摘要 | 第3-4页 |
abstract | 第4页 |
主要符号对照表 | 第8-10页 |
第1章 前言 | 第10-31页 |
1.1 蛋白激酶 | 第10-13页 |
1.1.1 概述 | 第10-11页 |
1.1.2 蛋白质激酶的结构 | 第11-12页 |
1.1.3 蛋白质激酶催化机制 | 第12-13页 |
1.2 AMPK蛋白激酶家族简介 | 第13-20页 |
1.2.1 AMPK蛋白激酶 | 第15-17页 |
1.2.2 MARK蛋白激酶 | 第17-20页 |
1.3 SAD-B激酶简介 | 第20-22页 |
1.3.1 SAD激酶的发现 | 第20-21页 |
1.3.2 酵母中SAD激酶的发现 | 第21页 |
1.3.3 SAD激酶的组成 | 第21-22页 |
1.4 SAD激酶的功能 | 第22-25页 |
1.4.1 SAD激酶的神经元发育 | 第22-24页 |
1.4.2 SAD-B激酶与细胞周期调控 | 第24-25页 |
1.4.3 SAD-A激酶与能量代谢 | 第25页 |
1.5 SAD激酶的调控 | 第25-29页 |
1.6 本文的研究内容与研究目的 | 第29-31页 |
第2章 实验材料与方法 | 第31-44页 |
2.1 实验材料与仪器 | 第31-32页 |
2.1.1 分子克隆 | 第31页 |
2.1.2 蛋白质的表达和纯化 | 第31页 |
2.1.3 蛋白质性质分析与结晶 | 第31-32页 |
2.2 实验仪器 | 第32-33页 |
2.3 实验方法 | 第33-44页 |
2.3.1 分子克隆 | 第33-35页 |
2.3.2 蛋白质的表达 | 第35-36页 |
2.3.3 蛋白质的纯化 | 第36-38页 |
2.3.4 Western blot 实验 | 第38页 |
2.3.5 激酶活力测定 | 第38-41页 |
2.3.6 蛋白质结构测定 | 第41-44页 |
第3章 SAD-B KD-UBA生化性质的研究 | 第44-51页 |
3.1 本章引言 | 第44页 |
3.2 本章方法 | 第44-45页 |
3.2.1 蛋白的表达与纯化 | 第44页 |
3.2.2 激酶活力的测定 | 第44页 |
3.2.3 Western blot检测磷酸化程度 | 第44-45页 |
3.3 实验结果与分析 | 第45-49页 |
3.3.1 相关蛋白质的制备 | 第45-47页 |
3.3.2 LKB1对SAD-B KD-UBA磷酸化激活的检测 | 第47-48页 |
3.3.3 SAD-B KD-UBA活力的检测 | 第48-49页 |
3.4 本章总结 | 第49-51页 |
第4章 SAD-B AIS-KA1晶体学的研究 | 第51-63页 |
4.1 本章引言 | 第51页 |
4.2 本章方法 | 第51页 |
4.2.1 蛋白的表达与纯化 | 第51页 |
4.2.2 蛋白晶体学的研究 | 第51页 |
4.3 实验结果与分析 | 第51-62页 |
4.3.1 相关蛋白的表达与纯化 | 第51-54页 |
4.3.2 鼠源SAD-B AIS-KA1晶体的筛选和优化 | 第54-56页 |
4.3.3 鼠源SAD-B AIS-KA1晶体结构解析 | 第56-58页 |
4.3.4 鼠源SAD-B AIS-KA1晶体结构分析 | 第58-62页 |
4.4 本章总结 | 第62-63页 |
第5章 AIS-KA1抑制SAD激酶的保守性 | 第63-71页 |
5.1 本章引言 | 第63页 |
5.2 本章方法 | 第63页 |
5.2.1 C-端片段蛋白的表达与纯化 | 第63页 |
5.2.2 激酶活力测定 | 第63页 |
5.3 实验结果与分析 | 第63-69页 |
5.3.1 AIS-KA1抑制SAD-B KD-UBA的活力 | 第63-68页 |
5.3.2 AIS-KA1不影响LKB1对于KU-UBA的磷酸化 | 第68-69页 |
5.4 小结 | 第69-71页 |
第6章 总结与展望 | 第71-74页 |
6.1 论文总结 | 第71页 |
6.2 论文展望 | 第71-74页 |
6.2.1 SAD-B调控机制的展望 | 第72页 |
6.2.2 对SAD-B激酶激活过程的思考 | 第72-73页 |
6.2.3 对SAD激酶膜定位调控的探讨 | 第73-74页 |
参考文献 | 第74-78页 |
致谢 | 第78-82页 |
个人简历、在学期间发表的学术论文与研究成果 | 第82页 |