绵羊核移植技术的研究
| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-8页 |
| 1 引言 | 第8-21页 |
| ·克隆的概念 | 第8页 |
| ·核移植的历史概况 | 第8-18页 |
| ·哺乳类动物胚胎细胞核移植研究进展 | 第10-11页 |
| ·哺乳动物类胚胎干细胞核移植研究进展 | 第11-13页 |
| ·哺乳类动物体细胞核移植研究进展 | 第13-14页 |
| ·哺乳类异种动物克隆研究进展 | 第14-15页 |
| ·卵母细胞的来源 | 第15-18页 |
| ·卵母细胞级别的划分 | 第18-19页 |
| ·核移植技术方法 | 第19页 |
| ·孤雌激活的方法 | 第19页 |
| ·研究目的 | 第19-21页 |
| 实验研究 | 第21-33页 |
| 2 实验一绵羊皮肤成纤维细胞的分离和培养 | 第21-25页 |
| ·材料与方法 | 第21-22页 |
| ·实验药品与仪器 | 第21页 |
| ·实验试剂 | 第21-22页 |
| ·实验方法 | 第22-23页 |
| ·绵羊皮肤的采集和原代培养 | 第22页 |
| ·传代培养 | 第22页 |
| ·分离与纯化 | 第22页 |
| ·绵羊成纤维细胞的冷冻保存及解冻 | 第22-23页 |
| ·成纤维细胞生长曲线的绘制 | 第23页 |
| ·结果 | 第23-25页 |
| ·原代培养与继代培养 | 第23-24页 |
| ·绵羊皮肤成纤维细胞生长曲线 | 第24页 |
| ·成纤维细胞染色体数目 | 第24-25页 |
| 3 实验二绵羊卵母细胞的体外成熟及孤雌激活的研究 | 第25-29页 |
| ·材料 | 第25页 |
| ·实验方法 | 第25-26页 |
| ·卵丘卵母细胞复合体的获取 | 第25页 |
| ·COCS的体外成熟培养 | 第25页 |
| ·成熟卵的检查 | 第25-26页 |
| ·卵母细胞的孤雌激活及发育培养 | 第26页 |
| ·电激活 | 第26页 |
| ·化学激活 | 第26页 |
| ·离子霉素激活法 | 第26页 |
| ·乙醇激活法 | 第26页 |
| ·结果 | 第26-29页 |
| ·卵母细胞体外成熟时间对成熟率和去核率的影响 | 第26-27页 |
| ·两种成熟液中卵母细胞排出第一极体情况 | 第27页 |
| ·不同激活电压对绵羊卵母细胞孤雌激活的结果 | 第27-28页 |
| ·不同激活方法处理绵羊卵母细胞的孤雌激活结果 | 第28-29页 |
| 4 实验三体细胞克隆绵羊的研究 | 第29-31页 |
| ·核供体的准备 | 第29页 |
| ·核移植 | 第29页 |
| ·融合 | 第29页 |
| ·重构胚的激活及体外培养 | 第29-30页 |
| ·受体羊的准备 | 第30页 |
| ·胚胎移植 | 第30页 |
| ·结果 | 第30-31页 |
| ·不同融合电压对核移植效率的影响 | 第30页 |
| ·胚胎移植的结果 | 第30-31页 |
| 5 讨论 | 第31-32页 |
| ·绵羊皮肤成纤维细胞的培养 | 第31页 |
| ·两种成熟体系对卵母细胞成熟的影响 | 第31页 |
| ·孤雌激活 | 第31-32页 |
| ·电激活 | 第31-32页 |
| ·化学激活 | 第32页 |
| ·融合电压对核移植效率的影响 | 第32页 |
| ·胚胎移植 | 第32页 |
| 6 结论 | 第32-33页 |
| 致谢 | 第33-34页 |
| 参考文献 | 第34-41页 |
| 附录 | 第41-43页 |
| 作者简介 | 第43页 |
