| 摘要 | 第6-7页 |
| Abstract | 第7页 |
| 缩略词表 | 第8-9页 |
| 1 前言 | 第9-19页 |
| 1.1 课题的提出 | 第9-10页 |
| 1.2 文献综述 | 第10-18页 |
| 1.2.1 马铃薯主要病毒病 | 第10-11页 |
| 1.2.2 马铃薯S病毒研究进展 | 第11-12页 |
| 1.2.3 PVS多样性及分类依据 | 第12页 |
| 1.2.4 PVS基因组结构 | 第12-14页 |
| 1.2.5 马铃薯PVS抗性研究 | 第14页 |
| 1.2.6 马铃薯病毒株系的鉴定方法 | 第14-18页 |
| 1.2.6.1 生物学方法 | 第14-15页 |
| 1.2.6.2 血清学方法 | 第15-16页 |
| 1.2.6.3 电镜技术 | 第16页 |
| 1.2.6.4 分子生物学方法 | 第16-17页 |
| 1.2.6.5 第二代测序检测法 | 第17-18页 |
| 1.3 研究目的、内容与意义 | 第18-19页 |
| 2 材料与方法 | 第19-24页 |
| 2.1 实验材料 | 第19-20页 |
| 2.1.1 材料保存 | 第19页 |
| 2.1.2 试剂及仪器 | 第19-20页 |
| 2.1.2.1 主要试剂及培养基 | 第19页 |
| 2.1.2.2 主要仪器及软件 | 第19-20页 |
| 2.2 实验方法 | 第20-24页 |
| 2.2.1 核酸抽提及cDNA的制备 | 第20页 |
| 2.2.2 PVS分型检测体系的建立 | 第20-22页 |
| 2.2.2.1 引物设计及筛选 | 第20-21页 |
| 2.2.2.2 PCR分型检测体系及反应程序 | 第21页 |
| 2.2.2.3 PCR产物回收并直接测序 | 第21-22页 |
| 2.2.3 PVS全长基因组克隆 | 第22-23页 |
| 2.2.3.1 引物设计及筛选 | 第22页 |
| 2.2.3.2 长片段PCR扩增体系及反应程序 | 第22-23页 |
| 2.2.3.3 片段回收克隆及测序分析 | 第23页 |
| 2.2.4 PVS指示植物机械接种与检测 | 第23-24页 |
| 2.2.4.1 指示植物机械接种与症状观察 | 第23页 |
| 2.2.4.2 DAS-ELISA检测、两重PCR检测 | 第23-24页 |
| 3 结果与分析 | 第24-50页 |
| 3.1 田间马铃薯感病情况 | 第24页 |
| 3.2 PVS株系分型鉴定 | 第24-30页 |
| 3.2.1 PVS株系分型引物设计 | 第24-27页 |
| 3.2.2 PVS株系分型体系的验证 | 第27-28页 |
| 3.2.3 扩增子测序验证 | 第28-30页 |
| 3.3 PVS湖北分离物的克隆 | 第30-40页 |
| 3.3.1 PVS HB7和HB24的克隆与测序 | 第30-32页 |
| 3.3.2 PVS HB7和HB24的基因组结构及序列同源性比对 | 第32-34页 |
| 3.3.3 PVS HB7和HB24与其它全长序列的同源性比对 | 第34-37页 |
| 3.3.4 PVS HB7和HB24的系统进化分析 | 第37-40页 |
| 3.4 PVS湖北分离物致病性分析 | 第40-45页 |
| 3.4.1 PVS湖北分离物对指示寄主的致病性 | 第40-44页 |
| 3.4.2 PVS分离物接种烟草及马铃薯 | 第44-45页 |
| 3.5 中国部分马铃薯产区常见病毒发生情况调查 | 第45-50页 |
| 3.5.1 中国部分马铃薯产区常见6种病毒检测 | 第45-46页 |
| 3.5.2 中国部分马铃薯产区PVS多样性研究 | 第46-50页 |
| 4 讨论 | 第50-54页 |
| 4.1 PVS株系分型鉴别方法的发展 | 第50页 |
| 4.2 PVS~A株系特征及重要性 | 第50-51页 |
| 4.3 中国部分马铃薯产区病毒发生情况调查 | 第51-52页 |
| 4.4 展望 | 第52-54页 |
| 参考文献 | 第54-63页 |
| 研究生期间发表文章 | 第63-64页 |
| 致谢 | 第64页 |
