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hOGG1基因多态性与糖尿病患者冠脉病变关系及其在mtDNA过表达对高糖诱导的VECs氧化应激修复的研究

摘要第3-8页
ABSTRACT第8-13页
中英文缩略词对照表第17-19页
引言第19-25页
    1.1 VECs与AS第19页
    1.2 OS与AS第19-20页
    1.3 OS与线粒体第20-21页
    1.4 氧化应激损伤修复与DNA自身修复基因——hOGG1基因第21-23页
    1.5 研究主要内容第23-25页
第一部分 hOGG1基因Ser326Cys位点多态性与糖尿病患者冠脉病变的对照研究第25-36页
    1 材料和方法第26-29页
        1.1 研究对象第26-29页
    2 统计学分析第29页
    3 结果第29-33页
        3.1 患者临床基本资料第29-31页
        3.2 患者 8-OHdG水平和hOGG1 mRNA表达水平的比较第31页
        3.3 患者临床因素与 8-OHdG水平之间多因素logistic回归分析第31-32页
        3.4 冠脉病变支数与hOGG1基因多态性之间的关系第32页
        3.5 冠脉病变复杂程度与hOGG1基因多态性之间的关系第32页
        3.6 Gensini评分和SYNTAX评分与hOGG1基因多态性之间的关系第32-33页
    4 讨论第33-35页
    5 小结第35-36页
第二部分 高糖诱导的HUVECs氧化应激损伤的体外研究第36-63页
    1 材料和方法第36-53页
        1.1 主要材料第36-39页
        1.2 实验方法第39-53页
    2 统计学分析第53页
    3 结果第53-59页
        3.1 倒置荧光显微镜下HUVECs形态学观察第53页
        3.2 彗星实验检测高糖对HUVECs的DNA损伤效应第53页
        3.3 HUVECs细胞内ROS、8-OHdG检测第53-58页
        3.4 高糖对HUVECs的mtDNA氧化损伤的影响第58页
        3.5 高糖对HUVECs的hOGG1 mRNA表达的影响第58-59页
    4 讨论第59-62页
    5 小结第62-63页
第三部分 线粒体hOGG1基因高表达对高血糖诱导的HUVECs氧化应激损伤修复的研究第63-108页
    实验一 腺病毒介导转染线粒体hOGG1基因过表达HUVECs的构建与鉴定第64-87页
        1 材料和方法第64-78页
            1.1 细胞系第64-65页
            1.2 主要仪器第65-66页
            1.3 主要溶液配制第66页
            1.4 实验方法第66-78页
        2 统计分析第78页
        3 结果第78-84页
            3.1 pcDNA3.1(+)-MTS-hOGG1质粒为模板进行PCR扩增第78-79页
            3.2 重组质粒pENTRTM3C-MTS-hOGG1双酶切及PCR鉴定第79页
            3.3 测序鉴定第79-81页
            3.4 PCR鉴定重组腺病毒pAd/CMV/V5-DEST-hOGG1第81-82页
            3.5 重组腺病毒pAd/CMV/V5-DEST-MTS-hOGG1病毒滴度测定第82-83页
            3.6 重组腺病毒介导MTS-hOGG1基因转染HUVECs效果第83-84页
        4 讨论第84-86页
        5.小结第86-87页
    实验二 线粒体hOGG1基因过表达对高血糖诱导的HUVECs氧化损伤及修复效应的研究第87-108页
        1 材料与方法第87-98页
            1.1 材料第87-89页
            1.2 实验方法第89-98页
        2 统计学处理第98页
        3 结果第98-104页
            3.1 HUVECs的细胞生物特性及存活率比较第98-99页
            3.2 彗星实验比较HUVECs细胞在高血糖诱导的DNA损伤反应第99-102页
            3.4 高糖诱导HUVECs氧化损伤导致的线粒体膜电位变化第102-104页
        4.讨论第104-107页
        5.小结第107-108页
全文结论第108-109页
问题与展望第109-110页
致谢第110-111页
参考文献第111-118页
攻读学位期间的研究成果第118-120页
附录第120-129页
综述第129-135页
    参考文献第133-135页

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