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荠菜冷响应基因(COR15)及其启动子的克隆和功能分析

部分缩略词表第6-8页
摘要第8-10页
ABSTRACT第10-12页
第一章 植物COR基因的研究进展第13-21页
    1.1 植物冻伤害及抗冻机制第13-14页
    1.2 植物冷诱导COR基因的研究概况第14-16页
    1.3 植物COR蛋白结构特征第16页
    1.4 植物COR蛋白功能研究概况第16-17页
    1.5 植物COR基因调控研究第17-19页
    1.6 植物COR基因在基因工程中的应用第19-21页
第二章 荠菜与拟南芥抗冻性初步研究第21-25页
    2.1 植物材料和试剂第22页
    2.2 实验方法第22页
        2.2.1 野生型荠菜与拟南芥种植第22页
        2.2.2 冷冻处理后植物形态的观察和存活率统计第22页
    2.3 实验结果和讨论第22-25页
        2.3.1 冷冻处理后荠菜与拟南芥形态观察第22-24页
        2.3.2 冷冻处理后荠菜与拟南芥幼苗存活率比较第24-25页
第三章 荠菜CbCOR15a和CbCOR15b启动子的克隆和活性分析第25-63页
    3.1 材料与试剂第25-28页
        3.1.1 材料第25页
        3.1.2 试剂第25-27页
        3.1.3 设备和仪器第27-28页
    3.2 实验方法第28-42页
        3.2.1 荠菜冷响应基因CbCORl5a和CbCOR15b启动子的克隆第28-33页
        3.2.2 启动子植物表达载体的构建第33-39页
        3.2.3 浸花法转化拟南芥以及阳性转化苗的筛选第39页
        3.2.4 AtCOR15aP,AtCOR15bP与CbCOR15aP,CbCOR15bP冷诱导表达特性的比较分析第39-42页
        3.2.5 荠菜冷响应启动子CbCOR15aP和CbCOR15bP冷响应核心元件的分析第42页
    3.3 实验结果和讨论第42-63页
        3.3.1 荠菜冷响应基因CbCOR15a和CbCOR15b启动子的克隆第42-49页
        3.3.2 植物表达载体的构建第49-56页
        3.3.3 转基因拟南芥阳性苗的筛选第56-59页
        3.3.4 AtCOR15aP,AtCOR15bP与CbCOR15aP,CbCOR15bP冷处理下表达特性的比较分析第59-61页
        3.3.5 荠菜冷响应启动子CbCOR15aP和CbCOR15bP冷响应核心元件的分析第61-63页
第四章 荠菜CbCOR15b抗冻功能分析以及蛋白亚细胞定位分析第63-81页
    4.1 实验材料和试剂第63-64页
        4.1.1 实验材料第63页
        4.1.2 实验试剂第63-64页
    4.2 实验方法第64-70页
        4.2.1 烟草转化载体的构建第64页
        4.2.2 CbCOR15aP::GUS,CbCOR15bP::GUS和35S::CbCOR15b重组质粒转化烟草永久表达第64-66页
        4.2.3 启动子活性的检测第66-68页
        4.2.4 荠菜CbCOR15b蛋白在烟草叶肉细胞中亚细胞定位分析第68-69页
        4.2.5 荠菜CbCOR15b蛋白在洋葱表皮细胞中亚细胞定位分析第69页
        4.2.6 转荠菜冷响应基因CbCOR15b烟草抗冻能力分析第69-70页
    4.3 实验结果第70-81页
        4.3.1 植物转化载体的构建第70-72页
        4.3.2 转基因烟草植株的获得第72-74页
        4.3.3 CbCOR15aP和CbCOR15bP启动子活性的检测第74-77页
        4.3.4 CbCOR15b亚细胞定位研究第77-78页
        4.3.5 转CbCOR15b烟草抗冻性分析第78-81页
第五章 总结与展望第81-84页
    5.1 CbCOR15基因启动子分析和CbCOR15b基因功能分析研究总结第81-82页
        5.1.1 CbCOR15aP和CbCOR15bP的克隆和分析第81-82页
        5.1.2 CbCOR15b抗冻功能分析第82页
    5.2 展望第82-84页
        5.2.1 启动子活性的进一步分析第82页
        5.2.2 CBF途径关键基因共转化提高转基因植株抗冻性第82-84页
参考文献第84-92页
攻读硕士学位期间发表的论文及申请的专利目录第92-93页
致谢第93-94页

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