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假单胞菌CT25甲基黄嘌呤类物质降解途径研究及高耐咖啡因重组工程菌筛选

致谢第4-9页
摘要第9-11页
Abstract第11-12页
第一章 文献综述第13-27页
    1.1 前言第13-14页
    1.2 咖啡因对微生物的影响第14-15页
        1.2.1 咖啡因的抑菌作用及其机制第14-15页
        1.2.2 耐咖啡因微生物生存机制第15页
    1.3 微生物降解咖啡因速率及影响因素第15-17页
        1.3.1 微生物降解咖啡因的能力第15-16页
        1.3.2 影响咖啡因降解因素第16-17页
    1.4 微生物降解咖啡因的代谢途径第17-19页
        1.4.1 真菌降解咖啡因途径第18页
        1.4.2 细菌降解咖啡因途径第18-19页
    1.5 微生物降解咖啡因的酶类第19-22页
        1.5.1 氧化酶第20-21页
        1.5.2 N-脱甲基酶第21-22页
    1.6 微生物降解咖啡因相关基因第22-24页
        1.6.1 hpx基因簇第22-23页
        1.6.2 cdh和tmuM基因簇第23页
        1.6.3 Ndm基因簇第23-24页
    1.7 微生物降解咖啡因的应用第24-26页
        1.7.1 降低产品咖啡因含量第25页
        1.7.2 副产品的开发与利用第25页
        1.7.3 快速检测咖啡因法第25-26页
    1.8 研究目的和意义第26-27页
第二章 假单胞菌降解甲基黄嘌呤途径及其效率分析第27-39页
    2.1 前言第27页
    2.2 实验材料与方法第27-29页
        2.2.1 材料和设备第27-28页
        2.2.2 试剂和培养基配制第28页
        2.2.3 假单胞菌利用咖啡因特性分析第28-29页
        2.2.4 假单胞菌对不同甲基黄嘌呤利用速率和代谢途径分析第29页
        2.2.5 甲基黄嘌呤及其衍生物检测第29页
    2.3 结果与分析第29-37页
        2.3.1 假单胞菌生长曲线和降解咖啡因特性第30-31页
        2.3.2 假单胞菌对不同甲基黄嘌呤降解效率第31-35页
        2.3.3 假单胞菌利用不同甲基黄嘌呤的可能代谢途径第35-37页
    2.4 讨论与小结第37-39页
第三章 假单胞菌降解咖啡因相关酶分析第39-48页
    3.1 前言第39页
    3.2 实验材料与方法第39-42页
        3.2.1 材料第39-40页
        3.2.2 培养基配制第40页
        3.2.3 菌粗酶提取与酶活性鉴定第40-41页
        3.2.4 不同氮源条件下菌体蛋白组分差异分析第41-42页
    3.3 结果与分析第42-46页
        3.3.1 咖啡因代谢相关酶细胞定位第42-43页
        3.3.2 胞内酶对不同甲基黄嘌呤类化合物的降解效率第43-45页
        3.3.3 咖啡因代谢相关蛋白特性第45-46页
    3.4 小结与讨论第46-48页
第四章 耐咖啡因重组子筛选及其生物信息学分析第48-61页
    4.1 前言第48页
    4.2 实验材料与方法第48-49页
        4.2.1 材料和设备第48-49页
        4.2.2 耐咖啡因重组子筛选第49页
        4.2.3 初筛重组子插入序列分析第49页
        4.2.4 初筛重组子耐咖啡因效果分析第49页
    4.3 结果与分析第49-60页
        4.3.1 耐咖啡因重组子第49-59页
        4.3.2 初筛重组子耐咖啡因能力评价第59-60页
    4.4 小结第60-61页
第五章 总结与展望第61-63页
    5.1 结论第61-62页
    5.2 前景与展望第62-63页
参考文献第63-72页
附录A 缩写词说明第72-73页
附录B 图表索引第73-74页

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