| 致谢 | 第7-8页 |
| 摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10-11页 |
| 缩略词表 | 第12-15页 |
| 1 文献综述 | 第15-33页 |
| 1.1 引言 | 第15页 |
| 1.2 油菜再生体系研究进展 | 第15-19页 |
| 1.2.1 外植体的选择对油菜再生体系的影响 | 第16-17页 |
| 1.2.2 基因型的差异对油菜再生体系的影响 | 第17页 |
| 1.2.3 培养基类型对油菜再生的影响 | 第17-19页 |
| 1.3 油菜遗传转化体系研究进展 | 第19-23页 |
| 1.3.1 油菜的遗传转化方法 | 第19-21页 |
| 1.3.1.1 生物介导的遗传转化方法 | 第19-20页 |
| 1.3.1.2 物理化学介质介导的遗传转化方法 | 第20-21页 |
| 1.3.2 外植体的预培养 | 第21页 |
| 1.3.3 农杆菌的侵染时间、浓度和共培养 | 第21-22页 |
| 1.3.4 抗生素的筛选浓度 | 第22-23页 |
| 1.4 油菜再生和遗传转化过程中遇到的问题及解决方法 | 第23-25页 |
| 1.4.1 外植体组织褐化 | 第23-24页 |
| 1.4.2 外植体组织玻璃化 | 第24-25页 |
| 1.5 转基因在油菜育种中的应用 | 第25-29页 |
| 1.5.1 抗除草剂 | 第25-26页 |
| 1.5.2 抗病虫害 | 第26-27页 |
| 1.5.3 提高品质、改变农艺性状及工业用途 | 第27-28页 |
| 1.5.4 育性与自交不亲和性的转变 | 第28-29页 |
| 1.6 转基因作物的安全问题 | 第29-31页 |
| 1.7 选题的目的意义 | 第31-33页 |
| 2 油菜子叶柄外植体高效再生体系的建立 | 第33-46页 |
| 2.1 前言 | 第33-34页 |
| 2.2 材料与方法 | 第34-37页 |
| 2.2.1 试验材料 | 第34页 |
| 2.2.2 无菌外植体子叶柄的准备和接种 | 第34页 |
| 2.2.3 培养基 | 第34-35页 |
| 2.2.4 不同激素类型和浓度对子叶外植体的影响 | 第35页 |
| 2.2.5 油菜不同苗龄对子叶外植体再生的影响 | 第35-36页 |
| 2.2.6 不同浓度和配比的激素对油菜子叶愈伤组织诱导的影响 | 第36页 |
| 2.2.7 不同浓度NAA和Kan对油菜再生植株生根的影响 | 第36-37页 |
| 2.2.8 再生植株的生根和移栽 | 第37页 |
| 2.2.9 数据分析 | 第37页 |
| 2.3 结果与分析 | 第37-43页 |
| 2.3.1 不同激素类型和浓度对子叶不定芽的影响 | 第37-40页 |
| 2.3.2 油菜不同苗龄和品种对子叶不定芽分化的影响 | 第40-41页 |
| 2.3.3 不同浓度和配比的激素对油菜子叶柄愈伤组织诱导的影响 | 第41-42页 |
| 2.3.4 不同浓度NAA和Kan对油菜再生植株生根的影响 | 第42-43页 |
| 2.4 讨论 | 第43-46页 |
| 2.4.1 不同激素类型和浓度对子叶的影响 | 第43-44页 |
| 2.4.2 油菜不同苗龄和品种对子叶不定芽分化率的影响 | 第44-45页 |
| 2.4.3 不同浓度和配比的激素对油菜子叶柄愈伤组织诱导的影响 | 第45页 |
| 2.4.4 不同浓度NAA和Kan对油菜再生植株生根的影响 | 第45-46页 |
| 3 油菜子叶柄外植体遗传转化体系的建立 | 第46-67页 |
| 3.1 前言 | 第46-47页 |
| 3.2 材料与方法 | 第47-54页 |
| 3.2.1 试验材料、菌种与质粒 | 第47-48页 |
| 3.2.2 试验试剂及培养基 | 第48页 |
| 3.2.3 含目的基因的农杆菌菌株的获得 | 第48-50页 |
| 3.2.3.1 EHA105和LBA4404感受态细胞的制备 | 第48-49页 |
| 3.2.3.2 质粒的转化 | 第49页 |
| 3.2.3.3 质粒DNA的小量提取 | 第49页 |
| 3.2.3.4 农杆菌阳性克隆的鉴定 | 第49-50页 |
| 3.2.3.5 保存鉴定后的阳性克隆 | 第50页 |
| 3.2.4 抑菌剂的抑菌效果比较 | 第50-51页 |
| 3.2.5 农杆菌侵染时间和浓度对油菜子叶柄的影响 | 第51-52页 |
| 3.2.6 卡那霉素本底抗性检测 | 第52页 |
| 3.2.7 转基因植株检测 | 第52-53页 |
| 3.2.7.1 再生植株DNA提取 | 第52-53页 |
| 3.2.7.2 转基因植株PCR检测 | 第53页 |
| 3.2.8 再生植株的生根、移栽和春化 | 第53-54页 |
| 3.2.9 数据分析 | 第54页 |
| 3.3 结果分析 | 第54-63页 |
| 3.3.1 目的基因的检测 | 第54-55页 |
| 3.3.1.1 大肠杆菌DH5α阳性克隆鉴定 | 第54页 |
| 3.3.1.2 农杆菌EHA105与LBA4404阳性克隆鉴定 | 第54-55页 |
| 3.3.2 抗生素的抑菌效果比较 | 第55-56页 |
| 3.3.3 农杆菌侵染时间和浓度对油菜子叶柄的影响 | 第56-59页 |
| 3.3.4 卡那霉素本底抗性检测 | 第59-61页 |
| 3.3.5 转基因植株的初步鉴定 | 第61-63页 |
| 3.4 讨论 | 第63-67页 |
| 3.4.1 抗生素的抑菌效果比较 | 第63-64页 |
| 3.4.2 农杆菌侵染时间和浓度对油菜子叶柄的影响 | 第64-65页 |
| 3.4.3 卡那霉素本底抗性检测 | 第65-67页 |
| 4 主要结论和展望 | 第67-69页 |
| 5 参考文献 | 第69-78页 |
