甘蓝型油菜玉米黄素环氧酶基因（BnZEP）的克隆与表达分析
| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-11页 |
| 1 文献综述 | 第11-24页 |
| ·类胡萝卜素生物合成途径 | 第12-14页 |
| ·类胡萝卜素生物合成途径中的主要酶及其基因 | 第14-17页 |
| ·类胡萝卜素合成酶基因(GGPS和PSY) | 第14-15页 |
| ·类胡萝卜素去饱和酶基因(PDS和ZDS) | 第15-16页 |
| ·末端环化酶基因(LYCB和LYCE) | 第16页 |
| ·涉及叶黄素合成的酶基因 | 第16-17页 |
| ·植物类胡萝卜素基因工程应用 | 第17-20页 |
| ·利用类胡萝卜素基因工程提高作物营养价值 | 第17-19页 |
| ·利用类胡萝卜素基因工程改变花卉的颜色 | 第19-20页 |
| ·玉米黄素环氧酶及其基因 | 第20-21页 |
| ·本研究的目的与意义 | 第21-22页 |
| ·技术路线 | 第22-24页 |
| ·BnZEP基因保守序列的获得 | 第22-23页 |
| ·BnZEP基因全长序列的获得及分析 | 第23-24页 |
| 2 材料与方法 | 第24-37页 |
| ·实验材料及试剂配制 | 第24-26页 |
| ·植物材料 | 第24页 |
| ·菌株和质粒 | 第24页 |
| ·引物合成与测序 | 第24页 |
| ·试剂及培养基配制 | 第24-25页 |
| ·主要实验器材 | 第25-26页 |
| ·DNA和RNA提取及检测 | 第26-28页 |
| ·油菜DNA提取(CTAB法) | 第26-27页 |
| ·油菜花瓣总RNA提取(Trizol法) | 第27页 |
| ·核酸质量及浓度测定 | 第27-28页 |
| ·RNA反转录 | 第28页 |
| ·中间片段扩增 | 第28-32页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞DH5α制备(CaC12法) | 第28-29页 |
| ·简并引物设计 | 第29页 |
| ·中间片段扩增体系及反应程序 | 第29-30页 |
| ·PCR产物的回收与纯化 | 第30页 |
| ·PCR产物连接 | 第30-31页 |
| ·重组质粒提取及检测 | 第31-32页 |
| ·RACE扩增两端序列 | 第32-34页 |
| ·RACE引物设计 | 第32-33页 |
| ·mRNA反转录 | 第33-34页 |
| ·5RACE扩增 | 第34页 |
| ·3RACE扩增 | 第34页 |
| ·cDNA和DNA全长扩增 | 第34-36页 |
| ·半定量PCR检测 | 第36页 |
| ·生物信息学分析 | 第36-37页 |
| 3 结果与分析 | 第37-49页 |
| ·油菜花瓣总RNA提取与分析 | 第37页 |
| ·BnZEP基因保守序列的扩增与分析 | 第37-38页 |
| ·两端序列的扩增与分析 | 第38-39页 |
| ·BnZEP基因半定量PCR分析 | 第39-40页 |
| ·BnZEP全长cDNA及蛋白分析 | 第40-48页 |
| ·BnZEP全长cDNA分析 | 第40-42页 |
| ·一级结构分析 | 第42页 |
| ·二级结构预测 | 第42-43页 |
| ·三级结构预测 | 第43页 |
| ·序列比对分析 | 第43-47页 |
| ·系统进化树分析 | 第47-48页 |
| ·BnZEP全长DNA分析 | 第48-49页 |
| 4 讨论 | 第49-54页 |
| ·油菜花瓣总RNA提取 | 第49-50页 |
| ·RACE技术在试验中的应用 | 第50-51页 |
| ·测序结果及序列信息 | 第51-52页 |
| ·BnZEP与拟南芥ZEP基因相关信息比较 | 第52页 |
| ·半定量PCR与BnZEP基因的可能功能 | 第52-54页 |
| 参考文献 | 第54-58页 |
| 致谢 | 第58-59页 |
| 附表(DNA全长序列) | 第59-60页 |
