| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 主要缩略词表 | 第12-14页 |
| 第一章 绪论 | 第14-19页 |
| 1.1 研究背景 | 第14-17页 |
| 1.1.1 肝癌 | 第14-15页 |
| 1.1.2 蛋白质精氨酸甲基转移酶 1 | 第15-16页 |
| 1.1.3 上皮间质转化（Epithelial-mesenchymal transition, EMT） | 第16页 |
| 1.1.4 TGF-β/Smad信号通路 | 第16-17页 |
| 1.2 研究目的、内容与技术路线 | 第17-19页 |
| 1.2.1 研究目的 | 第17页 |
| 1.2.2 研究内容 | 第17-18页 |
| 1.2.3 研究技术路线图 | 第18-19页 |
| 第二章 应用数据库分析PRMT1在肝癌组织中的表达 | 第19-24页 |
| 2.1 所用数据库 | 第19页 |
| 2.2 分析过程 | 第19-20页 |
| 2.2.1 分析PRMT1在肝癌组织中mRNA水平的表达 | 第19页 |
| 2.2.2 分析PRMT1在肝癌组织中蛋白质表达量 | 第19页 |
| 2.2.3 分析PRMT1表达量与肝癌患者生存期的关系 | 第19-20页 |
| 2.3 结果 | 第20-22页 |
| 2.3.1 肝癌组织中PRMT1的mRNA水平呈高表达 | 第20页 |
| 2.3.2 肝癌组织中PRMT1的蛋白质水平呈高表达 | 第20-21页 |
| 2.3.3 PRMT1的表达量与肝癌患者生存期相关 | 第21-22页 |
| 2.4 讨论 | 第22-24页 |
| 第三章 构建质粒并筛选稳转细胞株 | 第24-45页 |
| 3.1 实验仪器和材料 | 第24-28页 |
| 3.1.1 肝癌细胞和质粒 | 第24页 |
| 3.1.2 实验仪器 | 第24-25页 |
| 3.1.3 实验耗材 | 第25页 |
| 3.1.4 实验试剂 | 第25-26页 |
| 3.1.5 试剂配制 | 第26-28页 |
| 3.2 实验方法 | 第28-40页 |
| 3.2.1 细胞培养 | 第28-29页 |
| 3.2.2 DH-5α/ Stbl3感受态细胞制备 | 第29页 |
| 3.2.3 过表达质粒Flag-PRMT1构建 | 第29-34页 |
| 3.2.4 过表达稳转细胞筛选 | 第34-35页 |
| 3.2.5 病毒包装 | 第35-36页 |
| 3.2.6 干扰稳转细胞筛选 | 第36页 |
| 3.2.7 RNA提取 | 第36页 |
| 3.2.8 定量PCR | 第36-38页 |
| 3.2.9 Western Blot | 第38-40页 |
| 3.3 数据处理与统计方法 | 第40页 |
| 3.4 结果 | 第40-43页 |
| 3.4.1 PRMT1在不同肝癌细胞系中表达的差异 | 第40-41页 |
| 3.4.2 PCR扩增PRMT1 | 第41页 |
| 3.4.3 pCMV6-Entry质粒双酶切鉴定 | 第41-42页 |
| 3.4.4 sh-PRMT1及Flag-PRMT1质粒测序 | 第42页 |
| 3.4.5 验证质粒sh-PRMT1干扰效率 | 第42-43页 |
| 3.4.6 验证质粒Flag-PRMT1过表达效果 | 第43页 |
| 3.5 讨论 | 第43-45页 |
| 第四章 PRMT1对肝癌细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响 | 第45-57页 |
| 4.1 实验仪器和材料 | 第45-46页 |
| 4.1.1 实验仪器 | 第45页 |
| 4.1.2 实验耗材 | 第45页 |
| 4.1.3 实验试剂 | 第45页 |
| 4.1.4 试剂配制 | 第45页 |
| 4.1.5 主要细胞及质粒 | 第45-46页 |
| 4.2 实验方法 | 第46-48页 |
| 4.2.1 细胞培养 | 第46页 |
| 4.2.2 细胞计数 | 第46页 |
| 4.2.3 CCK-8 实验 | 第46页 |
| 4.2.4 平板克隆形成实验 | 第46-47页 |
| 4.2.5 细胞划痕实验 | 第47页 |
| 4.2.6 Transwell迁移实验 | 第47页 |
| 4.2.7 Transwell侵袭实验 | 第47-48页 |
| 4.2.8 Western Blot | 第48页 |
| 4.3 数据处理与统计方法 | 第48页 |
| 4.4 结果 | 第48-55页 |
| 4.4.1 PRMT1对肝癌细胞增殖能力的影响 | 第48-49页 |
| 4.4.2 PRMT1对肝癌细胞克隆形成能力的影响 | 第49-50页 |
| 4.4.3 PRMT1对肝癌细胞迁移能力的影响 | 第50-53页 |
| 4.4.4 PRMT1对肝癌细胞侵袭能力的影响 | 第53-54页 |
| 4.4.5 PRMT1对肝癌细胞侵袭相关蛋白表达MMP2及MMP9表达的影响 | 第54-55页 |
| 4.5 讨论 | 第55-57页 |
| 第五章 PRMT1对肝癌细胞EMT的影响极其分子机制 | 第57-62页 |
| 5.1 实验仪器和材料 | 第57-58页 |
| 5.1.1 实验仪器 | 第57页 |
| 5.1.2 实验耗材 | 第57页 |
| 5.1.3 实验试剂 | 第57-58页 |
| 5.1.4 试剂配制 | 第58页 |
| 5.2 实验方法 | 第58页 |
| 5.2.1 细胞培养、Western Blot | 第58页 |
| 5.3 数据处理与统计方法 | 第58页 |
| 5.4 结果 | 第58-60页 |
| 5.4.1 PRMT1对上皮间质转化相关蛋白的影响 | 第58-59页 |
| 5.4.2 Western Blot检测PRMT1对TGF-β/Smad信号通路的影响 | 第59-60页 |
| 5.5 讨论 | 第60-62页 |
| 结论与展望 | 第62-64页 |
| 结论 | 第62-63页 |
| 展望 | 第63-64页 |
| 参考文献 | 第64-70页 |
| 综述 | 第70-76页 |
| 参考文献 | 第74-76页 |
| 攻读硕士期间发表论文 | 第76-77页 |
| 致谢 | 第77页 |
