳腺癌细胞系的表达分析 | 第40-41页 |
| 3.5 ZCCHC10-1与ZCCHC10-2与p53的亚细胞共定位分析 | 第41-43页 |
| 3.6 ZCCHC10-1和ZCCHC10-2与p53的相互作用 | 第43页 |
| 3.7 ZCCHC10-1和ZCCHC10-2对p53转录活性的影响 | 第43-44页 |
| 3.8 ZCCHC10-1和ZCCHC10-2对p53蛋白的稳定性的影响 | 第44-46页 |
| 4 讨论 | 第46-48页 |
| 参考文献 | 第48-56页 |
| 附录 | 第56-57页 |
| 致谢 | 第57-59页 |
