| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-12页 |
| 第一章 绪论 | 第12-28页 |
| ·前言 | 第12页 |
| ·CD36概述 | 第12-15页 |
| ·CD36的结构 | 第12-13页 |
| ·CD36的功能 | 第13-15页 |
| ·CD36跨膜多肽的合成 | 第15-19页 |
| ·固相合成法简介 | 第15-18页 |
| ·Boc合成法 | 第16-17页 |
| ·Fmoc合成法 | 第17-18页 |
| ·两种方法的比较 | 第18页 |
| ·纯化鉴定方法 | 第18-19页 |
| ·反相高效液相色谱(RP-HPLC) | 第18页 |
| ·辅助基质电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS) | 第18-19页 |
| ·跨膜区蛋白相互作用研究 | 第19-25页 |
| ·SDS-PAGE | 第21页 |
| ·圆二色谱(CD) | 第21-23页 |
| ·圆二色谱基本原理 | 第21-22页 |
| ·蛋白质的圆二色性 | 第22-23页 |
| ·荧光共振能量转移(FRET) | 第23-24页 |
| ·TOXCAT | 第24-25页 |
| ·研究意义和内容 | 第25-28页 |
| ·研究意义 | 第25页 |
| ·研究内容 | 第25-28页 |
| 第二章 CD36跨膜多肽的合成及纯化鉴定研究 | 第28-44页 |
| ·前言 | 第28页 |
| ·实验仪器及材料 | 第28-30页 |
| ·实验仪器 | 第28-29页 |
| ·实验材料 | 第29-30页 |
| ·实验方法 | 第30-34页 |
| ·Fmoc固相多肽合成 | 第30-32页 |
| ·树脂溶胀处理 | 第30页 |
| ·脱除Fmoc氨基保护 | 第30-31页 |
| ·肽键的形成 | 第31-32页 |
| ·缩合形成肽链 | 第32页 |
| ·脱除侧链保护及多肽-树脂切割 | 第32页 |
| ·多肽荧光标记 | 第32-33页 |
| ·多肽分离纯化鉴定 | 第33-34页 |
| ·RP-HPLC分析 | 第33-34页 |
| ·多肽质谱鉴定 | 第34页 |
| ·RP-HPLC分离制备 | 第34页 |
| ·结果讨论与分析 | 第34-41页 |
| ·CD36跨膜多肽合成序列 | 第34-35页 |
| ·树脂和保护氨基酸的选择 | 第35-36页 |
| ·缩合剂的选择 | 第36页 |
| ·切割条件确定 | 第36页 |
| ·多肽RP-HPLC分析结果 | 第36-39页 |
| ·多肽质谱鉴定 | 第39-40页 |
| ·RP-HPLC制备结果 | 第40-41页 |
| ·本章小结 | 第41-44页 |
| 第三章 CD36跨膜区多肽作用机理研究 | 第44-58页 |
| ·前言 | 第44页 |
| ·实验仪器及材料 | 第44-45页 |
| ·实验仪器 | 第44-45页 |
| ·实验材料 | 第45页 |
| ·实验方法 | 第45-49页 |
| ·圆二色谱(CD) | 第45-46页 |
| ·样品制备 | 第46页 |
| ·圆二色谱条件 | 第46页 |
| ·SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第46-48页 |
| ·凝胶的配制 | 第46-47页 |
| ·制备样品进行电泳 | 第47-48页 |
| ·凝胶染色脱色 | 第48页 |
| ·荧光共振能量转移(FRET) | 第48-49页 |
| ·样品制备 | 第48-49页 |
| ·FRET条件 | 第49页 |
| ·结果讨论与分析 | 第49-57页 |
| ·多肽构象的CD研究 | 第49-51页 |
| ·SDS-PAGE分析 | 第51-52页 |
| ·FRET研究分析 | 第52-57页 |
| ·荧光基团选择 | 第52-53页 |
| ·样品浓度标定 | 第53-54页 |
| ·标记多肽的FRET | 第54-55页 |
| ·FRET竞争性分析 | 第55-56页 |
| ·FRET计量学研究 | 第56页 |
| ·理论计算 | 第56-57页 |
| ·本章小结 | 第57-58页 |
| 第四章 CD36蛋白细胞内作用机理研究 | 第58-76页 |
| ·前言 | 第58页 |
| ·实验仪器与材料 | 第58-59页 |
| ·实验仪器 | 第58-59页 |
| ·实验材料 | 第59页 |
| ·实验方法 | 第59-68页 |
| ·TOXCAT分析 | 第59-64页 |
| ·引物设计 | 第60页 |
| ·PCR扩增 | 第60-61页 |
| ·酶切 | 第61页 |
| ·连接 | 第61-62页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第62-63页 |
| ·转化 | 第63页 |
| ·CAT活性检测 | 第63-64页 |
| ·MalE互补分析 | 第64-65页 |
| ·Western blot | 第65-66页 |
| ·CD36突变体TOXCAT分析 | 第66-68页 |
| ·CD36跨膜区突变序列 | 第66-67页 |
| ·突变体引物设计 | 第67页 |
| ·突变体CAT活性检测 | 第67-68页 |
| ·突变体合成多肽研究 | 第68页 |
| ·突变体多肽分析鉴定研究 | 第68页 |
| ·结果讨论与分析 | 第68-75页 |
| ·CD36跨膜区TOXCAT分析结果 | 第68-69页 |
| ·MalE互补分析结果 | 第69-70页 |
| ·Western blot分析 | 第70页 |
| ·CD36突变体TOXCAT分析结果 | 第70-71页 |
| ·突变体多肽研究结果 | 第71-75页 |
| ·CD36-G16I多肽序列 | 第71-72页 |
| ·CD36-G16I多肽分析鉴定 | 第72-73页 |
| ·CD36-G16I多肽相互作用分析 | 第73-75页 |
| ·本章小结 | 第75-76页 |
| 第五章 结论 | 第76-78页 |
| ·结论 | 第76-77页 |
| ·进一步展望 | 第77-78页 |
| 参考文献 | 第78-84页 |
| 附录 | 第84-86页 |
| 研究成果及发表的学术论文 | 第86-88页 |
| 致谢 | 第88-90页 |
| 作者和导师简介 | 第90-91页 |
| 附录 | 第91-92页 |