摘要 | 第1-5页 |
ABSTRACT | 第5-10页 |
插图和附表清单 | 第10-14页 |
第一章 前言 | 第14-27页 |
·极端微生物概述 | 第14-16页 |
·高温菌概述 | 第16-17页 |
·高温厌氧菌 | 第17-22页 |
·高温厌氧菌的生态环境 | 第17-18页 |
·高温厌氧菌酶的特性 | 第18页 |
·高温厌氧菌耐热机理的探索 | 第18-20页 |
·高温厌氧菌的应用 | 第20-22页 |
·热环境微生物多样性的分子生态学研究方法 | 第22-25页 |
·PCR扩增技术 | 第22页 |
·16S rRNA序列同源性分析 | 第22-23页 |
·末端限制性片段长度多态性分析(Terminal RestrictionFragment Length Polymorphism,T-RFLP) | 第23页 |
·实时定量PCR技术(Real-time PCR,Quantitative PCR,qPCR) | 第23-24页 |
·变性梯度凝胶电泳(Denaturing Gradient Gel Electrophoresis,DGGE) | 第24页 |
·荧光原位杂交技术(Fluorescence in situ hybridization,FISH) | 第24-25页 |
·国内外高温厌氧环境微生物多样性的研究现状 | 第25-26页 |
·国内研究现状 | 第25页 |
·国外研究现状 | 第25-26页 |
·研究的目的和意义 | 第26-27页 |
第二章 云南热泉高温厌氧菌株的分离和保藏 | 第27-42页 |
·材料 | 第27-30页 |
·样品采集 | 第27页 |
·厌氧培养基的类型 | 第27-30页 |
·方法 | 第30-34页 |
·高温厌氧样品的富集培养 | 第30页 |
·高温厌氧菌的分离纯化 | 第30-32页 |
·菌体纯度检查 | 第32页 |
·菌体形态观察 | 第32-33页 |
·菌种保藏 | 第33-34页 |
·结果 | 第34-41页 |
·云南热泉高温厌氧样品采集 | 第34页 |
·云南热泉高温厌氧样品富集培养 | 第34-35页 |
·云南热泉高温厌氧菌分离纯化 | 第35页 |
·纯化菌株细胞形态 | 第35-41页 |
·菌株的保藏 | 第41页 |
·讨论 | 第41-42页 |
第三章 菌株16S rRNA基因序列分析及多样性的初步研究 | 第42-68页 |
·材料 | 第42-43页 |
·菌种 | 第42页 |
·质粒 | 第42-43页 |
·培养基 | 第43页 |
·方法 | 第43-47页 |
·感受态细胞的制备 | 第43页 |
·小量制备DNA | 第43-44页 |
·PCR扩增16S rDNA | 第44-45页 |
·连接反应 | 第45-46页 |
·转化反应 | 第46页 |
·阳性克隆的筛选 | 第46-47页 |
·16S rRNA基因序列提交 | 第47页 |
·系统发育树的构建 | 第47页 |
·结果 | 第47-66页 |
·16SrRNA基因PCR扩增结果 | 第47-48页 |
·PCR产物的克隆及转化产物的检测 | 第48页 |
·序列提交 | 第48-50页 |
·系统发育树的构建 | 第50-66页 |
·讨论 | 第66-68页 |
第四章 部分高温厌氧菌株的鉴定 | 第68-128页 |
·材料 | 第68-69页 |
·菌株 | 第68-69页 |
·培养基 | 第69页 |
·方法 | 第69-72页 |
·细胞形态观察 | 第69页 |
·菌株生长温度范围的测定 | 第69页 |
·菌株生长pH值范围的测定 | 第69-70页 |
·菌株耐盐度的测定 | 第70页 |
·抗生素耐性测定 | 第70页 |
·唯一碳源利用测定 | 第70页 |
·DNA的G+C含量测定 | 第70-72页 |
·代谢产物测定 | 第72页 |
·16S rRNA基因序列系统发育树的构建 | 第72页 |
·结果 | 第72-126页 |
·菌株RH0804的鉴定描述 | 第72-80页 |
·菌株RH0806的鉴定描述 | 第80-87页 |
·菌株TC12的鉴定描述 | 第87-95页 |
·菌株TC25的鉴定描述 | 第95-101页 |
·菌株TC36的鉴定描述 | 第101-109页 |
·菌株TC47的鉴定描述 | 第109-116页 |
·菌株TC38的鉴定描述 | 第116-123页 |
·本文所分离高温厌氧菌株所在各属的描述 | 第123-126页 |
·讨论 | 第126-128页 |
第五章 总结 | 第128-130页 |
致谢 | 第130-131页 |
参考文献 | 第131-137页 |
附录A 攻读硕士期间发表论文目录 | 第137页 |
附录B 试验常用试剂及其配制 | 第137-140页 |