部分缩略词表 | 第6-8页 |
摘要 | 第8-10页 |
ABSTRACT | 第10-12页 |
第一章 植物COR基因的研究进展 | 第13-21页 |
1.1 植物冻伤害及抗冻机制 | 第13-14页 |
1.2 植物冷诱导COR基因的研究概况 | 第14-16页 |
1.3 植物COR蛋白结构特征 | 第16页 |
1.4 植物COR蛋白功能研究概况 | 第16-17页 |
1.5 植物COR基因调控研究 | 第17-19页 |
1.6 植物COR基因在基因工程中的应用 | 第19-21页 |
第二章 荠菜与拟南芥抗冻性初步研究 | 第21-25页 |
2.1 植物材料和试剂 | 第22页 |
2.2 实验方法 | 第22页 |
2.2.1 野生型荠菜与拟南芥种植 | 第22页 |
2.2.2 冷冻处理后植物形态的观察和存活率统计 | 第22页 |
2.3 实验结果和讨论 | 第22-25页 |
2.3.1 冷冻处理后荠菜与拟南芥形态观察 | 第22-24页 |
2.3.2 冷冻处理后荠菜与拟南芥幼苗存活率比较 | 第24-25页 |
第三章 荠菜CbCOR15a和CbCOR15b启动子的克隆和活性分析 | 第25-63页 |
3.1 材料与试剂 | 第25-28页 |
3.1.1 材料 | 第25页 |
3.1.2 试剂 | 第25-27页 |
3.1.3 设备和仪器 | 第27-28页 |
3.2 实验方法 | 第28-42页 |
3.2.1 荠菜冷响应基因CbCORl5a和CbCOR15b启动子的克隆 | 第28-33页 |
3.2.2 启动子植物表达载体的构建 | 第33-39页 |
3.2.3 浸花法转化拟南芥以及阳性转化苗的筛选 | 第39页 |
3.2.4 AtCOR15aP,AtCOR15bP与CbCOR15aP,CbCOR15bP冷诱导表达特性的比较分析 | 第39-42页 |
3.2.5 荠菜冷响应启动子CbCOR15aP和CbCOR15bP冷响应核心元件的分析 | 第42页 |
3.3 实验结果和讨论 | 第42-63页 |
3.3.1 荠菜冷响应基因CbCOR15a和CbCOR15b启动子的克隆 | 第42-49页 |
3.3.2 植物表达载体的构建 | 第49-56页 |
3.3.3 转基因拟南芥阳性苗的筛选 | 第56-59页 |
3.3.4 AtCOR15aP,AtCOR15bP与CbCOR15aP,CbCOR15bP冷处理下表达特性的比较分析 | 第59-61页 |
3.3.5 荠菜冷响应启动子CbCOR15aP和CbCOR15bP冷响应核心元件的分析 | 第61-63页 |
第四章 荠菜CbCOR15b抗冻功能分析以及蛋白亚细胞定位分析 | 第63-81页 |
4.1 实验材料和试剂 | 第63-64页 |
4.1.1 实验材料 | 第63页 |
4.1.2 实验试剂 | 第63-64页 |
4.2 实验方法 | 第64-70页 |
4.2.1 烟草转化载体的构建 | 第64页 |
4.2.2 CbCOR15aP::GUS,CbCOR15bP::GUS和35S::CbCOR15b重组质粒转化烟草永久表达 | 第64-66页 |
4.2.3 启动子活性的检测 | 第66-68页 |
4.2.4 荠菜CbCOR15b蛋白在烟草叶肉细胞中亚细胞定位分析 | 第68-69页 |
4.2.5 荠菜CbCOR15b蛋白在洋葱表皮细胞中亚细胞定位分析 | 第69页 |
4.2.6 转荠菜冷响应基因CbCOR15b烟草抗冻能力分析 | 第69-70页 |
4.3 实验结果 | 第70-81页 |
4.3.1 植物转化载体的构建 | 第70-72页 |
4.3.2 转基因烟草植株的获得 | 第72-74页 |
4.3.3 CbCOR15aP和CbCOR15bP启动子活性的检测 | 第74-77页 |
4.3.4 CbCOR15b亚细胞定位研究 | 第77-78页 |
4.3.5 转CbCOR15b烟草抗冻性分析 | 第78-81页 |
第五章 总结与展望 | 第81-84页 |
5.1 CbCOR15基因启动子分析和CbCOR15b基因功能分析研究总结 | 第81-82页 |
5.1.1 CbCOR15aP和CbCOR15bP的克隆和分析 | 第81-82页 |
5.1.2 CbCOR15b抗冻功能分析 | 第82页 |
5.2 展望 | 第82-84页 |
5.2.1 启动子活性的进一步分析 | 第82页 |
5.2.2 CBF途径关键基因共转化提高转基因植株抗冻性 | 第82-84页 |
参考文献 | 第84-92页 |
攻读硕士学位期间发表的论文及申请的专利目录 | 第92-93页 |
致谢 | 第93-94页 |