| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 第1章 绪论 | 第10-25页 |
| 1.1 生物传感器 | 第10-11页 |
| 1.1.1 生物传感器的工作原理 | 第10-11页 |
| 1.1.2 生物传感器的分类 | 第11页 |
| 1.2 光学生物传感器 | 第11-17页 |
| 1.2.1 紫外-可见光谱型生物传感器 | 第11-13页 |
| 1.2.2 荧光光学生物传感器 | 第13-17页 |
| 1.2.3 表面等离子共振(SPR)技术 | 第17页 |
| 1.2.4 表面增强拉曼散射(SERS)技术 | 第17页 |
| 1.3 核酸信号放大技术 | 第17-23页 |
| 1.3.1 酶辅助的核酸信号放大技术 | 第18-21页 |
| 1.3.2 无酶参与的核酸信号放大技术 | 第21-23页 |
| 1.4 本研究论文的工作内容 | 第23-25页 |
| 第2章 连接反应介导的支化杂交链反应原位成像检测单细胞中单分子mRNA突变 | 第25-42页 |
| 2.1 引言 | 第25-26页 |
| 2.2 实验部分 | 第26-30页 |
| 2.2.1 试剂及材料 | 第26-27页 |
| 2.2.2 连接酶介导的点突变识别的体外验证 | 第27页 |
| 2.2.3 bHCR的体外验证 | 第27-28页 |
| 2.2.4 凝胶电泳分析 | 第28页 |
| 2.2.5 原子力显微镜表征 | 第28页 |
| 2.2.6 细胞培养与细胞固定 | 第28页 |
| 2.2.7 基于ligation-bHCR FISH检测KRAS mRNA基因突变 | 第28-29页 |
| 2.2.8 ligation-bHCR FISH的控制和对照实验 | 第29-30页 |
| 2.2.9 共聚焦荧光成像分析 | 第30页 |
| 2.2.10 实时荧光定量RT-qPCR检测KRAS mRNA | 第30页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第30-40页 |
| 2.3.1 实验设计原理 | 第30-32页 |
| 2.3.2 Ligation-bHCR的可行性体外分析 | 第32-35页 |
| 2.3.3 基于ligation-bHCR原位成像检测mRNA突变的特异性验证 | 第35-36页 |
| 2.3.4 基于ligation-bHCR原位成像mRNA空间定位的验证 | 第36-38页 |
| 2.3.5 基于ligation-bHCR原位成像检测mRNA高灵敏性的验证 | 第38页 |
| 2.3.6 基于ligation-bHCR原位成像定量检测mRNA的考察 | 第38-40页 |
| 2.4 小结 | 第40-42页 |
| 第3章 支化杂交链反应原位荧光成像检测单细胞中单个microRNA分子 | 第42-53页 |
| 3.1 引言 | 第42-43页 |
| 3.2 实验部分 | 第43-47页 |
| 3.2.1 试剂及材料 | 第43-44页 |
| 3.2.2 bHCR的体外分析 | 第44页 |
| 3.2.3 琼脂糖凝胶电泳分析 | 第44页 |
| 3.2.4 原子力显微镜表征 | 第44-45页 |
| 3.2.5 细胞的培养及固定 | 第45页 |
| 3.2.6 bHCR原位成像检测microRNA | 第45-46页 |
| 3.2.7 荧光定量PCR检测miRNA-21 | 第46页 |
| 3.2.8 控制和对照实验 | 第46-47页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第47-52页 |
| 3.3.1 实验设计原理 | 第47页 |
| 3.3.2 实验原理的验证 | 第47-49页 |
| 3.3.3 bHCR-FISH原位成像检测肿瘤细胞中miRNA-21 | 第49-52页 |
| 3.4 小结 | 第52-53页 |
| 结论 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-67页 |
| 附录A 攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第67-68页 |
| 致谢 | 第68页 |
