| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 第一章 引言 | 第12-30页 |
| 第一节 泛素蛋白及蛋白酶体降解途径 | 第12-16页 |
| 1.1.1 泛素Ubiquitin | 第12-13页 |
| 1.1.2 泛素酶Ubiquitin enzyme | 第13-15页 |
| 1.1.3 蛋白泛素化修饰的形式 | 第15页 |
| 1.1.4 蛋白酶体（Proteasome） | 第15-16页 |
| 1.1.5 泛素蛋白酶体降解途径与癌症的关系 | 第16页 |
| 第二节 氧与生理及病理的关系 | 第16-22页 |
| 1.2.1 氧与进化的关系 | 第16-17页 |
| 1.2.2 低氧应激 | 第17页 |
| 1.2.3 低氧与肿瘤 | 第17-18页 |
| 1.2.4 低氧诱导因子HIF（Hypoxia inducible factor） | 第18-19页 |
| 1.2.5 低氧诱导因子的调节 | 第19-20页 |
| 1.2.6 泛素连接酶SIAH (Seven In Absentia Homolog) | 第20页 |
| 1.2.7 SIAH家族蛋白的结构与功能 | 第20-21页 |
| 1.2.8 泛素连接酶SIAH家族与肿瘤 | 第21-22页 |
| 第三节 Hippo信号通路概述 | 第22-29页 |
| 1.3.1 Hippo信号通路的发现 | 第22页 |
| 1.3.2 Hippo信号通路下游的效应分子 | 第22-23页 |
| 1.3.3 YAP/TAZ活性的调控 | 第23-24页 |
| 1.3.4 细胞极性以及细胞黏着对于Hippo信号通路的调控 | 第24-25页 |
| 1.3.5 细胞接触对于Hippo信号通路的调控 | 第25页 |
| 1.3.6 生长因子对于Hippo信号通路的调控 | 第25-26页 |
| 1.3.7 细胞代谢调控Hippo信号通路 | 第26页 |
| 1.3.8 Hippo信号通路的负反馈调节 | 第26-27页 |
| 1.3.9 Hippo信号通路调控器官大小以及组织稳态中的作用 | 第27-28页 |
| 1.3.10 Hippo信号通路在肿瘤中的作用 | 第28-29页 |
| 第四节 本论文的研究目的及意义 | 第29-30页 |
| 第二章 材料与方法 | 第30-40页 |
| 第一节 实验材料 | 第30-34页 |
| 2.1.1 表达菌株 | 第30页 |
| 2.1.2 细胞系 | 第30页 |
| 2.1.3 表达质粒 | 第30-32页 |
| 2.1.4 抗体信息及应用 | 第32-33页 |
| 2.1.5 主要试剂 | 第33页 |
| 2.1.6 常用溶液试剂配方 | 第33-34页 |
| 第二节 试验方法 | 第34-40页 |
| 2.2.1 细胞培养与转染 | 第34页 |
| 2.2.2 免疫荧光 | 第34页 |
| 2.2.3 Western Blotting | 第34-35页 |
| 2.2.4 免疫共沉淀 | 第35页 |
| 2.2.5 免疫沉淀SIAH2结合蛋白与质谱检测 | 第35页 |
| 2.2.6 染色质免疫共沉淀 | 第35-36页 |
| 2.2.7 免疫荧光 | 第36页 |
| 2.2.8 HRE荧光报告基因检测 | 第36页 |
| 2.2.9 GST-Pulldown检测 | 第36页 |
| 2.2.10 LATS2体内泛素化检测 | 第36-37页 |
| 2.2.11 蛋白相对半衰期的检测 | 第37页 |
| 2.2.12 慢病毒包装及感染 | 第37-38页 |
| 2.2.13 RNA的提取和实时定量PCR | 第38页 |
| 2.2.14 细胞增殖及活性检测 | 第38-39页 |
| 2.2.15 克隆形成 | 第39页 |
| 2.2.16 流式细胞仪检测 | 第39页 |
| 2.2.17 裸鼠成瘤实验 | 第39页 |
| 2.2.18 肿瘤样本及组化 | 第39页 |
| 2.2.19 统计及可重复性 | 第39-40页 |
| 第三章 实验结果 | 第40-80页 |
| 第一节 SIAH2结合蛋白的检测 | 第40页 |
| 第二节 SIAH2与LATS2直接结合 | 第40-43页 |
| 第三节 SIAH2能够促进LATS2的蛋白酶体途径降解 | 第43-46页 |
| 第四节 SIAH2能够促进LATS2 K670/K672位点上的泛素化 | 第46-48页 |
| 第五节 SIAH2能够降低YAP127位磷酸化并促进YAP的核转位 | 第48-49页 |
| 第六节 SIAH1不参与LATS的调控 | 第49-50页 |
| 第七节 低氧通过SIAH2调控Hippo信号通路 | 第50-52页 |
| 第八节 SIAH2促进肿瘤生长 | 第52-54页 |
| 第九节 SIAH2与LATS2在乳腺组织中成负相关性 | 第54-56页 |
| 第十节 低氧介导TGF-β 的分泌增多通过Zyxin激活YAP | 第56-59页 |
| 第十一节 Zyxin缺失能够稳定LATS2以及激活Hippo信号通路 | 第59-60页 |
| 第十二节 Zyxin介导了LATS2的泛素化及降解 | 第60-62页 |
| 第十三节 Zyxin与SIAH2-LATS2形成三元复合物 | 第62-66页 |
| 第十四节 Zyxin参与细胞迁移以及肿瘤生长 | 第66-69页 |
| 第十五节 Zyxin表达与肿瘤恶性程度具有正相关性 | 第69-72页 |
| 第十六节 YAP参与低氧条件下稳定HIF1α | 第72-77页 |
| 第十七节 YAP与HIF1α 结合抑制其降解 | 第77-80页 |
| 第四章 讨论 | 第80-83页 |
| 第五章 小结 | 第83-84页 |
| 参考文献 | 第84-93页 |
| 致谢 | 第93-94页 |
| 个人简历、在学期间发表的学术论文与研究成果 | 第94页 |
