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绵羊核移植技术的研究

摘要第1-4页
Abstract第4-8页
1 引言第8-21页
   ·克隆的概念第8页
   ·核移植的历史概况第8-18页
     ·哺乳类动物胚胎细胞核移植研究进展第10-11页
     ·哺乳动物类胚胎干细胞核移植研究进展第11-13页
     ·哺乳类动物体细胞核移植研究进展第13-14页
     ·哺乳类异种动物克隆研究进展第14-15页
     ·卵母细胞的来源第15-18页
   ·卵母细胞级别的划分第18-19页
   ·核移植技术方法第19页
   ·孤雌激活的方法第19页
   ·研究目的第19-21页
实验研究第21-33页
 2 实验一绵羊皮肤成纤维细胞的分离和培养第21-25页
   ·材料与方法第21-22页
     ·实验药品与仪器第21页
     ·实验试剂第21-22页
   ·实验方法第22-23页
     ·绵羊皮肤的采集和原代培养第22页
     ·传代培养第22页
     ·分离与纯化第22页
     ·绵羊成纤维细胞的冷冻保存及解冻第22-23页
     ·成纤维细胞生长曲线的绘制第23页
   ·结果第23-25页
     ·原代培养与继代培养第23-24页
     ·绵羊皮肤成纤维细胞生长曲线第24页
     ·成纤维细胞染色体数目第24-25页
 3 实验二绵羊卵母细胞的体外成熟及孤雌激活的研究第25-29页
   ·材料第25页
   ·实验方法第25-26页
     ·卵丘卵母细胞复合体的获取第25页
     ·COCS的体外成熟培养第25页
     ·成熟卵的检查第25-26页
     ·卵母细胞的孤雌激活及发育培养第26页
       ·电激活第26页
       ·化学激活第26页
         ·离子霉素激活法第26页
         ·乙醇激活法第26页
   ·结果第26-29页
     ·卵母细胞体外成熟时间对成熟率和去核率的影响第26-27页
     ·两种成熟液中卵母细胞排出第一极体情况第27页
     ·不同激活电压对绵羊卵母细胞孤雌激活的结果第27-28页
     ·不同激活方法处理绵羊卵母细胞的孤雌激活结果第28-29页
 4 实验三体细胞克隆绵羊的研究第29-31页
   ·核供体的准备第29页
   ·核移植第29页
   ·融合第29页
   ·重构胚的激活及体外培养第29-30页
   ·受体羊的准备第30页
   ·胚胎移植第30页
   ·结果第30-31页
     ·不同融合电压对核移植效率的影响第30页
     ·胚胎移植的结果第30-31页
 5 讨论第31-32页
   ·绵羊皮肤成纤维细胞的培养第31页
   ·两种成熟体系对卵母细胞成熟的影响第31页
   ·孤雌激活第31-32页
     ·电激活第31-32页
     ·化学激活第32页
   ·融合电压对核移植效率的影响第32页
   ·胚胎移植第32页
 6 结论第32-33页
致谢第33-34页
 参考文献第34-41页
附录第41-43页
作者简介第43页

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