摘要 | 第3-8页 |
ABSTRACT | 第8-13页 |
中英文缩略词对照表 | 第17-19页 |
引言 | 第19-25页 |
1.1 VECs与AS | 第19页 |
1.2 OS与AS | 第19-20页 |
1.3 OS与线粒体 | 第20-21页 |
1.4 氧化应激损伤修复与DNA自身修复基因——hOGG1基因 | 第21-23页 |
1.5 研究主要内容 | 第23-25页 |
第一部分 hOGG1基因Ser326Cys位点多态性与糖尿病患者冠脉病变的对照研究 | 第25-36页 |
1 材料和方法 | 第26-29页 |
1.1 研究对象 | 第26-29页 |
2 统计学分析 | 第29页 |
3 结果 | 第29-33页 |
3.1 患者临床基本资料 | 第29-31页 |
3.2 患者 8-OHdG水平和hOGG1 mRNA表达水平的比较 | 第31页 |
3.3 患者临床因素与 8-OHdG水平之间多因素logistic回归分析 | 第31-32页 |
3.4 冠脉病变支数与hOGG1基因多态性之间的关系 | 第32页 |
3.5 冠脉病变复杂程度与hOGG1基因多态性之间的关系 | 第32页 |
3.6 Gensini评分和SYNTAX评分与hOGG1基因多态性之间的关系 | 第32-33页 |
4 讨论 | 第33-35页 |
5 小结 | 第35-36页 |
第二部分 高糖诱导的HUVECs氧化应激损伤的体外研究 | 第36-63页 |
1 材料和方法 | 第36-53页 |
1.1 主要材料 | 第36-39页 |
1.2 实验方法 | 第39-53页 |
2 统计学分析 | 第53页 |
3 结果 | 第53-59页 |
3.1 倒置荧光显微镜下HUVECs形态学观察 | 第53页 |
3.2 彗星实验检测高糖对HUVECs的DNA损伤效应 | 第53页 |
3.3 HUVECs细胞内ROS、8-OHdG检测 | 第53-58页 |
3.4 高糖对HUVECs的mtDNA氧化损伤的影响 | 第58页 |
3.5 高糖对HUVECs的hOGG1 mRNA表达的影响 | 第58-59页 |
4 讨论 | 第59-62页 |
5 小结 | 第62-63页 |
第三部分 线粒体hOGG1基因高表达对高血糖诱导的HUVECs氧化应激损伤修复的研究 | 第63-108页 |
实验一 腺病毒介导转染线粒体hOGG1基因过表达HUVECs的构建与鉴定 | 第64-87页 |
1 材料和方法 | 第64-78页 |
1.1 细胞系 | 第64-65页 |
1.2 主要仪器 | 第65-66页 |
1.3 主要溶液配制 | 第66页 |
1.4 实验方法 | 第66-78页 |
2 统计分析 | 第78页 |
3 结果 | 第78-84页 |
3.1 pcDNA3.1(+)-MTS-hOGG1质粒为模板进行PCR扩增 | 第78-79页 |
3.2 重组质粒pENTRTM3C-MTS-hOGG1双酶切及PCR鉴定 | 第79页 |
3.3 测序鉴定 | 第79-81页 |
3.4 PCR鉴定重组腺病毒pAd/CMV/V5-DEST-hOGG1 | 第81-82页 |
3.5 重组腺病毒pAd/CMV/V5-DEST-MTS-hOGG1病毒滴度测定 | 第82-83页 |
3.6 重组腺病毒介导MTS-hOGG1基因转染HUVECs效果 | 第83-84页 |
4 讨论 | 第84-86页 |
5.小结 | 第86-87页 |
实验二 线粒体hOGG1基因过表达对高血糖诱导的HUVECs氧化损伤及修复效应的研究 | 第87-108页 |
1 材料与方法 | 第87-98页 |
1.1 材料 | 第87-89页 |
1.2 实验方法 | 第89-98页 |
2 统计学处理 | 第98页 |
3 结果 | 第98-104页 |
3.1 HUVECs的细胞生物特性及存活率比较 | 第98-99页 |
3.2 彗星实验比较HUVECs细胞在高血糖诱导的DNA损伤反应 | 第99-102页 |
3.4 高糖诱导HUVECs氧化损伤导致的线粒体膜电位变化 | 第102-104页 |
4.讨论 | 第104-107页 |
5.小结 | 第107-108页 |
全文结论 | 第108-109页 |
问题与展望 | 第109-110页 |
致谢 | 第110-111页 |
参考文献 | 第111-118页 |
攻读学位期间的研究成果 | 第118-120页 |
附录 | 第120-129页 |
综述 | 第129-135页 |
参考文献 | 第133-135页 |