| 致谢 | 第8-9页 |
| 摘要 | 第9-11页 |
| Abstract | 第11-12页 |
| 第一章 文章综述 | 第16-30页 |
| 1 稻瘟病与稻瘟病菌 | 第16-19页 |
| 1.1 稻瘟病 | 第16-17页 |
| 1.2 稻瘟病菌的侵染循环 | 第17-19页 |
| 2 cAMP-PKA信号途径 | 第19-24页 |
| 2.1 酵母cAMP-PKA信号途径研究进展 | 第20-22页 |
| 2.2 稻瘟病菌cAMP-PKA信号途径研究进展 | 第22-24页 |
| 3 转录因子Flo8和LisH模体的研究进展 | 第24-27页 |
| 3.1 Flo8概况 | 第24-26页 |
| 3.2 LisH模体概况 | 第26-27页 |
| 4 本研究的目的与意义 | 第27-30页 |
| 第二章 材料与方法 | 第30-50页 |
| 1 实验材料 | 第30-34页 |
| 1.1 供试菌株 | 第30页 |
| 1.2 供试质粒载体 | 第30页 |
| 1.3 供试植物 | 第30页 |
| 1.4 供试试剂 | 第30-31页 |
| 1.5 供试抗生素 | 第31页 |
| 1.6 培养基及配方 | 第31-34页 |
| 2 实验方法 | 第34-50页 |
| 2.1 常规PCR反应 | 第34-35页 |
| 2.2 DNA操作 | 第35-39页 |
| 2.2.1 大肠杆菌质粒DNA的提取 | 第35-36页 |
| 2.2.2 快速小量抽提稻瘟病菌基因组DNA | 第36页 |
| 2.2.3 CTAB法大量抽提稻瘟病菌基因组DNA | 第36-37页 |
| 2.2.4 DNA的酶切 | 第37页 |
| 2.2.5 DNA的琼脂糖凝胶电泳 | 第37-38页 |
| 2.2.6 DNA的凝胶回收 | 第38页 |
| 2.2.7 片段DNA连接载体反应 | 第38-39页 |
| 2.2.8 质粒DNA的大肠杆菌感受态细胞转化 | 第39页 |
| 2.3 RNA操作 | 第39-40页 |
| 2.3.1 稻瘟病菌总RNA的提取 | 第39-40页 |
| 2.3.2 cDNA的合成 | 第40页 |
| 2.4 稻瘟病菌基因的敲除及互补 | 第40-43页 |
| 2.4.1 敲除策略及敲除载体的构建 | 第40-41页 |
| 2.4.2 互补策略及互补载体的构建 | 第41-42页 |
| 2.4.3 稻瘟病菌原生质体的制备及转化 | 第42-43页 |
| 2.5 稻瘟病菌基因组的Southern Blot(地高辛标记法) | 第43-46页 |
| 2.5.1 基因组的酶切、电泳及变性 | 第43页 |
| 2.5.2 转膜 | 第43-44页 |
| 2.5.3 DIG标记DNA探针及杂交液的准备 | 第44页 |
| 2.5.4 预杂交 | 第44-45页 |
| 2.5.5 杂交 | 第45页 |
| 2.5.6 印记膜的洗涤 | 第45页 |
| 2.5.7 免疫显色 | 第45-46页 |
| 2.6 蛋白操作 | 第46-50页 |
| 2.6.1 稻瘟病菌总蛋白的提取 | 第46页 |
| 2.6.2 Western Blot | 第46-48页 |
| 2.6.3 目标蛋白的亲和纯化 | 第48-50页 |
| 第三章 结果与分析 | 第50-63页 |
| 1 MoSom1不同剪切异构体的功能分析 | 第50-53页 |
| 2 MoSom1的PKA磷酸化位点功能分析 | 第53-58页 |
| 2.1 MoSom1 PKA磷酸化位点的生物信息学初步预测 | 第53-54页 |
| 2.2 预测位点缺失载体的构建 | 第54页 |
| 2.3 点缺失转化子的获得及表型分析 | 第54-56页 |
| 2.4 T151、S227和S228丙氨酸和谷氨酸替换载体的构建 | 第56页 |
| 2.5 MoSOM1~(T151A/E)、MoSOM1~(S227A/E)和MoSOM1~(S228A/E)替换转化子的获得及表型分析 | 第56-58页 |
| 3 稻瘟病菌含LisH模体蛋白编码基因的敲除 | 第58-61页 |
| 3.1 稻瘟病菌中含LisH模体蛋白编码基因的生物信息学分析 | 第58-59页 |
| 3.2 MGG_01665、MGG_04137和MGG_00753的敲除 | 第59页 |
| 3.3 MGG_06742和MGG_09369的敲除 | 第59-61页 |
| 4 MoSom1互作蛋白的初步筛选 | 第61-63页 |
| 第四章 全文总结与讨论 | 第63-66页 |
| 参考文献 | 第66-72页 |
| 附录1 | 第72-75页 |
| 附录2 | 第75页 |
