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云南热泉可培养高温厌氧菌多样性研究

摘要第1-5页
ABSTRACT第5-10页
插图和附表清单第10-14页
第一章 前言第14-27页
   ·极端微生物概述第14-16页
   ·高温菌概述第16-17页
   ·高温厌氧菌第17-22页
     ·高温厌氧菌的生态环境第17-18页
     ·高温厌氧菌酶的特性第18页
     ·高温厌氧菌耐热机理的探索第18-20页
     ·高温厌氧菌的应用第20-22页
   ·热环境微生物多样性的分子生态学研究方法第22-25页
     ·PCR扩增技术第22页
     ·16S rRNA序列同源性分析第22-23页
     ·末端限制性片段长度多态性分析(Terminal RestrictionFragment Length Polymorphism,T-RFLP)第23页
     ·实时定量PCR技术(Real-time PCR,Quantitative PCR,qPCR)第23-24页
     ·变性梯度凝胶电泳(Denaturing Gradient Gel Electrophoresis,DGGE)第24页
     ·荧光原位杂交技术(Fluorescence in situ hybridization,FISH)第24-25页
   ·国内外高温厌氧环境微生物多样性的研究现状第25-26页
     ·国内研究现状第25页
     ·国外研究现状第25-26页
   ·研究的目的和意义第26-27页
第二章 云南热泉高温厌氧菌株的分离和保藏第27-42页
   ·材料第27-30页
     ·样品采集第27页
     ·厌氧培养基的类型第27-30页
   ·方法第30-34页
     ·高温厌氧样品的富集培养第30页
     ·高温厌氧菌的分离纯化第30-32页
     ·菌体纯度检查第32页
     ·菌体形态观察第32-33页
     ·菌种保藏第33-34页
   ·结果第34-41页
     ·云南热泉高温厌氧样品采集第34页
     ·云南热泉高温厌氧样品富集培养第34-35页
     ·云南热泉高温厌氧菌分离纯化第35页
     ·纯化菌株细胞形态第35-41页
     ·菌株的保藏第41页
   ·讨论第41-42页
第三章 菌株16S rRNA基因序列分析及多样性的初步研究第42-68页
   ·材料第42-43页
     ·菌种第42页
     ·质粒第42-43页
     ·培养基第43页
   ·方法第43-47页
     ·感受态细胞的制备第43页
     ·小量制备DNA第43-44页
     ·PCR扩增16S rDNA第44-45页
     ·连接反应第45-46页
     ·转化反应第46页
     ·阳性克隆的筛选第46-47页
     ·16S rRNA基因序列提交第47页
     ·系统发育树的构建第47页
   ·结果第47-66页
     ·16SrRNA基因PCR扩增结果第47-48页
     ·PCR产物的克隆及转化产物的检测第48页
     ·序列提交第48-50页
     ·系统发育树的构建第50-66页
   ·讨论第66-68页
第四章 部分高温厌氧菌株的鉴定第68-128页
   ·材料第68-69页
     ·菌株第68-69页
     ·培养基第69页
   ·方法第69-72页
     ·细胞形态观察第69页
     ·菌株生长温度范围的测定第69页
     ·菌株生长pH值范围的测定第69-70页
     ·菌株耐盐度的测定第70页
     ·抗生素耐性测定第70页
     ·唯一碳源利用测定第70页
     ·DNA的G+C含量测定第70-72页
     ·代谢产物测定第72页
     ·16S rRNA基因序列系统发育树的构建第72页
   ·结果第72-126页
     ·菌株RH0804的鉴定描述第72-80页
     ·菌株RH0806的鉴定描述第80-87页
     ·菌株TC12的鉴定描述第87-95页
     ·菌株TC25的鉴定描述第95-101页
     ·菌株TC36的鉴定描述第101-109页
     ·菌株TC47的鉴定描述第109-116页
     ·菌株TC38的鉴定描述第116-123页
     ·本文所分离高温厌氧菌株所在各属的描述第123-126页
   ·讨论第126-128页
第五章 总结第128-130页
致谢第130-131页
参考文献第131-137页
附录A 攻读硕士期间发表论文目录第137页
附录B 试验常用试剂及其配制第137-140页

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